• Tuberculosis and Respiratory Diseases
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• 제70권6호
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• pp.462-473
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• 2011

Background: Smoking is a risk factor for idiopathic pulmonary fibrosis (IPF), but the mechanism of the association remains obscure. There is evidence demonstrating that plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1) is involved in the progression of pulmonary fibrosis. This study was to determine whether the administration of small interfering RNA (siRNA) targeting PAI-1 or PAI-1 inhibitor to the cigarette smoking extract (CSE)-exposed rat alveolar type II epithelial cells (ATII cells) limits the epithelial-mesenchymal transition (EMT). Methods: ATII cells were isolated from lung of SD-rat using percoll gradient method and cultured with 5% CSE. The EMT was determined from the ATII cells by measuring the real-time RT PCR and western blotting after the PAI-1 siRNA transfection to the cells and after administration of tiplaxtinin, an inhibitor of PAI-1. The effect of PAI-1 inhibitor was also evaluated in the bleomycin-induced rats. Results: PAI-1 was overexpressed in the smoking exposed ATII cells and was directly associated with EMT. The EMT from the ATII cells was suppressed by PAI-1 siRNA transfection or administration of tiplaxtinin. Signaling pathways for EMT by smoking extract were through the phosphorylation of SMAD2 and ERK1/2, and finally Snail expression. Tiplaxtinin also suppressed the pulmonary fibrosis and PAI-1 expression in the bleomycin-induced rats. Conclusion: Our data shows that CSE induces rat ATII cells to undergo EMT by PAI-1 via SMAD2-ERK1/2-Snail activation. This suppression of EMT by PAI-1 siRNA transfection or PAI-1 inhibitor in primary type II alveolar epithelial cells might be involved in the attenuation of bleomycin-induced pulmonary fibrosis in rats.

• 생물정신의학
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• 제23권4호
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• pp.140-147
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• 2016

Objectives To determine the relationship between the Alu insertion/deletion (I/D) polymorphism in the tissue-type plasminogen activator (tPA) gene and the clinical outcome of mirtazapine treatment in Korean major depressive disorder (MDD) patients. Methods We enrolled 422 patients in this study. Symptoms were evaluated using the 21-item Hamilton Depression Rating (HAMD-21) Scale. After 1, 2, 4, and 8 weeks of mirtazapine treatment, the association between the Alu I/D polymorphism in the tPA gene and remission/response outcomes were evaluated. Results The proportion of I/I homozygotes in responders was higher than that in non-responders, whereas the proportion of D/D homozygotes in responders was lower than that in non-responders at 8 weeks of treatment (p = 0.032, OR = 1.57). The percentage decline of HAMD-21 scores in I allele carriers was larger than that of D/D homozygotes at 2 and 8 weeks of treatment (p = 0.035 and 0.007, respectively). I allele carriers were associated with remission at 8 weeks of treatment (p = 0.047, OR = 2.2). Conclusions These results show that treatment response and remission to mirtazapine were associated with the Alu I/D polymorphism of the tPA gene. This suggests the Alu I/D polymorphism may be a potential genetic marker for the prediction of therapeutic response to mirtazapine treatment in patients with MDD.

• BMB Reports
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• 제44권1호
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• pp.34-39
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• 2011

Resistance to PAI-1 is a factor which confers clinical benefits in thrombolytic therapy. The only US FDA approved PAI-1 resistant drug is Tenecteplase$^{(R)}$. Deletion variants of t-PA have the advantage of fewer disulfide bonds in addition to higher plasma half lives. A new variant was developed by deletion of the first three domains in t-PA in addition to substitution of KHRR 128-131 amino acids with AAAA in truncated t-PA. The specific activity of this new variant, $570\;IU/{\mu}g$, was found to be similar to those found in full length t-PA (Alteplase$^{(R)}$), $580\;IU/{\mu}g$. A 65% and 85% residual activity after inhibition by rPAI-1 was observed for full length and truncated-mutant form, respectively. This new variant as the first PAI-1 resistant truncated t-PA may offer more advantages in clinical conditions in which high PAI-1 levels makes the thrombolytic system prone to re-occlusion.

• Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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• 제6권2호
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• pp.117-127
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• 2001

The high-level expression of a human single chain urokinase-type plasminogen activator (scu-PA) was achieved by employing a methotrexate (MTX)-dependent gene amplification system in Chinese hamster ovary (CHO) cells. By cotransfecting and coamplifying a scu-PA expression plasmid and dihydrofolate reductase (DHFR) minigene, several scu-PA expressing CHO cell lines were selected and gene-amplified. These recombinant cell lines, NGpUKs, secreted a completely processed scu-PA of 54 kD and up to 60mg/L was accumulated in the culture medium when they were adapted to an optimal MTX concentration. Over 95% of the scu-PA expressed was secreted in the culture medium and identified having the proper function of a plasminogen activator when activated by plasmin. Based on a genomic Southern analysis, a representative subclone, MGpUK-5, exhibited MTX-dependent scu-PA gene amplification, plus the initial single-copy gene of scu-PA eventually turned into about 150 copies of the amplified gene of scu-PA after gradual adaptation to 2.0$\mu$M of MTX. Meanwhile, the transcripts kof the scu-PA gene increased, although -early saturation of transcription was identified at 0.1$\mu$M of MTX. The scu-PA production by the MGpUK-5 subclone also increased relative to the gene amplification and increased transcripts, however, the relationship was not linearly proportional. Accordingly, since the MGpUK cell lines expressed elevated levels of enzymatically active scu-PA, these cell lines could be applied to the largescale production of scu-PA.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제16권6호
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• pp.522-525
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• 1988

무혈청 배지에 생산촉진제로 30$\mu$g/m$\ell$의 Heparin 을 첨가해 정상인의 섬유 세포로부터 상업적으로 tPA를 생산할 수 있는 방법의 개발과, 효과적인 tPA 생산을 위해 대량 배양에 적합한 무혈청 배지의 조성을 확립했다. 이 방법으로 연속배양 공법하에서 매일 1.1gram의 tPA가 생산될 수 있으며, 이 생산성은 tPA 생산 단가를 크게 낮출 분만 아니라 무혈청 배지의 사용으로 tPA의 순수 정제 과정을 크게 단축시킬 수 있다. 또한 이 세포에서 생산되는 tPA 는 fibrin lysis 시험결과 섬유질 분해능력이 높음이 입증되었으며, ELISA결과와도 상충했다.

• Journal of Chest Surgery
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• 제32권4호
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• pp.333-340
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• 1999

배경: PAI-1은 t-PA의 억제인자로서 섬유소융해계에 작용을 하여 혈전형성을 유발한다. PAI-1은 동맥경화된 혈관벽에서 분비가 된다. PAI-1의 증가는 동맥경화증의 위험인자가 되는 당뇨병과 고혈압이 동반된 환자에서 보이며 혈전증유발에 위험인자가 될 수 있다. 본 연구는 고혈당과 인슐린 및 angiotensin II가 PAI-1의 생성 및 평활근세포의 증식에 미치는 영향을 규명하고자 하였다. 대상 및 방법:흰쥐 대동맥평활근세포를 5.5 mM과 22 mM의 포도당 배양액을 사용하여 배양하였다. 배양액에 angiotensin II 및 인슐린을 농도 및 배양시간에 따라 첨가하여 Northern blotting방법으로 PAI-1 유전자발현을 나타내었다. 또한 세포 증식에 대한 포도당, 인슐린 및 angiotensin II의 영향을 규명하기 위하여 MTT assay를 사용하였다. 결과: 5.5 mM과 22 mM의 포도당 배양액에서 angiotensin II(100 nM)를 첨가하여 배양한 결과, 22 mM 포도당 배양액에서 PAI-1 mRNA 발현이 증가되었으며 angiotensin II 투여 4시간에 최고치에 도달하였고 6시간까지 지속되었다. 5.5 mM, 22 mM의 포도당 배양액에 angiotensin II의 농도를 0, 10, 100, 200 nM 투여하여 배양한 결과, PAI-1 mRNA의 발현은 angiotensin II 농도에 따른 증가를 보였으며 22 mM 포도당 배양액시 더욱 뚜렷하게 증가되었다. 배양액에 angiotensin II(100 nM)과 인슐린(100 nM)을 투여하여 배양한 결과, PAI-1 mRNA의 발현은 angiotensin II 단독으로 투여시 증가하였으나 인슐린을 첨가하였을 때는 감소하였다. 5.5 mM과 22 mM의 포도당 배양액에 1, 10, 100 nM의 인슐린과 1, 10, 100 nM의 angiotensin II를 첨가한 후 대동맥평활근세포의 성장속도를 비교한 결과, 5.5 mM보다 22 mM의 포도당이 든 배양액에서 대동맥평활근세포의 성장이 촉진되었으며, 인슐린 및 angiotensin II를 첨가한 경우도 대동맥평활근세포의 성장이 증가되었다. 결론:흰쥐 대동맥평활근세포에서 PAI-1 mRNA의 발현은 포도당 농도가 높을수록 증가되며 angiotensin II의 농도 및 배양시간에 따라 증가되고 인슐린 투여로 감소하였다. 또한 angiotensin II의 투여는 22 mM의 고농도 포도당 투여 후 증가된 PAI-1 mRNA 발현 증가를 더욱 증가시켜 PAI-1 mRNA 발현 증가에 상승작용이 있음을 알 수 있다. 그리고 22 mM의 고농도 포도당, 인슐린 및 angiotensin II는 흰쥐의 대동맥평활근세포의 성장을 촉진시켰다.

• Radiation Oncology Journal
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• 제24권1호
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• pp.58-66
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• 2006

목적: 방사선에 의한 신장손상은 궁극적으로 신장 섬유화로 인한 신부전으로 나타나며 여기에는 세포외기질의 변화가 동반된다. 방사선 신장손상에서 신사구체 상피세포의 역할을 알아보기 위하여 방사선에 의한 세포외기질과 연관된 여러 유전자 발현의 변화를 알아보고자 하였다. 대상 및 방법 : 백서 사구체 상피세포 (rat glomerular epithelial cell: GEpC) 에 6 MV 선형가속기 (Siemens, USA)를 이용하여 0, 2, 5, 10, 20 Gy 의 단일 방사선량을 조사한 후 각각 6, 24, 48, 72 시간에 시료를 채취하였다. Northern blot, Western blot, Zymography를 이용하여 fibronectin (Fn), plasminogen activator inhibitor-1 (Pai-1), matrix metalloproteinases-2, 9 (MMP-2, 9), tissue inhibitor of matrix metallproteinase-2 (TIMP-2), tissue-type plasminogen activator (t-PA), Urokinase-type plasminogen activator (u-PA)의 발현을 측정하였다. 결과: GEpC 에 대한 10 Gy 단일 방사선 조사후 24 시간부터 Fn mRNA 가 유의한 증가를 나타냈으며 48 시간에 측정한 Fn 단백질은 5, 10 Gy 의 방사선량에서 유의하게 증가되었다. 방사선조사에 의해서 Pai-1 유전자의 발현도 mRNA 및 단백질 단계에서 증가되었으며, 특히 10Gy 조사 후 24, 48 시간에 측정한 mRNA 의 증가는 통계적으로 유의하였다. GEpC에 방사선조사 후 24 시간에 측정한 MMP-2 활성형은 방사선량에 따라 증가하였으나 통계학적 유의성은 없었다. 그밖의 MMP-9, TIMP-2, t-PA 와 u-PA 는 아무런 변화를 나타내지 않았다. 결론 : 방사선에 의하여 GEpC에서 세포외 기질과 관련된 유전자 발현의 번화가 관찰되었으며 이는 방사선 신장 손상에 GEpC가 관여함을 나타낸다.

• 한국산학기술학회논문지
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• 제18권7호
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• pp.140-148
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• 2017

본 연구는 고혈압전단계 남자 대학생들이 단순 일회성 유산소 운동을 운동강도를 달리하여 혈압, 혈중지질, 섬유소용해 인자에 미치는 영향에 대하여 연구하였다. 총 6명이 최종 실험 참가자로 선정되어 일회성 달리기 운동을 저강도(50-60% 여유심박수(Heart rate reserve(HRR)), 중강도(60-70%HRR), 고강도(70-80%HRR)로 실시하였다. 혈압(수축기와 이완기), 혈중지질(총 콜레스테롤(total cholesterol(TC), 고밀도단백질 콜레스테롤(high-density lipoprotein cholesterol(HDL-C)), 섬유소 용해인자(tissue plasminogen activator(tPA) and plasminogen activator inhibitor-1(PAI-1))는 운동 전과 후 그리고 운동 후 60분 각각의 강도마다 측정되었다. 실험결과는 저강도 그룹의 수축기 혈압은 운동 후에 유의하게 상승하였다(p=0.013). 하지만 중강도와 고강도 그룹의 수축기 혈압은 유의미하지는 않았으나 효과크기로 분석시 운동 후 60분에 -1.33과 -1.23으로 큰 효과를 보이며 낮아졌다. HDL-C는 중강도(p=0.003)와 고강도 그룹(p=0.002)에서 운동 후 60분에 유의하게 증하였다. tPA는 중강(p=0.021)와 고강도 그룹이(p=0.042) 운동 후에 유의하게 증가하였다. 그리하여 일회성 중강도와 고강도 운동을 했을 때 운동 후 저혈압이 나타나고 HDL-C가 높아지고 또한 tPA 농도가 높아져서 고혈압 전 단계 젊은 남자들이 지속적인 중강도 이상의 운동을 하게 되면 고혈압과 심혈관질환을 예방하고 지연시킬 것이다.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
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• 제75권4호
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• pp.140-149
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• 2013

Background: Plasminogen activator inhibitor type 1 (PAI-1), an important regulator of plasminogen activator system which controls degradation of extracellular membrane and progression of tumor cells, and PAI-1 gene polymorphic variants have been known as the prognostic biomarkers of non-small cell lung cancer patients. Recently, experimental in vitro study revealed that transforming growth factor-${\beta}1$ initiated PAI-1 transcription through epithelial growth factor receptor (EGFR) signaling pathway. However, there is little clinical evidence on the association between PAI-1 A15T gene polymorphism and prognosis of Korean population with pulmonary adenocarcinoma and the influence of activating mutation of EGFR kinase domain. Methods: We retrospectively reviewed the medical records of 171 patients who were diagnosed with pulmonary adenocarcinoma and undergone EGFR mutation analysis from 1995 through 2009. Results: In all patients with pulmonary adenocarcinoma, there was no significant association between PAI-1 A15T polymorphic variants and prognosis for overall survival. However, further subgroup analysis showed that the group with AG/AA genotype had a shorter 3-year survival time than the group with GG genotype in patients with EGFR mutant-type pulmonary adenocarcinoma (mean survival time, 24.9 months vs. 32.5 months, respectively; p=0.015). In multivariate analysis of 3-year survival for patients with pulmonary adenocarcinoma harboring mutant-type EGFR, the AG/AA genotype carriers had poorer prognosis than the GG genotype carriers (hazard ratio, 7.729; 95% confidence interval, 1.414-42.250; p=0.018). Conclusion: According to our study of Korean population with pulmonary adenocarcinoma, AG/AA genotype of PAI-1 A15T would be a significant predictor of poor short-term survival in patients with pulmonary adenocarcinoma harboring mutant-type EGFR.

• Molecules and Cells
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• 제38권2호
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• pp.156-162
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• 2015

Urokinase plasminogen activator (uPA) and urokinase plasminogen activator receptor (uPAR) play a major role in the infiltrative growth of glioblastoma. Downregulatoion of the uPA and uPAR has been reported to inhibit the growth glioblastoma. Here, we demonstrate that tristetraprolin (TTP) inhibits the growth of U87MG human glioma cells through downregulation of uPA and uPAR. Our results show that expression level of TTP is inversely correlated with those of uPA and uPAR in human glioma cells and tissues. TTP binds to the AU-rich elements within the 3' untranslated regions of uPA and uPAR and overexpression of TTP decreased the expression of uPA and uPAR through enhancing the degradation of their mRNAs. In addition, overexpression of TTP inhibited the growth and invasion of U87MG cells. Our findings implicate that TTP can be used as a promising therapeutic target to treat human glioma.