For mass multiplication of an important medicinal plant Coleus forskohlii, a procedure for the high frequency regeneration of Coleus forskohlii has been developed using leaf explants via callus culture. Callus formation occurred in MS medium supplemented with 1-2 mg/L each of NAA and BAP. A large number of shoots were formed on MS + 1 mg/L BAP from 50-60 days old greenish calli. Rooting of healthy shoots occurred on 0.1-0.4 mg/L NAA. The protocol described could be useful in future for genetic manipulation of this plant species.
Sixteen microsatellite markers (simple sequence repeat (SSR) markers) were employed to examine the genetic stability of 27 randomly chosen date palm (Phoenix dactylifera L.) plants produced through somatic embryogenesis with upto forty two in vitro subcultures. No microsatellite DNA variation was observed among all micropropagated plants. Our results indicate that the micropropagation protocol used for rapid in vitro multiplication is appropriate and suitable for clonal propagation of date palm and corroborated that somatic embryogenesis can also be used as one of the safe modes for production of true-to-type plants of date palm. This is the first report on the use of microsatellite DNA markers to establish the genetic stability in micropropagated date palm plants.
한국식물학회 1995년도 식물학심포지움 식물로부터 유용 2차대사산물의 생산 PRODUCTION OF USEFUL SECONDARY METABOLITES FROM PLANTS
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pp.40-56
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1995
During the past two decades, China has seen her great progress in plant biotechnology. Since the Chinese market of herb medicine is huge, while the plant resources are shrinking, particular emphasis has been placed in plant tissue and cell cultures of medicinal plants, this includes fast propagation, protoplast isolation and regeneration, cell suspension cultures and large scale fermentation. To optimize culture conditions for producing secondary compounds in vitro, various media, additives and elicitors have been tested. Successful examples of large scale culture for the secondary metabolite biosynthesis are quite limited : Lithospermum ery throrhizon and Arnebia euchroma for shikonin derivatives, Panax ginseng, P. notoginseng, P. quinquefolium for saponins, and a few other medicinal plants. Recent development of genetic transformation systems of plant cells offered a new approach to in vitro production of secondary compounds. Hairy root induction and cultures, by using Ri-plasmid, have been reported from a number of medicinal plant species, such as Artemisia annua that produces little artemisinin in normal cultured cells, and from Glycyrrhiza uralensis. In the coming five years, Chinese scientists will continue their work on large scale cell cultures of a few of selected plant species, including Taxus spp. and A. annua, for the production of secondary metabolites with medicinal interests, one or two groups of scientists will be engaged in molecular cloning of the key enzymes in plant secondary metabolism.
본 연구는 새로운 항암소재로 가치가 증대되고 있는 개비자나무의 자원을 보존하고 삽목에 의한 증식특성을 구명하기 위하여 식물생장조절물질, 삽목배지 온도, 배양토가 삽목발근에 미치는 영향을 조사하여 삽목에 의한 증식체계를 마련하고자 수행하였다. 발근율과 발근 특성을 고려한 식물생장조절물질 및 농도는 IBA 100 mg/L 처리구가 발근율 88.5%를 비롯한 모든 특성에서 가장 높게 발근이 촉진되는 것으로 나타났다. 배지온도가 발근에 미치는 영향은 $24^{\circ}C$ 삽목의 경우, IBA 100 mg/L 처리구에서 발근율 84.6%로 가장 좋은 효과를 보여 6~7월의 녹지삽이 가장 효과적일 것으로 판단되었다. 배양토가 발근에 미치는 영향은 VPPL(vermiculite+peatmoss+perlite 1:1:1(v/v/v)) 처리구가 발근율 68.5%를 비롯한 모든 특성에서 가장 좋은 결과를 보였다.
This study was carried out to develop an effective seed propagation method for Thalictrum rochebrunianum var. grandisepalum (H. Lev.) Nakai by analyzing seed dormancy types and germination characteristics. Seeds were collected between September to October at Gangwon province, and well-selected seeds were used while being dry-stored at 4±1℃. The seed size ranged 4.52 × 1.58 ㎜ and the weight of thousand seeds were 1,603.5 ± 0.02 ㎎. The moisture content was 7.2%. Seeds were achene type, and morphology characters showed an elliptical shape and rough texture, and light brown in color. Moist-chilling treatment was conducted for dormancy breaking because the seeds had an undeveloped embryo of liner type. The embryo had developed during a moist-chilling period, constantly, and fully developed in 10 weeks. Consequently, it seemed to be non-deep complex or intermediate complex type of morphophysiological dormancy, and embryo dormancy was broken by wet-chilling for 10 weeks. After 10 weeks of wet-chilling treatment, seed germination began. Germination percentage was higher in dark condition raher than light condition and recorded the maximum at 25℃ in the dark (16.3%). A pre-soaking treatment with a combined plant growth hormones promoted germination and shortened T50. Specifically, seed germination of 84.5% was achieved by pre-soaking of seeds with a combined solution of 500 ㎎/L GA3 and 10 ㎎/L kinetin for 24 h after a wet-chilling treatment for 10 weeks. Thus the effect of plant growth hormones coupled with chilling temperature on seed breaking dormancy provide asubsequent growth of seedlings for successful plantation.
Plant micropropagation techniques include bud cultures using apical or axillary buds, organogenesis through callus culture or adventitious bud induction, and somatic embryogenesis. In Korea Forest Research Institute (KFRI), the first tissue culture trial in woody plant was initiated from the bud culture of hybrid poplars (Populus alba x P. glandulosa) in 1978. Since then several mass propagation techniques have developed from conifer and hardwood species, resulting in allowing practical application to Poplars, Birches and some oak species. In addition, useful micropropagation and genetic resources conservation techniques were established in some rare and endangered tree species including Abeliophyllum distichum. Among various in vitro propagation techniques, somatic embryogenesis is known to be the most efficient plant regeneration system. Since the first somatic embryo induction was reported in Tilia amurensis by KFRI in 1986, various protocols for direct or indirect somatic embryogenesis systems have developed in conifer and hardwood species including Larix leptolepis, Pinus rigida x P. taeda F1, Kalopanax septemlobus and Liliodendron tulipifera, etc. However, most of these technologies have been developed using juvenile tissues, i.e. immature zygotic embryos or mature embryos. Therefore it has been difficult to directly application to tree breeding program due to their unproven genetic background. Recently remarkable progresses and new approaches have been achieved in mature tree somatic embryogenesis. In this article we reviewed several micropropagation techniques, which have been mainly developed by KFRI and recent international progresses.
An efficient method for the rapid micropropagation of Camptotheca acuminata from axillary buds was established by application of various plant growth regulators. Among various cytokinins, $0.5mg\;L^{-1}$ BA showed the best performance on shoot multiplication, number average multiple shoots up to 10.8. The propagated shoot cuttings in vitro were elongated on NN basal medium without plant growth regulators. The secondary multiple shoots were induced at the site of initially induced buds. Rooting was induced directly near the base of the shoot on half-strength NN medium containing $0.5mg\;L^{-1}$ of IBA, whereas high concentration of $1.0mgL^{-1}$ IBA could induce callus at the base of the shoot. The camptothecin content, anticancer compound of the micropropagated plants was contained in various tissues. Camptothecin contents were 1.8 and $2.5mg\;g^{-1}$ dry weight in stems from propagated in vitro and mother plant, respectively. This result may be used to develop strategies for large-scale propagation of elite C. acuminata trees.
Since Fukushima nuclear power plant (NPP) accident in 2011, the importance of research on various severe accident phenomena has been emphasized. Particularly, detailed analysis of combustion risk is necessary following the containment damage caused by combustion in the Fukushima accident. Many studies have been conducted to evaluate the risk of local hydrogen concentration increases and flame propagation using computational code. In particular, the potential for combustion by local hydrogen concentration in specific areas within the containment has been emphasized. In this study, the process of flame propagation generated inside a reactor core to containment during a loss of coolant accident (LOCA) was analyzed using MELCOR 2.1 code. Later in the LOCA scenario, it was expected that hydrogen combustion occurred inside the reactor core owing to oxygen inflow through the cold leg break area. The main driving force of the oxygen intrusion is the elevated containment pressure due to the molten corium-concrete interaction. The thermal and mechanical loads caused by the flame threaten the integrity of the containment. Additionally, the containment spray system effectiveness in this situation was evaluated because changes in pressure gradient and concentrations of flammable gases greatly affect the overall behavior of ignition and subsequent containment integrity.
The containment of the nuclear power plant is the last barrier of radiation release when the reactor coolant pipe rupture is occurred. Each plant has to be tested every 5 years whether the containment leak rate meets its technical specifications. We have developed the leak rate test system and in this paper, we describe the results of the uncertainty analysis on the measurement channels and its propagation to the calculation results.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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