Jo, Man-Hyun;Ham, In-Ki;Lee, Mi-Ae;Han, Gyu-Heung;Woo, In-Shik
Plant Resources
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제5권3호
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pp.176-180
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2002
This study was conducted to develop the clonal propagation technique through in vitro culture using by leaf sheath explants of Phalaenopsis grown in vitro. The highest frequency of protocorm-like body (PLB) formation was obtained when explants of leaf sheath were cultured on VW medium containing 30g/L sucrose, 500 mg/L activated charcoal, 150 mVL coconut water, 1 mg/L NAA, 1 mg/L 2ip and 2.5 g/L gelrite. The PLB formation rate of VW medium was highest followed by modified Hyponex medium, and lowest in MS medium. Plantlets induced from PLBs transferred to plastic pots including spagnum moss were well developed.
Himani, Himani;Ramkumar, Thakku R.;Tyagi, Shivi;Sharma, Himanshu;Upadhyay, Santosh K.;Sembi, Jaspreet K.
Journal of Plant Biotechnology
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제46권4호
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pp.255-273
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2019
Orchids are indispensable to the floriculture industry due to their unique floral organization. The flowers have two outer whorls of tepals including a lip (labellum), and two inner whorls, pollinia and gynostemiun (column). The floral organization and development is controlled at the molecular level, mainly by the MADS-box gene family, comprising homeotic genes divided into type I and type II groups. The type I group has four sub-groups, Mα, Mβ, Mγ, and Mδ, playing roles in seed, embryo, and female reproductive organ development; the type II group genes form classes A, B, C, D, and E, which are a part of the MIKCC subgroup with specific roles in florigenesis and organization. The coordinated functioning of these classes regulates the development of various floral whorls. The availability of genome and transcriptome sequence data for Phalaenopsis equestris offers an opportunity to validate the ABCDE model of flower development. Hence, this study sought to characterize the MADS-box gene family and elucidate of the ABCDE model. A total of 48 identified MADS-box proteins, including 20 type I [Mα (12), Mγ (8)] and 28 type II [MIKCC (27), MIKC*(1)] members, were characterized for physico-chemical features and domains and motifs organization. The exon-intron distribution and the upstream cis-regulatory elements in the promoter regions of MADS-box genes were also analysed. The discrete pace of duplication events in type I and type II genes suggested differential evolutionary constraints between groups. The correlation of spatio-temporal expression pattern with the presence of specific cis-regulatory elements and putative protein-protein interaction within the different classes of MADS-box gene family endorse the ABCDE model of floral development.
Interplay between Cymbidium mosaic virus (CymMV)/Odontoglossum ringspot virus (ORSV) and its host plant Phalaenopsis equestris remain largely unknown, which led to deficiency of effective measures to control disease of P. equestris caused by infecting viruses. In this study, for the first time, we characterized viral small interfering RNAs (vsiRNAs) profiles in P. equestris co-infected with CymMV and ORSV through small RNA sequencing technology. CymMV and ORSV small interfering RNAs (siRNAs) demonstrated several general and specific/new characteristics. vsiRNAs, with A/U bias at the first nucleotide, were predominantly 21-nt long and they were derived predominantly (90%) from viral positive-strand RNA. 21-nt siRNA duplexes with 0-nt overhangs were the most abundant 21-nt duplexes, followed by 2-nt overhangs and then 1-nt overhangs 21-nt duplexes in infected P. equestris. Continuous but heterogeneous distribution and secondary structures prediction implied that vsiRNAs originate predominantly by direct Dicer-like enzymes cleavage of imperfect duplexes in the most folded regions of the positive strand of both viruses RNA molecular. Furthermore, we totally predicted 54 target genes by vsiRNAs with psRNATarget server, including disease/stress response-related genes, RNA interference core components, cytoskeleton-related genes, photosynthesis or energy supply related genes. Gene Ontology classification showed that a majority of the predicted targets were related to cellular components and cellular processes and performed a certain function. All target genes were down-regulated with different degree by vsiRNAs as shown by real-time reverse transcription polymerase chain reaction. Taken together, CymMV and ORSV siRNAs played important roles in interplay with P. equestris by down modulating the expression levels of endogenous genes in host plant.
Background and objective: Moth orchids in the vegetative stage are suitable for a multi-layer growing environment in a closed-type plant factory which can be a good alternative that can reduce production costs by reducing cultivation time and energy cost per plant. This study was conducted to find out the optimal rhizospheric environment for different irrigation methods without a potting medium and rhizospheric ventilation for the vegetative growth of young Phalaenopsis hybrid 'Blanc Rouge' (P. KV600 × P. Kang 1) and Phalaenopsis Queen Beer 'Mantefon' in a closed-type plant factory system. Methods: The one-month-old clonal micropropagules with bare roots rapped with a sponges were fixed on the holes of styrofoam plates above growth beds, and were watered using the ebb-and-flow (EBB) and aeroponic (AER) methods with Ichihashi solution (0.5 strength) once a day at 06:00 (P) or 18:00 (S), and both (PS). Rhizospheric ventilation (V) was also applied to change the temperature, relative humidity, and CO2 concentration of the beds. Plants potted into sphagnum moss and watered once a week were used as the control group. Results: After 12 months of treatment, the growth characteristics of the EBB groups were the best among the treatment groups without a medium, but no effect of irrigation timing was observed. V reduced the temperature, relative humidity and CO2 concentration of the beds. Whereas, EBB+V (ebb-and-flow with ventilation) improved plant growth and reduced the occurrence of disorders and withering. Especially, EBB+V showed a similar performance to the control group. Conclusion: The results indicated that the optimal irrigation method without a potting medium for producing middle-aged potted moth orchids was the EBB system with forced rhizospheric ventilation. Therefore, further studies on the optimal ventilation method and moisture control of the crown need to be carried out to develop the irrigation system without a potting medium for vertical farming in closed-type plant factories.
본 실험은 덴파레를 공시재료로 양액재배 기법을 이용하여 유묘생장을 촉진함으로써 재배기간의 단축 및 양질의 덴파레 생산을 위한 재배법을 개발함과 동시에 온실재배현장에 system생산이 가능토록 최적 재배 system 및 양액제어방법을 구명하여 난재배농가에 새로운 재배기법으로 제공코자 그 기초 및 실용가능성 타진을 목적으로 양액재배 시스템 및 양액의 농도에 따른 덴파레 유묘생장을 비교하였으며 그 결과는 다음과 같다. 추계재배시 초장의 경우 담액수경의 1/4농도가 31.7cm로 가장 높았으며 분무경의 1/2농도가 21.6cm로 가장 낮아 최고/최저가 약l0cm의 차이를 보였다. 특히 담액수경의 경우에는 고농도인 1/2농도와 1/4농도가 초장이 높았으며 분무경에서는 비교적 낮은 1/6농도가 높은 것으로 나타나 대조적인 반응을 보였다. 근수에 있어서는 분무경의 1/4농도가 30개로 가장 많았으며 다음이 담액수경의 1/6농도가 26개 정도였다. 최대 근장에 있어서는 근수가 가장 적었던 분무경의 1/2농도가 23.9cm로 가장 길게 나타났다. 생체중의 경우 담액 수경의 1/4농도와 1/2농도가 총 생체중이 가장 높아 주당 40g이상의 생체중을 나타냈다. 엽의 경우 담액수경의 1/4농도가 가장 높았으며, 줄기는 담액수경의 1/2농도가 22.1g으로 현저히 높게 나타났다. 춘계재배에서는 담액수경과 분무경은 정식이후 PH가 상승하여 7.5정도로 높게 나타났다. EC는 각 시스템과 농도간에 큰 변화를 보이지 않았다. 초장의 경우 시스템간에 큰 차이가 나타나지 않았으나 담배액식이 약간 크게 나타났다. 경경과 초장은 담배액식>담배액식>분무경의 순으로 높게 나타났으며 엽장과 엽폭도 담배액식의 고농도(1/2, 1/4)처리구에서 더 높았다.
본 연구는 Agrobacterium을 이용한 효율적인 호접란 형질 전환 시스템의 확립을 위해 실시하였고, 호접란 PLB의 대량증식을 위한 배지 조성은 하이포넥스 기본 배지에 활성탄 1g/l, 티아민 0.1 mg/l 및 sucrose 30 g/l을 배지에 첨가한 경우 PLB가 안정적으로 증식되었다. 계대 배양시 PLB 절단 방법이 PLB의 생존과 증식에 큰 영향을 미치며, PLB 위쪽으로 부터 1/3 부위를 절단하여 계대 배양한 경우 90% 이상의 가장 높은 증식률을 나타났다. Agrobacterium 접종 시 균이 묻어 있는 침으로 PLB를 찔러 상처를 내는 dipping 방법을 이용하여 형질전환 효율을 높일 수 있었다. Agrobacterium 배양액의 흡광도 값이 0.8일 때 형질전환 효율이 가장 높았고, 형질전환된 PLB의 선발은 1 mg/l 정도의 저농도 hygromycin을 함유한 배지에 계대배양 하는 것이 효율적이었다. 호접란 형질전환체를 먼저 GUS assay를 통하여 선발하였고, 선발된 개체로부터 genomic DNA를 추출하여 GUS 특이적 primer와 probe로 PCR과 Southern blot 분석을 수행하고 유전자의 도입여부를 조사한 결과 GUS 염색된 형질전환체에서 정상적으로 GUS 유전자가 도입된 것을 확인할 수 있었다.
줄기기저부절편조직을 이용한 호접란 조직배양묘 생산 체계를 확립하기 위하여 원괴체 유도와 원괴체 증식의 조건을 구명하고자 하였다. 치상조직별 원괴체 유도 성공률을 비교한 결과 줄기기저부절편조직에서 약 45%의 높은 성공률을 나타내었고 다음은 화경액아 배양으로 약 30% 정도의 성공률을 나타낸 반면 근단, 화경절간절편, 화경엽, 성숙엽의 경우에는 성공률이 1% 미만으로 매우 낮았다. 품종별 원괴체의 유도능력에서의 차이를 알아보기 위하여 11개 품종에서 줄기기저부 절편배양을 한 결과 백색계 와 핑크계품종 모두에서 30%이상의 높은 원괴체 성공률을 나타내었다. 줄기기저부배양에서 줄기기저부를 절단하지 않고 천체조직을 치상하였을 경우 거대 원괴체가 유도되었는데 이 거대 원괴체는 진한 녹색으로 보통 원괴체의 3∼5배 정도 이상 큰 것으로 나타났다. 이 거대 원괴체를 증식하기 위해 절단하여 증식배지에 치상하였으나 새로 나온 원괴체는 정상적인 크기의 PLB로 유도되었다. 줄기저부배양에서 얻어낸 원괴체들은 증식과정을 거쳐 정상적인 조직배양묘를 형성하였다 그러므로 이 방법은 호접란 클론묘생산에 쓰일 수 있는 효율적이고 실용적인 방법의 하나라고 판단되었다. 그리고 줄기기저부 절편배양을 이용하여 원괴체를 유도 증식하고 플라스크묘를 만든 뒤 다시 그 묘의 줄기기저부절편을 이용하여 원괴체를 유도 증식하고 플라스크묘를 만들어내는 시스템에 응용함으로써 무한수의 조직배양묘를 연속적으로 생산할 수 있다는 체계가 제시되었다.
본 연구는 근권 온도가 팔레놉시스의 화경 발생과 생육에 미치는 영향을 알아보고자 시험을 수행하였다. 근권 온도는 15, 20, 25 그리고 $30^{\circ}C$로 처리하였으며, 기온은 실험기간 동안 $28^{\circ}C$ 이상으로 유지하였다. 팔레놉시스의 $CO_2$ 흡수, 생체중, 건물중 그리고 분지근수는 $25^{\circ}C$에서 가장 높고, $15^{\circ}C$에서 가장 낮았다. 하지만 안토시아닌 함량은 $15^{\circ}C$에서 가장 높고 $25^{\circ}C$에서 가장 낮았다. 3개월간 근권을 $25^{\circ}C$ 이하로 저온처리해도 화경은 발생하지 않았다. K, Ca, Mg의 함량은 근권온도에 따라 변했으나, N과 P의 함량은 차이가 없었다. Ca과 Mg은 $25^{\circ}C$에서 가장 높았던 반면, K은 $20^{\circ}C$에서 가장 높았다. 본 실험결과 팔레놉시스의 온도 감응 부위는 지상부이며, 영양생장에 적합한 근권 온도는 $25^{\circ}C$이다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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