The physiological properties of extracts from Hizikia fusiforme with different extraction methods (hot water extraction, autoclave extraction and high pressure extraction) were investigated. The amounts of substances related to polyphenol and flavonoids contents were the highest in autoclave extract (30.51 mg/g and 4.78 mg/g, respectively). The DPPH radical scavenging activity was the highest in the autoclave extract (81.80%) at the 5 mg/mL. Autoclave extract exhibited the strongest ABTS radical scavenging activity and reducing power among the three extraction methods. However, ferrous ion chelating, TBA reactive substances and xanthine oxidase inhibition activity of high pressure extract were higher than those of the other extracts. Additionally, the tyrosinase and elastase inhibition activities of high pressure extract with a concentration of 1 mg/mL were higher than those of the other extracts. These results suggest that extracts of Hizikia fusiforme have a potential to act as functional materials, and autoclave and high pressure extractions are superior to hot water extraction for enhancement of the biological activity.
Drug-metabolizing activities of Korean native cattle and swine were investigated from viewpoints of the cytochrome P-450's level, their dependent mixed function oxidase activities, the reactive oxygen species formation and cytosolic enzyme acitivities from each liver homogenates. Level of cytochrome P-450 in the liver microsome of Korean native cattle was $0.28{\pm}0.05nmole/mg$ and that in pigs $0.35{\pm}0.03nmole/mg$. Level of cytochrome $b_5$ of Korean native cattle was $0.24{\pm}0.06nmole/mg$, and that of pigs $0.2{\pm}0.05nmole/mg$, showing no difference between two species. NADPH P-450 reductase were higher in Korean native cattle ($58.3{\pm}5.3nmole/mg/min$) than in pigs ($29.9{\pm}3.8nmole/mg/min$)(p<0.01). The activities of cytochrome P-450 dependent monooxygenases such as ethoxyresorufin O-deethylase (cattle, $96.5{\pm}12.5nmole/mg/min$ ; pigs, $13.6{\pm}2.1nmole/mg/min$), N-benzphetamine N-demethylase (cattle, $5.23{\pm}0.82nmole/mg/min$ ; pigs, $0.76{\pm}0.3nmole/mg/min$) and aniline hydroxylase (cattle, $0.95{\pm}0.1nmole/mg/min$ ; pigs, $0.33{\pm}0.08nmole/mg/min$) were much higher in Korean native cattle than in swine(p<0.01). However, the activity of testosterone $7{\alpha}$-hydroxylase was higher in swine ($90.4{\pm}1.2nmole/mg/min$) than cattle (cattle, $32.8{\pm}1.2nmole/mg/min$). Interestingly, testosterone $16{\alpha}$-hydroxylase, a marker enzyme for P-450 IIA was not detected in both animal species. These results suggest that Korean native cattle and pigs have high contents of P-450 IA1 and P-450 IIIA. Total sulfhydryl compound (cattle, $10.3{\pm}1.1nmole/mg$ ; Pigs, $14.5{\pm}1.8nmole/mg$) and glutathione related enzymes except glutathione reductase (cattle, $38.1{\pm}7.9nmole/mg/min$; swine, $22{\pm}3.6nmole/mg/min$) showed higher levels in swine than in Korean native cattle. Superoxide dismutase (cattle, $7.64{\pm}0.84nmole/mg/min$ ; pigs, $4.47{\pm}0.94nmole/mg/min$) and catalase (cattle, $30.4{\pm}3.7nmole/mg/min$ ; pigs, $17.2{\pm}1.8nmole/mg/min$) were remarkably higher in Korean native cattle than in swine (p<0.05).
The culture conditions needed to maximize the production of laccase from Pholiota highlandensis mycelia were investigated. Among the tested media for laccase production, Coriolus versicolor medium (CVM; 2% dextrose, 0.4% peptone, 0.6% yeast extract, 0.046% KH2PO4, 0.1% K2HPO4, 0.05% MgSO4·7H2O) showed the highest activity for the enzyme. Then, to optimize culture conditions for laccase activity, the influences of various carbon, nitrogen, phosphorus, and inorganic salt sources in CVM were investigated. The optimum culture medium was 2% fructose, 0.4% peptone with 0.6% yeast extract, 0.05% NaH2PO4, and 0.05% MgSO4·7H2O as carbon, nitrogen, phosphorus, and inorganic salt sources, respectively. Several aromatic compounds in the medium enhanced laccase activity to varying degrees. Guaiacol induced maximum laccase production, yielding 114.1 U/ml laccase activity after cultivation for 11 days at 25℃. The optimum pH and temperature for laccase production were 8.0 and 35℃, respectively. Native polyacrylamide-gel electrophoresis (PAGE) followed by laccase-activity staining with 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS) as the substrate was performed to identify the presence of laccase under the optimum conditions studied. Zymogram analysis of the supernatant culture showed an enzymatic band with a molecular mass of about 90 kDa.
A highly efficient, rapid, and reliable multiplex polymerase chain reaction based method for distinguishing ten species of genus Cynoglossus (C. senegalensis, C. abbreviates, C. macrolepidotus, C. arel, C. semilaevis, C. interruptus, C. joyneri, C. lingua, C. robustus, and C. monodi) is described. The species-specific primer sets were designed base on the cytochrome oxidase subunit I gene (1,500 bp). The optimal PCR conditions and primers were selected for ten of Cynoglossus species to determine target base sequences using single PCR. Multiplex PCR using the ten pairs of primers either specifically amplified a DNA fragment of a unique size or failed, depending on each species DNA. The length of amplification fragment of 208 bp for C. senegalensis, 322 bp for C. abbreviates, 493 bp for C. macrolepidotus, 754 bp for C. arel, 874 bp for C. semilaevis, 952 bp for C. interruptus, 1,084 bp for C. joyneri, 1,198 bp for C. lingua, 1,307 bp for C. robustus, and 1,483 bp for C. monodi with the species-specific primers, visualized by agarose gel electrophoresis, allowed perfectly distinction of the Cynoglossus species. The multiplex PCR assay can be easily performed on multiple samples and attain final results in less than 6 hours. This technique should be a useful addition to the molecular typing tools for the tentative identification of Cynoglossus species.
Ha, Ji-Hye;Jeong, Myoung-Hoon;Seo, Yong-Chang;Choi, Woon-Yong;Kim, Ji-Seon;Kim, Haeng-Hoon;Ahn, Ju-Hee;Lee, Hyeon-Yong
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.18
no.6
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pp.421-428
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2010
The bark of Berberis koreana Palibin was fermented by Bifidobacterium longum B6 and Lactobacillus paracasei at $37^{\circ}C$ for 72 hour, then extracted by water solvent at $100^{\circ}C$ for 180 min. Total pholyphenol and flavonoid contents were improved by fermentation process, compared to conventional water extraction. The barks of B. koreana Palibin extracts by B. longum B6 (FE-B.L.) and by L. paracasei (FE-L.P.) showed 17% and 16% cytotoxicity on human normal cell lines(HEK293) at 1.0 mg/$m{\ell}$ of the highest concentration, respectively, which was about 3~5% lower than 20% from normal extracts (NE). DPPH radical scavenging activity of the FE-B.L. and FE-L.P. were about 73% and 75.9% higher than 56.8% of NE. The highest inhibitory potency on xathine oxidase and superoxide dismutase (SOD)-like activities were also measured as 31.9% and 61.9% by adding FE-L.P. of 1.0 mg/$m{\ell}$. On tyrosinase inhibition test, the FE-L.P. showed highest activity as 75.9% at 1.0 mg/$m{\ell}$. Generally, FE-L.P. showed higher antioxidant activities as well as higher tyrosinase inhibition activity, possibly due to high contents of total pholyphenol and flavonoid. In general, fermentation of barks of B. koreana Palibin has relatively better biological activities than normal extracts. Specifically, the extracts fermented by L. paracasei showed higher activities than that from B. longum B6.
This study investigated the effects of green tea on the muscle antioxidative defense system in the white & red gastrocnemius muscles of rats after aerobic exercise. Male Sprague-Dawley rats weighing 150 10 g were randomly assigned to a control group, non-exercise with green tea group (G group), and exercise training group. The exercise training group was then further classified as the training (T) group and training with green tea (TG) group, the latter of which was supplemented with green tea in the drinking water during the experimental period. The rats in the exercise training groups (T and TG) were subjected to aerobic exercise on a treadmill 30 min/day at a speed of 28 m/min (7% incline) 5 days/week, while the other groups (control and G group) were cage confined for 4 weeks. Thereafter, the rats were sacrificed with an injected overdose of pentobarbital just after running. In the white muscle, the xanthine oxidase (XOD) activities were 71 % higher in the T group compared to control group, whereas the TG group had the same activity as the control group. The XOD activities in the red gastrocnemius muscle exhibited the same tendency as in the white muscle. The superoxide dismutase (SOD) activity in the white muscle was lower in the T group compared with the control group, yet significantly higher in the TG group compared with the T group. The SOD activities in the red gastrocnemius muscle exhibited the same tendency as in the white gastrocnemius muscle. The glutathione peroxidase (GSHpx) activities in the white & red gastrocnemius muscles were 43 % lower in the T group compared with the control group, yet the activities in the TG group remained at control levels. The glutathione S-transferase (GST) activity in the white muscle was not significantly different among any of the three groups, but in the red gastrocnemius muscle, the TG group had the same activity as in the control group. The thiobarbituric acid reactive substance (TBARS) contents in the white & red gastrocnemius muscles were higher in the T group than in the control but the control and TG groups had the same concentrations of TBARS. In conclusion, the supplementation of green tea in rats subjected to aerobic exercise was found to reduce the peroxidation of muscle lipids by enhancing the antioxidative defense mechanism.
Park Seung-Taeck;Yoon Hyang-Suk;Hyoung Keon-Young;Cho Chung-Gu;Lee Kang-Chang;Kim Won-Shin;Kim Hyung-Min;Jeon Byung-Hoon;Yun Young-Gap
Herbal Formula Science
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v.7
no.1
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pp.131-141
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1999
In order to eludidate the mechanism of oxidative stress in cultured spinal motor neurons damaged by oxygen free radicals, cytoxicity was assesed by MTT assay and NR assay after spinal motor neurons from mouse were cultured in media containing various concentrations of xanthine oxidase(XO) and hypoxanthine(HX) for 3 hours. In addition, neuroprotective effects of several herb extracts on oxidant-induced neurotoxicity were examined in these cultures, compared with nerve growth factors such as basic fibroblast growth factor(bFGF). XO/HX decreased cell viability in dose- and time dependent manners on cultured mouse spinal motor neurons, and MTT50 and NR50 values were measured at 20mU/ml XO and 0.1mM HX for 3 hours in these cultures. bFGF significantlt increased cell viability. In neuroprotective of herb extracts, Epimedium Koreanum Nakai(EK) and Alpinia oxphylla Mig(IJI) was very effective in the prevention of the neurotoxicity induced by XO/HX in cultured mouse spinal motor neurons. From the above results, it is suggested that XO/HX shows toxic effect in cultured mouse spinal motor neurons and selective herb extracts such as Epimedium Koreanum Nakai(EK) and Alpinia oxphylla Mig(IJI) were very effective in the increase of cell viability against the neurotoxicity induced by oxygen radicals in these cultures.
The study was conducted to investigate the role of vitamin E in the high altitude hypoxia-induced damage to the intestinal barrier in rats. Sprague-Dawley rats were divided into control (Control), high altitude hypoxia (HH), and high altitude hypoxia + vitamin E (250 mg/kg $BW^*d$) (HV) groups. After the third day, the HH and HV groups were placed in a hypobaric chamber at a stimulated elevation of 7000 m for 5 days. The rats in the HV group were given vitamin E by gavage daily for 8 days. The other rats were given equal volume saline. The results showed that high altitude hypoxia caused the enlargement of heart, liver, lung and kidney, and intestinal villi damage. Supplementation with vitamin E significantly alleviated hypoxia-caused damage to the main organs including intestine, increased the serum superoxide dismutase (SOD) (p< 0.05), diamino oxidase (DAO) (p< 0.01) levels, and decreased the serum levels of interleukin-2 (IL-2) (p< 0.01), interleukin-4 (IL-4) (p<0.001), interferon-gamma ($IFN-{\gamma}$) (p<0.01) and malondialdehyde (MDA) (p<0.001), and decreased the serum erythropoietin (EPO) activity (p<0.05). Administration of vitamin E significantly increased the S-IgA (p<0.001) in ileum and significantly improved the expression levels of occludin and $I{\kappa}B{\alpha}$, and decreased the expression levels of hypoxia-inducible factor 1 alpha and 2 alpha ($HIF-1{\alpha}$ and $HIF-2{\alpha}$), Toll-like receptors (TLR4), P-$I{\kappa}B{\alpha}$ and nuclear factor-${\kappa}B$ p65(NF-${\kappa}B$ P65) in ileum compared to the HH group. This study suggested that vitamin E protectis from intestinal injury caused by high altitude hypoxia environment. These effects may be related to the HIF and TLR4/NF-${\kappa}B$ signaling pathway.
Choi, Shinkyu;Na, Hye-Young;Kim, Ji Aee;Cho, Sung-Eun;Suh, Suk Hyo
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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v.17
no.3
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pp.181-187
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2013
Reactive oxygen species (ROS) are generated in various cells, including vascular smooth muscle and endothelial cells, and regulate ion channel functions. $K_{Ca}3.1$ plays an important role in endothelial functions. However, the effects of superoxide and hydrogen peroxide radicals on the expression of this ion channel in the endothelium remain unclear. In this study, we examined the effects of ROS donors on $K_{Ca}3.1$ expression and the $K^+$ current in primary cultured human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). The hydrogen peroxide donor, tert-butyl hydroperoxide (TBHP), upregulated $K_{Ca}3.1$ expression, while the superoxide donors, xanthine/xanthine oxidase mixture (X/XO) and lysophosphatidylcholine (LPC), downregulated its expression, in a concentration-dependent manner. These ROS donor effects were prevented by antioxidants or superoxide dismustase. Phosphorylated extracellular signal-regulated kinase (pERK) was upregulated by TBHP and downregulated by X/XO. In addition, repressor element-1-silencing transcription factor (REST) was downregulated by TBHP, and upregulated by X/XO. Furthermore, $K_{Ca}3.1$ current, which was activated by clamping cells with 1 ${\mu}M$$Ca^{2+}$ and applying the $K_{Ca}3.1$ activator 1-ethyl-2-benzimidazolinone, was further augmented by TBHP, and inhibited by X/XO. These effects were prevented by antioxidants. The results suggest that hydrogen peroxide increases $K_{Ca}3.1$ expression by upregulating pERK and downregulating REST, and augments the $K^+$ current. On the other hand, superoxide reduces $K_{Ca}3.1$ expression by downregulating pERK and upregulating REST, and inhibits the $K^+$ current. ROS thereby play a key role in both physiological and pathological processes in endothelial cells by regulating $K_{Ca}3.1$ and endothelial function.
To improve the growth inhibitory activity against the shoot and root of rice plant (Oryza sativa L) and barnyard grass (Echinochloa crus-galli), a series of N-substituted phenyl-3,4-dimethylmaleimdes derivatives as substrates were synthesized and then their the inhibitory activities of protoporphyrinogen oxidase (1.3.3.4), protox were measured. The quantitative structure-activity relationships (QSAR) between structures and the inhibitory activities were studied quantitatively using the 2D-QSAR method. And also, molecular sharp similarity between the substrate derivatives and protogen, substrare of protox enzyme were studied. The activities of the two plants indicated that barnyard grass had a higher activity than the rice plant and their correlation relationships have shown in proportion for each. Accordingly, the results of SARs suggest that the electron donating groups as $R_2=Sub.X$ group will bind to phenyl ring because the bigger surface area of negative charged atoms in the substrate molecule derivatives may increase to the higher the activity against barnyard grass. Based on the molecular shape similarity, when the derivatives and protogen, subsbrate of protox enzyme were superimposed by atom fitting, the similarity indices (S) were above 0.8 level but the correlation coefficients (r) between S values and the activities showed not good.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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