Wijesooriya Mudhiyanselage Nadeema Dissanayake;Jung Min Heo;Young-Joo Yi
농업과학연구
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제50권4호
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pp.941-952
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2023
The metabolites of agrichemicals, such as organophosphorus pesticides, are known to be more hazardous than their parent pesticides. 3,5,6-trichloro-2-pyridinol (TCP) is a major degradation product of chlorpyrifos, one of the organophosphate insecticides widely used in agriculture. In vivo or in vitro exposure to chlorpyrifos has been known to interfere with male reproductive functions, leading to reduced fertility in mammals. Therefore, this study was performed to examine the changes in the fertilization competence of boar spermatozoa exposed to TCP. Sperm samples were subjected to varying concentrations of TCP (10, 50, 100, 200 µM) and different periods of incubation. Sperm motility, motion kinematics, viability, acrosome integrity, intracellular reactive oxygen species (ROS) production, and gene expression levels (ODf2, ZPBP2, AKAP3 and AKAP4) were evaluated after exposure of the sperm to TCP. A significant dose-dependent reduction in motility was observed in sperm samples incubated with TCP compared to the controls after both incubation periods. Sperm viability was significantly decreased in samples incubated with 50, 100, and 200 µM TCP in both incubation periods. A significantly lower percentage of normal acrosomes and gene expression levels were observed in sperm samples exposed to 50, 100, and 200 µM TCP after both incubation periods, compared to the controls. There was a significant increase in the ROS production in spermatozoa incubated with 100 - 200 µM TCP after both incubation periods. Consequently, the direct exposure of boar spermatozoa to TCP interferes with sperm functions and leads to decreased fertilization. In order to identify and address the various causes of reproductive decline, the impact of chemical metabolites needs to be discussed in depth.
Airborne chlorpyrifos concentrations in formulation workplaces have not been determined in Korea. The aim of the study was to evaluate chlorpyrifos concentrations of air in a formulation workplace and recognize the RBC cholinesterase activities for the formulation workers. 30 air samples (personal or area sampling) were collected and bood samples from 10 workers were collected for RBC chlorinesterase (RBC AChE) activity in a factory on May 2008. Air samples were collected by the National Institute for Occupational Safety and Health (NIOSH) method and were analyzed by GC-MS. Airborne chlorpyrifos concentrations ranged from 0.003 to $12.90mg/m^3$ and geometric mean (GM) was $0.15\;mg/m^3.$ Compared to Korean Occupational Exposure Limit (KOEL) of 0.1 (2011) or $0.2\;mg/m^3$ (2008), at 95% confidence, airborne concentrations exceeded the KOEL 69.7% or 56.1% of the time or less, indicating that this concentration level was unacceptable according to exposure assessment using a LogNorm2$^{(R)}$. Since the workers were continually at work on the organophosphate or carbamate pesticides formulation, individual baseline for RBC AChE activity was not determined. As the results of comparison with reference average value of RBC AChE activity, it was found that a worker was below 70% RBC AChE activity and five workers were abnormal.
Acute respiratory failure is an important risk factor for mortality in patients with acute pesticide poisoning. Therefore, it is necessary to investigate the risk factors to predict respiratory failure in these patients. This study retrospectively investigated the clinical features of respiratory failure among patients with acute pesticide poisoning requiring mechanical ventilation. This study included patients who were admitted with intentional poisoning by pesticide ingestion from January 2017 to December 2019. Paraquat intoxication was excluded. Among 469 patients with acute pesticide poisoning, 398 patients were enrolled in this study. The respiratory failure rate was 30.4%. The rate of respiratory failure according to the type of pesticide was carbamate (75.0%), organophosphate (52.6%), glufosinate (52.1%), glyphosate (23%), pyrethroid (8.9%), and others (17%). The mortality was 25.6% in the respiratory failure group. The risk factors for respiratory failure were old age, low body mass index, and ingestion of more than 300 mL. In conclusion, respiratory failure is a risk factor for mortality in pesticide poisoning. Old age, low body mass index, and ingestion of more than 300 mL are the risk factors for predicting respiratory failure.
Organophosphorus (OP) pesticides, particularly malathion, parathion, diazinon, and chlorpyrifos, are widely used in both agricultural and residential contexts. This refractory quality is shared by certain organ phosphorus insecticides, and it may have unintended consequences for certain non-target soil species. Bioremediation cleans organic and inorganic contaminants using microbes and plants. Organophosphate-hydrolyzing enzymes can transform pesticide residues into non-hazardous byproducts and are increasingly being considered viable solutions to the problem of decontamination. When coupled with system analysis, the multi-omics technique produces important data for functional validation and genetic manipulation, both of which may be used to boost the efficiency of bioremediation systems. RNA-guided nucleases and RNA-guided base editors include zinc-finger nucleases (ZFNs), transcription activator-like effector nucleases (TALENs), and clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR), which are used to alter genes and edit genomes. The review sheds light on key knowledge gaps and suggests approaches to pesticide cleanup using a variety of microbe-assisted methods. Researches, ecologists, and decision-makers can all benefit from having a better understanding of the usefulness and application of systems biology and gene editing in bioremediation evaluations.
Environmental pesticides used for insect control can be transferred from plants to animals even to livestock animals through food chain. Human beings also can be exposed to pesticides by consuming polluted dairy products, including meats, eggs and other milk products. Therefore, the Ministry of Food and Drug Safety (MFDS) established Standard for Pesticide Residue Limits in dairy products. The QuEChERS (quick, easy, cheap, effective, rugged and safe) methods for detecting residual pesticides are relatively well established for fruits and vegetables, however, the methods for meat have not been appropriately studied yet. In the present work, pyraclofos was used as an organophosphate pesticide to examine its tissue residue in experimental animals by QuEChERS methods. For this, pyraclofos (150 mg/kg body weight) was orally administered to male rats once a day for 2 days. After 6, 12, and 24 hr of the treatment, the tissue residues in liver and femoral muscle of the rats were determined using QuEChERS methods followed by HPLC analyses. In preliminary studies, the recovery rates of spiking samples of pyraclofos demonstrated approximately 109~110% from the tissues. In previous study, pyraclofos tissue residues were observed with significantly high levels in livers and muscles at 6 hr of oral treatment. Then, they were almost completely disappeared after 24 hr of the administration, indicating the orally exposed pyraclofos is rapidly absorbed and distributed to body organs, then quickly excreted from the body with a negligible level of tissue residue. The alterations in blood chemistry as well as the histopathology of heart, lung, liver, spleen and kidney have also been investigated in the experimental animals for assessing acute toxic effects of pyraclofos. The obtained blood chemistry indexes (ALT and AST) showed maximum peak values at 12 hr after the oral administration and decreased to the normal levels at 24 hr of the treatment. Histopathologic observation exhibited acute hepatic damages at 24 hr of the treatment. In conclusion, we suggest that QuEChERS method can be adequately optimized for the analysis of pyraclofos residues in animal tissues.
본 실험에서는 acetylcholinesterase(AChE, EC 3.1.1.7)를 이용한 간이 잔류농약 검사법에 필요한, 유기인계 및 카바메이트계 살충제에 대한 감수성이 증가된 AChE(MAChE)를 baculovirus를 이용하여 대량으로 생산하는 시스템을 구축하고 생산된 효소의 특성을 관찰하였다. 한라산에서 채취한 초파리에서 AChE의 cDNA를 합성한 후 PCR을 이용하여 AChE의 lipid anchor부분을 제거하고 site directed mutagenesis에 의해 E107Y, F368L, L408E의 염기서열을 변화시켜 재조합된 MAChE cDNA를 합성하였고 baculovirus vector에 삽입하여 대량생산을 시도하였다. 대량 증식에 필요한 조건으로 감염횟수가 네 번일 때, 그리고 세포수가 $2{\times}10^6$ cell/ml일 때 세포의 증식과 효소의 활성이 극대화됨을 알 수 있었다. His tag을 붙여 Ni-NTA affinity column을 이용하여 MAChE를 정제하였으며, 정제된 효소는 실험조건하에서는 pH(3-10)와 온도$(20-50^{\circ}C)$의 변화에 영향을 받지 않았다. 농약 추출액으로 methanol을 사용했을 때가 ethanol을 사용할 때 보다 효과적임을 알 수 있었다. 대표적인 유기인계와 카바메이트계 농약에 대한 저해율을 조사한 결과 재조합된 MAChE는 대만의 집파리 및 변형되지 않은 AChE에 비하여 전반적으로 농약에 대한 감수성이 높은 것으로 나타났다.
매년 증가하고 있는 농약중독사고 예방대책 마련을 위하여 통계청 마이크로데이터시스템에서 2000년${\sim}$2005년 까지 최근 6년간의 자료를 제공받아 국내 농약중독사망사고 현황을 분석하였다. 농약중독 사망자수는 제초제 및 살균제에 의한 사망수가 가장 많았고, 약제별로는 특히, 패러�R디클로라이드 액제, 유기 인계 농약, 글라이포세이트 순으로 조사되었다. 전체약물중독사고 사망자중 농약으로 인한 사망자가 매년 증가하여 2005년에 68.5% 를 차지하였다. 농약중독사고 원인은 자살 비율이 $80.5{\sim}91.9%$로 농약에 의한 자살을 예방할 수 있는 대책 마련이 시급한 실정이다. 지역별 농약중독사망자수를 분석한 결과 주요 7대 도시지역이 전체 사망자수의 평균 21.6%를 차지하였고, 전국 9개 도지역에서 평균 78.4%를 차지하였으며, 직업별 분포는 농림, 어업인이 27.4%, 주부와 학생을 포함한 무직 등 비농업인이 72.6%로 조사되었다. 이상의 자료분석결과, 농약중독사망자수가 매년 증가하는 경향을 보이고 있으므로, 사망자수를 줄이고 농약중독 사고를 예방하기 위해서 농업 인에게는 농약안전사용을 위한 교육을 강화하고, 비농업 인에게는 독성이 강한 농약의 구입을 제한하는 등 철저한 농약관리가 필요한 것으로 판단된다.
Health effects of pesticide among vinylhouse workers in Sangjoo County, Kyungpook Province were assessed by measuring cholinesterase, glutathion reductase, and methemoglobin. Activities of cholinesterases among vinylhouse workers and general farmers were 3.89U and 3.98U in serum and 5.29U and 5.50U in red blood cells, respectively. While levels of methemoglobin between vinylhouse workers(0.16%) and general farmers(0.17%) were very similar, glutathione reductase among vinylhouse workers were 8% lower than that of general farmers. Inhibition of RBC cholinesterase among vinylhouse workers was two times greater than general farmers, suggesting a greater exposure of vinylhouse workers to the organophosphate pesticides. Methemoglobin level among vinylhouse workers with more than or equal to 10 vinylhouse units was 13% higher than that of the workers with less than 10 units. Vinylhouse workers using protective gears during pesticide spray showed higher level of reduced glutathione and lower level of methemoglobin, as compared to the non-users. This indicates that protective gears play an important role against pesticide exposure. Vinylhouse workers practicing good personal hygiene showed a higher level of reduced glutathione, as compared to those with poor personal hygiene, indicating that personal hygiene is also an important factor in reducing pesticide exposure. The present study represents a first attempt to analyze cholinesterase, methemoglobin and glutathione reductase activities among the vinylhouse workers. While neither vinylhouse workers nor general farmers showed abnormal findings among biochemical parameters used in the present study, increased level of methemoglobin and decrease of glutathione reductase activity among vinylhouse workers suggest that these workers have been subject to a higher exposure of pesticide than general farmers.
파라치온에 노출된 붕어의 뇌, 안구, 근육 및 혈청의 AChE 활성 변화를 조사한 결과 파라치온 $63{\mu}g/L$ 농도 이상에서 유의하게 감소하는 경향을 보였다. 실험종료 시 AChE 활성은 뇌에서 79.1~92.4%, 안구에서 76.0~91.5%, 근육에서 89.7~97.6% 및 혈청에서 68.9~78.0% 감소하였다. 실험기간동안 유의한 생존율 변화는 관찰되지 않았으나, 유영이상 및 경련을 보였다. 또한 파라치온에 노출된 붕어의 형태변화는 척추측만(scoliosis)이 관찰되었는데 이러한 변화는 파라치온 $190{\mu}g/L$ 농도는 15%, $380{\mu}g/L$에서는 75%로 관찰되었다. 따라서 붕어의 AChE 활성과 그 밖의 행동 및 형태적 특성은 자연수계에서 파라치온 오염을 추정할 수 있는 생물학적 모니터닝 도구로 활용할 수 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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