Listeria monocytogenes is a representative foodborne pathogen and causes listeriosis. Enterococcus faecium CJNU 2524 was confirmed to produce a bacteriocin with anti-listerial activity. To establish optimal culture conditions for the production of the bacteriocin from E. faecium CJNU 2524, different media (MRS and BHI broth) and temperatures (25℃, 30℃, and 37℃) were investigated. The results showed that the optimal culture conditions were MRS broth and 25℃ or 30℃ temperatures. The crude bacteriocin was stable in a broad range of pH conditions (2.0-10.0), temperatures (60℃-100℃), and organic solvents (methanol, ethanol, acetone, acetonitrile, and chloroform). The bacteriocin activity was abolished when treated with protease but not α-amylase or lipase, indicating the proteinaceous nature of the bacteriocin. Finally, the bacteriocin showed a bactericidal mode of action against L. monocytogenes. Therefore, it can be a biopreservative candidate for controlling L. monocytogenes in dairy and meat products.
본 연구는 글라디올러스 캘러스로부터의 재분화 조건을 구명함으로써 캘러스 배양시스템을 확립하는데 기여하고자 하였다. 글라디올러스 캘러스로부터의 유식물체 획득은 캘러스를 2,4-D 무첨가 1/2 MS고체배지에 치상한 후 24시간 일장하에서 15$^{\circ}C$로 배양하였을 때 효과적이었다. 캘러스로부터의 기관형성에 미치는 배양방법의 영향을 검토한 결과, 부정근의 형성은 액체진탕배양이 그리고 부정아의 형성은 액채정치배양이 각각 우수한 것으로 확인되었다. 본 실험의 결과를 통해 글라디올러스 ‘Topaz' 캘러스로부터의 재분화를 위한 최적 배양 조건을 선발하는 한편, 액체진탕배양법에 의해 기관-캘러스 혼합체를 유도할 수 있었으며, 이를 이용하여 기내 유식물체를 대량생산할 수 있는 가능성을 확인할 수 있었다.
We determined the optimal culture conditions for obtaining the maximum number of intestinal bacteria from the olive flounder Paralichthys olivaceus, and studied bacterial diversity using both culture-dependent and culture-independent methods. Using six culture conditions, mean bacterial numbers were greater than $10^6$ per gram of gut mucus, regardless of the medium. However, the bacterial diversity, based on colony morphology, appeared much higher on Marine agar (MA) and Zobell 2216 agar than on other media. We found eight and 17 cultured bacterial phylotypes with 99% minimum similarity in gut mucus grown on MA and tryptic soy agar, respectively. Furthermore, we used genomic DNA extracted from gut mucus to generate 78 random clones, which were grouped into 25 phylotypes. Of these, six were affiliated with Firmicutes, Actinobacteria, and Verrucomicrobia, and were not found using our culture-dependent methods. Consequently, we believe that Marine agar and Zobell 2216 agar are optimal media for culturing diverse intestinal microbes; we also discovered several novel sequences not previously recognized as part of the gut microbiota of olive flounder.
The mass cultivation of Ecklonia cava Kjellman was studied as a potential biomass source for the extract industry in Korea. Experiments were conducted to investigate the optimal conditions for artificial seed production and mass cultivation of this species. Maximum growth and young thalli development in the nursery culture area occurred at 2 m depth, whereas maximum growth of thalli in the main culture area occurred at 1 m depth. Production of E. cava was between 2.6 and 3.6 kg wet wt. $m^{-1}$ after depth control and removal of fouling organism, etc. The relationship between optimal water depth for culture and underwater irradiance during the E. cava cultivation was calculated as: y = -0.718x + 8.042 ($r^2$=0.976). The growth rates achieved in this trial indicate that E. cava cultures could produce and supply sufficient biomass.
The FimH subunit of type 1-fimbriated Escherichia coli has been determined as a major cause for urinary tract infections. In our previous study, the Adhesin/CTXA2B was expressed as soluble recombinant chimaeric protein derived from the uropathogenic Escherichia coli adhesin genetically coupled to cholera toxin A2B (CTXA2B) subunit in Escherichia coli. Since it is very important to optimize IPTG concentration and culture temperature to maximize cell growth and productivity, These optimal culture factors were determined to increase the productivity of the expressed Adhesin/CTXA2B chimaeric protein in Escherichia coli TB1 carrying pMALfimH/ctxa2b. Our data demonstrate that optimal concentration of IPTG for increased production of chimaeric protein was 0.5 mM. Additionally, culture time was 10 hours and temperature, 37${\circ}C$.
In order to decolorize disperse dyes by using biological treatment process, a strain which has potential ability to degrade disperse dyes was isolated from natural system. To increase the removal efficiency of decolorization in the aqueous solutions, the optimal condition of decolorization by this strain was investigated, and continuous plant test was also developed. The optimal culture conditions of temperature and pH were found to be 4$0^{\circ}C$ and 8.5~9, respectively. When yeast extract was mixed with polypeptone at the mixing ratio of 1:1 as a nitrogen source, decolorization efficiency was highest(93%) among the nitrogen sources. The strain to be screened was excellent to adjust to pH, and it seems to be have ability to control pH needed to growth. The optimal culture conditions in concentration of $MgSO_4\cdot{7H}_2O$ and $KH_2PO_4$ were 0.1%(w/v) and 0.2%(w/v). The result of continuous plant process using wastewater was as following : $COD_{Mn}$ removal efficiency was over than 50%, and this strain was very excellent in decolorization-efficiency for the wastewater of Taegu dyeing complex.
본 연구에서는 울릉도에서 수집한 자생 버섯 균주 5종의 평판배지 배양 특성과 액체배양에서의 특성을 확인하여 자생 균류의 이용을 위한 기초 정보를 확보하였다. 5종의 야생 균주의 최적 배양온도는 25-30℃이고, pH는 4.0-5.0의 산성임을 확인하였다. 특히P. brumalis는 35℃에서 생장 속도가 가장 빠른 것으로 보아 고온성 버섯으로 판단된다. 실험에 사용한 상용 배지 중 최적 배지는 F. punctata의 경우 MEPA 배지, P. ulleungus는 MMNA 배지, G. subnudus는 MEA 배지, T. kmetii는 MMNA 배지, 마지막으로P. brumalis는 모든 배지에서 빠른 생장 속도를 보였으며 6종류의 배지 중 MEA 배지는 모든 균주의 균사 밀도가 낮아 배양이 적합하지 않은 조성임을 확인하였다. P. brumalis는 5종의 균주중 가장 빠른 생육 속도를 보였으며, 반면에P. ulleungus는 가장 저조한 생장을 보여 같은 속(genus)의 종이지만, 생육특성의 차이가 극명함을 보였다. 액체배양을 통해 배양 기간에 따른 배양여액의 건조 중량을 비교한 결과 배양 기간이 길수록 건조량이 감소하는 양상을 보였으며, 특히 6개월 이전까지 큰 폭으로 감소하였다. 이 결과로 정치배양 조건에서의 액체배양은 한달 이상의 배양 시간이 주어져야만 배지 성분을 충분히 이용할 수 있다는 것을 확인하였다. 본 실험의 결과로 5종의 균주에 대한 최적 배양조건을 확립하고 향후 응용 연구에 기초 자료로 활용할 수 있을 것으로 기대한다.
The production of fibrinolytic enzyme from Bacillus subtilis BK-17 was studied in the shake flask cultures. The important medium components studied include nitrogen source, carbon source and inorganic salts. The environmental conditions include initial pH, temperature, shaking speed and working volume. Among various N-sources, C-sources and inorganic salts tested, soybean flour, D-glucose and Na2HPO4 gave the best results, and their optimal concentrations were 1.5%, 0.5% and 0.05%, respectively. The optimal pH and temperature were 9.0 and 37$^{\circ}C$. With decreasing working volume in the range of 25∼100ml in the 250ml flask or increasing shaking speed in the range of 100∼300rpm, the enzyme production was greatly enhanced. The enzyme activity under the optimal conditions was about 1400I.U./ml with urokinase as a standard.
A marine bacterium Bacillus cereus ASK202, agarase producing strain, was treated with some mutagenic agents, ultraviolte(UV), 1-methyl-3-nitro-1-nitrosoguanidine(NTG), and ethyl methane sulfonate(EMS), several times for the increasing of the agarase production After mutagen treatment, we isolated one mutant strain treated with NTG showed the highest stability and agarase productivity and named as Bacillus cereus ASK202-N3. This Bacillus cereus ASK202-N3 strain was well grown in the modified marine medium containing 0.5%(w/v) agar, 0.3%(w/v) yeast extract, and 5.0%(w/v) NaCl, and the optimal initial pH, temperature and culture time were 7.8, $25^{\circ}C$ and 32h, respectively. In the optimal culture conditions, the agarase production was increased to 5.3 fold(850units/L) compared to that of the wild type.
Kluyveromyces marxianus var. marxianus isolated as an inulin-assimilating microorganism produces inulin fructotransferase (inulaseII) which catalyses the conversion of inulin into di-D-fructofuranose 1, 2' : 2, 3' dianhydrde (DFAIII). The DFA produced by the organism was isolated by using active carbon column, and identified as DFAIII by high performance liguid chromatography. The culture medium giving maximum inulaseII production was found to consist of 1% sucrose and 0.75% yeast nitrogen base (YNB). The inulasell production was induced by inulin or sucrose as a carbon source and increased by addition of YNB as a nitrogen source. Optimal initial pH of the culture medium, culture temperature and medium volume for the enzyme production were pH 4.7, 30$\circ$C and 140 ml, respectively. Under the optimal conditions described above, the enzyme activity in the culture supematant reached 4.2 units/ml after cultivation for 36 h. The DFAIII was accumulated at 13.25 mg/ml after 48 h of culture in the Jerusalem artichoke tuber medium.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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