Saccharomycopsis lipolytica의 citrate와 isocitrate의 생산에 미치는 itaconate의 영향을 조사하였다. Itaconate는 isocitrate lyase의 활성을 저해하며 저해율은 0.8mM 농도에서 약 80% 이었고, 개열반응에서는 직선적인 불경쟁적 저해를 나타내었으며 저해상수 Ki값은 0.18mM이었다. Itaconate는 glucose 배지에서는 균의 생육에 영향을 미치지 않았지만 n-hexadecane 배지에서는 균의 생육을 심하게 저해하였다. 한편 itaconate의 첨가량을 증가시킴에 따라 총산에 대한 isocitrate의 생산 비율은 n-hexadecane배지에서는 약 80%까지 증가하였으나 glucose배지에서는 거의 변화가 없었다.
Objective : This study was performed to compare anti-inflammation, anti-oxidation and anti-bacterial effects of Cuscutae Semen(CS) extracted with two kinds of solvents, ethanol and distilled water. Methods : Two kinds of CS extractions were prepared 20, 50, 100 ${\mu}l/mg$. The cytotoxicity was measured by MTT assay in Raw 264.7 cell. The anti-inflammation effect was measured by inhibitory efficacy of NO Production in Raw 264.7 cell. The anti-oxidation effect was measured by DPPH Radical scavenging ability in HaCaT cell. The anti-bacterial effect was measured by inhibition zone diameter on Propionibacterium acnes. Results : 1. Two kinds(100 ${\mu}l/mg$) of CS extraction groups had 50% cytotoxicity in Raw 264.7 cell. 2. All of CS extraction groups were not showed significantly inhibitory effect on NO production. 3. All of CS extracted with ethanol only showed dose-dependently significantly scavenging effect of DPPH radicals. 4. Two kinds of CS extractions did not have a inhibitory effect on Propionibactrium acnes. Conclusion : Two kinds(100 ${\mu}l/mg$) of CS extraction groups have 50% cytotoxicity. Two kinds of CS extractions have not the inhibitory effect on NO production and Propionibactrium acnes. CS groups extracted with ethanol only have a significantly scavenging ability of DPPH radicals. This study suggests that CS extracted with ethanol was effective in anti-oxidation.
Kim, Yoo-Kyung;Kang, Hyo-Joo;Lee, Kyung-Tae;Choi, Jin-Gyu;Chung, Sung-Hyun
Archives of Pharmacal Research
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제26권12호
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pp.1061-1066
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2003
The fruit of Actinidia polygama (AP) has long been used as a folk medicine in Korea for treating pain, rheumatic arthritis and inflammation. The present investigation was carried out to determine the in vivo and in vitro anti-inflammatory activity of AP using several animal models of inflammation. The 70% ethanol extract of the fruit of AP significantly inhibited acetic acidinduced, vascular permeability in a dose dependent manner (23%, 38%, and 41 % inhibition at doses of 200 mg/kg, 500 mg/kg and 1000 mg/kg, respectively). This effect was maintained in AP water-soluble fraction (APW). The APW fraction also showed significant inhibitory activity against the rat paw edema induced by a single treatment of carrageenan. In vitro experiments were performed to demonstrate the inhibitory activities of APW (100 $\mu$ g/ml) on lipopolysaccharide (LPS)-induced nitric oxide (NO) and prostaglandin $E_2$ ($PGE_2$) production. The results showed that APW dose-dependently suppressed LPS-induced NO production in RAW 264.7 macrophages without a notable cytotoxic effect and also decreased inducible NO synthase (iNOS) protein expression. APW also showed a significant inhibitory effect in LPS-induced $PGE_2$ production and cyclooxygenase-2 (COX-2) expression.
Purpose : In this study, to prove the antibacterial effect of Disocorea batatas, which is widely used for food, and to confirm the growth inhibitory effect, the antibacterial activity against L. gasseri, S. mutans, and P. gingivalis was verified. Based on this, it is intended to verify the utility as a preventive and therapeutic composition for dental caries and periodontal disease. Methods : RAW 264.7 cells were used to verify the cell survival rate and NO (Nitric Oxide) inhibitory effect on Disocorea batatas ethanol extract (DBEE). In order to verify the antibacterial effect against L. gasseri, S. mutans, and P. gingivalis, concentrations of 125, 250, and 500 ㎎/㎖ of DBEE were used and measured by the disk diffusion method. In order to confirm the growth inhibitory effect, the absorbance was measured at 600 ㎚ at 3, 6, 12, 18, and 24 hours using the liquid medium dilution method, and the growth inhibitory effect was measured compared to the control group. Results : The cell viability for DBEE was 91 % at 50 ㎎/㎖, and there was no cytotoxicity. The NO production inhibitory effect was shown from 10 ㎍/ml, and the higher the concentration, the greater the inhibitory effect. As for the antimicrobial effect using the disk diffusion method, the higher the concentration, the higher the antibacterial effect. At 125 ㎎/㎖ and 250 ㎎/㎖, S. mutans and L. gasseri showed high antimicrobial activity, and at 500 ㎎/㎖, the antibacterial effect was higher in L. gasseri. The growth inhibitory effect in DBEE was concentration-dependent as the higher the concentration, the higher the growth inhibitory effect, and all of them began to show growth inhibitory effects from 6 hours. Conclusion : Considering that it is widely used as an edible and medicinal material, Disocorea batatas has shown the potential to be used as a substance to prevent and alleviate dental caries and periodontal diseases, and it is believed that further research can be applied to oral health care products.
Bitter melon (Momordica charantia L.) has been used as a medicinal plant due to its biological activity. This study investigated the inhibitory effects on carbohydrase and anti-inflammatory effects of hot-water extract (WEM) and ethanol extract (EEM) from dried bitter melon cultivated in Korea. The inhibitory activities of EEM against ${\alpha}$-amylase and ${\alpha}$-glucosidase were over 70% at 4,000 ppm. The inhibitory activities of EEM were significantly higher than those of WEM at all concentrations. The anti-inflammatory effects were evaluated by measuring nitric oxide (NO) production in LPS-stimulated RAW264.7 cells. EEM did not show cytotoxicity on RAW264.7 cells at the test concentrations. Moreover, the inhibitory effect on NO production in LPS-stimulated RAW264.7 cells was significantly increased by the addition of EEM. These findings suggest that EEM has good inhibitory effect on carbohydrase and anti-inflammatory activity and it has potential as a source of natural functional material.
Veronica peregrina (Scrophylariaceae) has been widely used as a Korean traditional medicine for the treatment of various pathological conditions including infection, hemorrhage and gastric ulcer. In the current study, we investigated the inhibitory effect of methanolic extracts of V. Peregrina (VPM) on the LPS-mediated nitric oxide (NO) production in mouse (C57BL/6) peritoneal macrophages. NO production was significantly down-regulated by the treatment of VPM dose dependently. To evaluate the mechanism of the inhibitory action of VPM on NO production, we performed iNOS enzyme activity assay and checked the change of inducible nitric oxide synthase (iNOS) levels by Western blotting. Although VPM did not affect iNOS enzyme activity, iNOS protein expression was attenuated by VPM indicating VPM inhibits NO production via suppression of iNOS enzyme expression. In addition, VPM attenuated the expression of another pro-inflammatory mediator such as cyclooxygenase-2 (COX-2) in a dose dependent manner. We also found that VPM can reduce trypsin-induced paw edema in mice. Based on this study, we suggest that V. peregrina may be beneficial in diseases which related to macrophage-mediated inflammatory disorders.
Substance P는 교정력이 가해진 치아의 치주인대 중 인장력을 받는 부위에 많이 분포하는 neuropeptide중의 하나이며, 또한 여러 조직에서 neurogenic inflammation을 야기하는 neuropeptide중의 하나로도 알려져 있다. 그러나 중요한 세포외 단백기질인 교원질의 생성에 대한 Substance P의 효과는 잘 알려져 있지 않다. 따라서 이 연구의 목적은 배양치주인대 세포에서 교원질 생성에 대한 Substance P의 효과를 평가하는 것이었다. collagenase-digestion method로 교원질 생성을 평가하였고 mRNA 수준에서 작용효과를 평가하기 위하여 Northern blot hybridization을 시행하였다. 이 연구는 또한 교원질 생성에 대한 prostaglandin과 gelatinase 생성도 포함하였으며 변성된 교원질의 분해를 평가하기 위하여 zymography를 이용하였다. 비교원성 단백질, 교원성 단백질, 상대교원질에 대한 dose-dependent effect를 보면 Substance P는 비교원성 단백질 합성을 증가시켰으나 교원성 단백질 합성은 감소시킨다. 그리하여 총 단백합성에 대한 상대적인 교원질 생성을 나타내는 상대교원질은 $7\%$에서 $3.6\%$로 감소시켰다. 세포를 indomethacin과 동시에 처리할 때 substance P의 교원질 합성 억제효과는 나타나지 않았다. 이것은 Substance P의 교원질 합성 억제효과가 prostaglandin의 생성 때문이라는 것을 의미한다. Substance P의 교원질 합성 억제효과가 procollagen mRNA의 정상(steady-state)수준에 부합하는가를 평가하기 위하여 northern blot hybridization을 시행한 결과 Substance P는 ${\alpha}1(1)$ procollagen mRNA의 양적 변동을 일으키지 않았다. Substance P의 교원질 생성 억제효과는 전사이후의 어떤 단계에서 이루어지는 현상임을 나타낸다. 치주인대세포에서 gelatinase 생성에 대한 Substance P의 효과를 알아보기 위하여 zymography를 이용하였다. zymogram 을 보면 Substance P는 치주인대세포에서 gelatinase 생성에는 아무 효과도 나타내지 않음들 알 수 있다. Substance P의 교원질 생성 억제효과가 치주인대세포에 대해 선택적인가 아닌가를알아보기 위하여 MC3T3-E1세포를 이용하였는데 Substance P는 MC3T3-E1세포의 교원질 합성에는 영향을 미치지 않았다. 이상에서 Substance P는 인간의 치주인대세포에서 교원질 합성을 억제하였다. 이 효과는 procollagen mRNA와 gelatinase 생성의 정상(steady-state) 수준의 변화 때문이 아니라 prostaglandin 생성과 연관이 있음을 알았다.
In this study, we investigated antibacterial activity and nitric oxide production inhibitory effect of the methanol extract and its fractions from Paeoniae Radix. In antibacterial activity by the disc diffusion assay against S. aureus, S. epidermidis and P. aeruginosa, the ethyl acetate fraction showed stronger antibacterial activity than other fractions and the extract. Moreover, the ethyl acetate fraction showed strong nitric oxide (NO) production inhibitory effect in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated RAW 264.7 cell. However, in NO scavenging ability, the chloroform fraction was higher than the other fractions and the extract. In the lactate dehydrogenase (LDH) assay against RAW 264.7 cell, the extract and fractions were exhibited normal LDH release level as nontoxic result without the ehtyl acetate fraction of 100 ${\mu}g/ml$. As a result, the ethyl acetate fraction and chloroform fraction of the methanol extract from Paeoniae Radix could be applicable to functional materials for antibacterial and anti-inflammatory related fields, respectively.
Nitric oxide (NO) can mediate numerous physiological processes, including vasodilation, neurotransmission, cytotoxicity, secretion and inflammatory response. The regulation of NO production by inducible NO synthase (iNOS) is considered to be the possible target of the development of anti-inflammatory agent, based on the observation that NO can activate cyclooxygenase, which results in the synthesis of prostaglandins. In an effort to screen new inhibitor of NO production from about 352 species of herbal extracts, we found 9 species with 50% or more inhibitory effect on NO production. Especially, the dose-dependent inhibition of NO production in lipopolysaccharide-treated macrophages by two of the herbal extracts (Artemisiae asiaticae Herba and Saussureae Radix) was due to the decrease in the expression of iNOS.
Purpose: Nitric oxide (NO) is a short-lived bioactive molecule that is known to play an important role in the pathogenesis of periodontal disease. In the current study, we investigated the effect of the flavonoid quercetin on the production of NO in murine macrophages activated with lipopolysaccharide (LPS) from Prevotella intermedia, a pathogen related to inflammatory periodontal disease, and tried to elucidate the underlying mechanisms of action. Methods: LPS was isolated from P. intermedia ATCC 25611 cells by the standard hot phenol-water method. The concentration of NO in cell culture supernatants was determined by measuring the accumulation of nitrite. Inducible NO synthase (iNOS) and heme oxygenase-1 (HO-1) protein expression, phosphorylation of c-Jun N-terminal kinase (JNK) and p38, inhibitory ${\kappa}B$$(I{\kappa}B)-{\alpha}$ degradation, and signal transducer and activator of transcription 1 (STAT1) phosphorylation were analyzed via immunoblotting. Results: Quercetin significantly attenuated iNOS-derived NO production in RAW246.7 cells activated by P. intermedia LPS. In addition, quercetin induced HO-1 protein expression in cells activated with P. intermedia LPS. Tin protoporphyrin IX (SnPP), a competitive inhibitor of HO-1, abolished the inhibitory effect of quercetin on LPS-induced NO production. Quercetin did not affect the phosphorylation of JNK and p38 induced by P. intermedia LPS. The degradation of $I{\kappa}B-{\alpha}$ induced by P. intermedia LPS was inhibited when the cells were treated with quercetin. Quercetin also inhibited LPS-induced STAT1 signaling. Conclusions: Quercetin significantly inhibits iNOS-derived NO production in murine macrophages activated by P. intermedia LPS via anti-inflammatory HO-1 induction and inhibition of the nuclear factor-${\kappa}B$ and STAT1 signaling pathways. Our study suggests that quercetin may contribute to the modulation of host-destructive responses mediated by NO and appears to have potential as a novel therapeutic agent for treating inflammatory periodontal disease.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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