This study aimed to develop a semi-nested polymerase chain reaction assay for the direct detection of Mycoplasma synoviae (M. synoviae) from clinical samples using three newly designed oligonucleotide primers specific to the variable lipoprotein haemagglutinin (vlhA) gene and differentiate M. synoviae field strains based on a nucleotide deletion or the insertion of the proline-rich repeat (PRR) region of the vlhA gene. The developed semi-nested polymerase chain reaction (PCR) assay revealed positive results in 12 out of 100 clinical samples collected from chickens showing lameness and joint swelling. Six positive samples were selected randomly for sequencing, and sequence analysis revealed 96.3-100% nucleotide identities compared to the reference sequences. Phylogenetic analysis showed that sequences of the strains in this study were closely related to WVU1853 (Spain), CK.MS.UDL.PK.2014.2 (Pakistan), and F10-2AS (USA) strains, but they were distinct from the M. synoviae-H vaccine strain sequence. M. synoviae obtained from these samples were identified as types A and C with a length of 38 and 32 amino acids, respectively. These results indicated that the specific and sensitive semi-nested PCR could be a useful diagnostic tool for the direct identification of clinical samples, and the sequence analysis of the partial vlhA gene can be useful for typing M. Synoviae.
The present study investigated serological and molecular prevalence of Mycoplasma gallisepticum (MG) and Mycoplasma synoviae (MS) infection in unvaccinated broiler breeder farms in Jeonbuk providence. An enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and polymerase chain reaction (PCR) had been used to determine antibody titers against MG and MS, and genome of these pathogens, respectively. Seventy five percent of farms were seropositive for MG and 94% of farms were seropositive for MS. In addition, the rate of antibody positive flocks against MG were 65.3% (32/49), while the rate of positive flocks against MS were 84.2% (80/95). The geometric mean antibody titers were $802.2{\pm}626$ and $27,726.7{\pm}2426$ against MG and MS, respectively. Interestingly, none of samples was positive for MG genome by PCR, while 94% (farms), 82% (flocks) and 62.6% (broiler breeder) were positive for MS genome by PCR. These findings suggest that the prevalence of MG or MS infection could be higher than expected. Thus, strict prevention program including vaccination and environmental sanitation should be implemented to avoid disease transmission from breeder to broilers as well as transmission among broilers.
Mycoplasma gallisepticum (MG) is major cause of chronic respiratory disease in chickens. M. synoviae (MS) most frequently occurs a subclinical upper respiratory infection but may result in airsacculitis and synovitis in chickens and turkeys. Both mycoplasmas induce economic losses by triggering chronic respiratory signs, airsacculitis and decreased egg production. For prevention of the infections, live attenuated andinactivated vaccines are commercially used for prevention of MG but not MS in Korea. Serum plate agglutination (SPA) and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) have been commonly used for serological diagnosis for MG and MS. Recently, it is believed that MS spread in chickens is very seriously in Korea and respiratory infection with MS causes substantial loss in poultry farms. In this study, we investigated the serological prevalence of MG and MS in unvaccinated chickens between 2008 and 2009. The overall seroprevalence of MG was 24% of 2,094 for individual chickens and 24% of 189 farms. The overall seroprevalence of MS was 36% in 2,095 chickens and 39% in 198 farms. The results show that seropositive ratio of MS is higher than MG. The geographical prevalence of MG has been estimated in following sequence; Gangwon, Jeolla, Gyeonggi, Gyeongsang, and Chungcheong. The geographical prevalence of MS has been estimated as follows; Gangwon, Gyeonggi, Gyeongsang, Chungcheong, and Jeolla. Seasonal seroprevalencewas also examined, and it found that seroprevalence in spring, fall and winter was higher than that in summer in MG, but not in MS. No significant difference was shown in seroprevalence according to breed. Future study about pathogenicity of MS isolates would be needed and economical losses by MS outbreaks should be analyzed. Moreover, we compared sero-positivity obtained with SPA and ELISA. The kappa value of MG between SPA and ELISA was 0.8061 and the kappa value of MS between SPA and ELISA was 0.7649.
This study was carried out to identify the occurrence of transovarian transmitted diseases and antibody positive rates among Korean native breeder chickens. The infection rates with Salmonella pullorum and Salmonella gallinarum among 16-week-old, 36-week-old, and 56-week-old breeder chickens and the antibody positive rates to Egg Drop Syndrome '76, Mycoplasma gallisepticum and Mycoplasma synoviae among 16-week-old, 18-week-old, and 56-week-old breeder chickens were identified, and the antibody positive rates to seven major transovarian transmitted diseases among 1-day-old chicks were investigated. As a result, no infection with Salmonella pullorum and Salmonella gallinarum was found among the investigated subjects of all ages. Vaccinated breeder chickens showed the 100% antibody positive rate to Egg Drop Syndrome '76, and unvaccinated breeder chickens showed the 100% antibody negative rate to Mycoplasma gallisepticum and Mycoplasma synoviae, confirming that there was no infection with Mycoplasma gallisepticum and Mycoplasma synoviae. As a result of the antibody tests of the 1-day-old chicks for transovarian transmitted diseases, it was found that vaccinated chicks showed good antibody positive rates to avian encephalomyelitis, chicken infectious anemia, and avian reovirus, confirming that they had power of defense against the relevant infectious diseases, and that unvaccinated chicks showed the 100% antibody negative rates to avian leukosis, chicken reticuloendotheliosis, and Mycoplasma synoviae, confirming that there was no infection with the relevant diseases. Given that the results of this study showed that among the transovarian transmitted diseases of chickens, there was no history of infection with diseases against which vaccination was not administered and high antibody positive rates were found with diseases against which vaccination was administered, it is judged that chickens with good power of defense against diseases were bred, and it is deemed that constant monitoring and vaccination against transovarian transmitted diseases will be necessary for the control and prevention of the diseases.
Park, Dam-hee;Kim, Kyu-jik;Lim, Tae-Hyun;Kim, Byoung-Yoon;Yun, Jae-Sung;Song, Chang-Seon
Korean Journal of Poultry Science
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v.46
no.4
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pp.249-253
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2019
Various factors negatively affect poultry production, including a multitude of avian pathogens. Among them, Mycoplasma gallisepticum (MG) and Mycoplasma synoviae (MS) cause world-wide economic losses in the poultry industry. Although respectively, MG and MS induce chronic respiratory disease and synovitis in poultry, these pathogens often manifest as clinically inapparent infections and many countries are therefore having difficulties effectively eradicating them. In this study, five broiler breeder farms in Korea were investigated for the presence of Mycoplasma infection from 2016 to 2018. Serum samples were collected for detection of antibodies to mycoplasma species using an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kit. Additionally, the production index and feed conversion rate of broilers were recorded. According to this investigation, broiler breeder farms in 2018 were serologically negative for Mycoplasma infection with broilers exhibiting a high production index and low feed conversion rate. Thus, eradicating mycoplasma in poultry farms is critical for improving chick quality and overall poultry production.
A species-specific 760 base pair(bp) BamHI to EcoRI DNA fragment(fMG-2) of lipoprotein gene was isolated from a Mycoplasma gallisepticum(M gallisepticum) genomic library. Based on the DNA sequence data of fMG-2, a pair of 25bp primers was synthesized. When used in the polymerase chain reaction(PCR), 732bp DNA products were amplified from 6 standard strains and 10 field isolates of M gallisepticum, but not from 2 Mycoplasma synoviae and 7 other Mycoplasma species. The lower detection limit was 100fg of the genomic DNA. Identity of the PCR products was confirmed by comparison of patterns of restriction endonuclease analysis with AseI, DraI, EcoRV and SspI.
This study was conducted from May to December 2016 to investigate the prevalence of antibody titers for Newcastle disease (ND), Infectious Bronchitis (IB), Egg drop syndrome (EDS), Avian pneumovirus (APV), Fowl Typhoid (FT), Mycoplasma gallisepticum (MG), Mycoplasma synoviae (MS) in laying hens in Incheon area. In ND, 418 (99.5%) of the 420 outbreaks were positive. IB showed 330 (78.5%) positive antibody out of 420 cases. EDS showed 419 (99.7%) positive seropositive rates among 420 cases. In the case of APV, 357 cases (85%) were positive in 420 cases. In the case of PT, the positive rate of antibody was 128 (30.4%) out of 420 cases. Among the 420 cases of MG, 222 cases (52.8%) were positive for antibodies. In the case of MS, 395 out of 420 cases (94.0%) were positive. This result suggests that the positive rate of antibody for PT in Incheon area was low. And it was also clear that MS without vaccine is now rampant in Incheon.
We investigated the serological prevalence of avian metapneumovirus (AMPV), avian reovirus (ARV), Mycoplasma gallisepticum (MG) and Mycoplasma synoviae (MS) in 760 broiler breeder (38 flocks), in the Jeonbuk province in 2013. This study was conducted to evaluate the immune and infection status of the broiler breeder flocks against AMPV, ARV, MG, MS by an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Serological test for AMPV were positive 37 (97.3%) flocks and 712 (93.6%) broiler breeder and geometric mean antibody titers were $16,350{\pm}10,195$, ARV were high positive rate 100% (38/38) flocks and 97.8% (743/760). The seropositive flocks against MG were 71.1% (27/38) and the geometric mean antibody titers were $2,474{\pm}2,045$, whereas the rates of positive flocks against MS were 50.0% (19/38) and the geometric mean antibody titers were $1,469{\pm}1,230$.
Detection of Mycoplasma DNA from the 30 cases of cancer tissues and the normal tissues surrounding the cancer tissues obtained from the patients with gastric cancer and the other 30 cases of cancer tissues and the normal tissues surrounding the cancer tissues obtained from the patients with colon cancer were evaluated by polymerase chain reaction(PCR). The PCR products were sequenced using an ABI 377 automatic DNA sequencer, and these sequences were confirmed by comparing sequences with the database of the National Center for Biotechnology Information BLAST network server. Mycoplasmas DNA were defected in 18 (60%) cases of normal tissues which were around gastric cancer and were 13 (43.3%) cases of gastric cancer tissues. Mycoplasmas DNA were detected in 15(50%) cases of normal tissues which were around colon cancer and 12 (40%) cases of colon cancer tissues. The M. faucium, M. subdolum, M. salivarium, M. auris, M. hyosynoviae, and M. conjunctivae were detected from the gastric cancer tissues. The M. faucium, M. subdolum,, M. salivarium, M. auris, M. hyosynoviae, M. bovigenitalium and M. pulmonis were detected from the normal tissues around gastric cancer. The M. faucium, M. subdolum, M. salivarium, M. auris, M. hyosynoviae, M. synoviae M. bovigenitalium, M. gallinarum, and M. moatsii were detected from the colon cancer. The M. faucium, M. subdolum, M. salivarium, M. auris, M. hyosynoviae, M. bovis, M. opalescens, M. bovigenitalium, M. gallinarum, and M. moatsii were detected from the normal tissues around the colon cancer. These results suggest that Mycoplasmas infection may not correlate with gastric cancer and colon cancer, because of the detection rate of Mycoplasmas DNA were not significantly differences between normal and cancer tissues from the patients.
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