Mycelial growth of L. edodes by supplement nutrition of softwood was studied on a sawdust medium. The sawdust used was from the following softwood species : Larix leptolepis, Pinus densiflora and Pinus koraiensis. The added nutritions consisted of carbon nutritions(sucrose, active carbon, xylose, glucose, paper pellet), nitrogen nutritions(potassium nitrate, ammonium chloride, asparagine, glutamic acid) and vegetable oil(rice bran oil). The sawdust medium was a mixture of 76% sawdust, 20% rice bran, 3% carbon nutrition, 0.4% nitrogen nutrition and 0.6% calcium carbonate. Following addition of carbon and nitrogen nutritions on the sawdust medium proved most suitable : L. leptolepis (glucose, glutamic acid), P. densiflora (active carbon, asparagine) and P. koraiensis (xylose, glutamic acid). The highest mycelial growth was obtained from sawdust medium of optimum condition with 97% of L. leptolepis, 110% of P. densiflora and 98% of P. koraiensis. This study has provided useful preliminary information for the cultivation of L. edodes.
The recycling method of enokitake cultural waste and the potentiality of second flush for enokitake were determined, because this fungus is not as prolific as the more commonly cultivated white rot fungi in the conversion of sawdust to mycelial mass. The mycelial growth of F. velutipes on several substrates, variously treated with rice bran was promoted at ratios of 10-20% (w/w) on all substrates, but suppressed at above ratios, although some difference was there. The mycelial densities generally increased correlated to the supplementation contents of rice bran. It could be concluded that F. velutipes preferred mild acidic to acidic conditions for mycelial growth, considering that the mycelial growth rate was highest on waste of pH 6.01, treated with 0.1 % Ca(OH)$_2$ and on populus mixed waste of pH 6.02, non treated. The ranges of substrate bulk densities, which was pertinent for mycelial linear growth were from B.D. (g/cc) 0.17 to 0.23 on waste and populus mixed waste all. The pertinent contents of rice bran supplementation in bottle cultivation was from 20 to 30% on waste and 20% on populus mixed waste, considering the requried duration for pinheading and fruiting yields. Standard bulk density for filling and utilizing the waste and populus mixed waste for commercial f. velutipes cultivation were B.D.(g/cc) 0.19 ~ 0.23, and 0.23~ 0.25, which could be conversed to 510~ 540g/900m1 and 520~ 570g/900m1, respectively, The second flush of F. velutipes was tried and the re-inoculation by sawdust and liquid spawn showed somewhat good results, indicating the potentiality of second crop and suggesting further research for it.
The culture conditions and nutritional requirements for enhanced mycelial growth of the ectomycorrhizal fungus P. tinctorius SMF were determined in flask scale experiments. Optimum culture conditions for growth of P. tinctorius SMF in a further modified Melin-Norkrans broth were as follows; temperature 25~$27^{\circ}C$, agitation 120 rpm, and pH 4.0. P. tinctorius SMF utilized various carbon sources including monosaccharides, disaccharides, and polysaccharides. D-Glucose and mannitol were respectively the first and second most suitable carbon sources for mycelial growth. With D-Glucose as the principal carbon source, supplementation of modified Melin-Norkrans (MMN) broth with Lysine (800 mg/l), Glutamic Acid (500 mg/l), or Proline (50 mg/l) enhanced mycelial yields 63%, 34%, and 22% respectively as compared to growth in medium lacking amino acids. ThiaminㆍHCl+biotin+pyridoxine supplementation also enhanced growth. As compared to mycelial growth in the MMN medium, growth of P. tinctorius SMF was enhanced 120% in MMN broth when the carbon/nitrogen ratio was 25/1 in citrate buffer at pH 4.5, and growth was 50% greater in MMN broth of carbon/nitrogen ratio with a 10/1~20/1 without using the buffer. Standard conditions established for growth of P. tinctorius SMF in MMN broth were 25~$27^{\circ}C$, agitation 120 rpm, buffered to pH 4.0 with citrate, in MMN medium containing 10 g/l D-glucose supplemented with 800 mg/l lysine. In this medium the carbon/nitrogen ratio was 20/1~25/1, and the maximal mycelial yield ($Y_{x/s}$ ) was 0.472 (4.72 mg/ml) after 7 days of incubation, as compared to 0.214 (2.14 mg/ml), when the fungus was grown in standard MMN broth.
목련흰비단병균 Sclerotium rolfsii의 균사생장 및 균핵형성에 대한 thianine, biotin, nicotinic acid, Pyrido-xine, inositol과 DNA 및 RNA의 영향을 조사한 바 그 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 공시균은 thiamine 결핍균으로서 균사생장 최적 thiamine 농도는 20r/l이고 이농도를 초과하면 오히려 균사생장이 억제되어 150r/l에서는 무첨가구와 거이 비슷한 균사생장을 하였다. 2. 공시균의 생장에 있어서 thiamine의 첨가에 따른 질소원 이용도는 $NH_4NO_3>(NH_4)_2SO_4>asparagine>KNO_3$의 순위이며 질소원별 thiamine 최적요구량은 $KNO_3$인 경우 12r/l, asparagine인 경우는 16r/l정도였다. 균핵형성량에 있어서는 $KNO_3>NH_4NO_3>asparagine>(NH_4)_2SO_4$의 순위로 질소원별 thiamine 최적량은 $KNO_3,\;NNO_3,\;NH_4NO_3$가 8r/l에서 균핵의 대부분이 형성되나 asparagine은 16r/l정도였다. 3. 배양액의 pH는 공시균이 생장을 개시하자마자 3.5정도로 급격히 떨어지나 그 이후로는 생장량이 증가함에 따라 완만하게 떨어졌다. 그러나 pH2.2 이하로는 내려가지 않았다. 4. Nicotinic acid는 공시균의 생장 및 균핵형성에 아무런 효과가 없었다. 그러나 thiamine 10r/l와의 공존하에서는 다소의 효과가 있는 것으로 nicotinic acid 7-10mg/l에서 가장 생장이 좋았고 그 이상에서는 생육이 억제되었다. 5. Pyridoxine, biotin 및 inositol은 배지의 질소원이 $(NH_4)_2SO_4$나 asparagine인 경우 모두 공시균의 균사생장 및 균핵형성에 아무런 효과가 없었다. 6. 공시균의 균사생 장에 대한 각종 vitamin의 상호효과는 thiamine, biotin, Pyridoxine, inositol의 4가지 combination에 의해서도 thiamine이 첨가되지 않으면 거이 효과가 나타나지 않았다. 그러나 thiamine+pyridoxine, thiamine + inositol, thiamine + biotin + pyrid oxine, thiamine + biotin + pyridoxine + inositol 구에 있어서는 thiamine단독첨가구와 동등 혹은 그 이상이지만 thiamine+biotin과 thianline+biftin+inositol구는 오히려 떨어졌다. 균핵형성에 있어서는 thiamine단독구에 비하여 각구 모두 약간씩 증가하였다. 7. 공시균의 균사생장에 대한 DNA와 RNA의 효과는 무첨가구에 비하여 다소 인정되는데 DNA보다는 RNA가 좀더 효과적이었다. RNA는 2-6mg/l에서 DNA는 6mg/l에서 가장 좋았다. 균핵형성에 있어서는 효과가 없 었다. 8. RNA의 농도가 증가함에 따라 또 thiamine의 농도가 증가함에 따라 균사생장량이 증가하는 것으로 thiamine의 존재하에 RNA의 효과가 뚜렷하게 나타났다. 그러나 균핵형성에는 효과가 없었다.
목질진흙버섯(Phellinus sp.) 자실체의 인공재배를 위한 기초자료마련의 일환으로 자실체로부터 순수분리한 상황속의 한 균주를 이용하여 참나무 (Quercus aliena), 뽕나무(Morus alba) 및 오리나무(Alnus japonica)의 3종 톱밥기질에 따른 균사생육의 최적조건을 반응표면분석방법으로 조사하였다. 균사생육에 영향을 미치는 3종의 독립변수(쌀겨첨가량, 배지의 초기 pH 및 수분함량)와 그 최적값을 검토한 결과, 쌀겨첨가량은 3종의 톱밥배지 모두에서 약 30%(w/w) 첨가시에 가장 좋았으며, 수분함량은 $65{\sim}70%(w/v)$ 범위 에서 좋았다. 배지의 초기 pH는 참나무와 뽕나무에서는 $pH\;5{\sim}6$, 오리나무 톱밥배지의 경우는 pH 6에서 가장 좋았다. 균사의 생육온도는 모든 톱밥배지에서 $25{\sim}30^{\circ}C$의 온도범위에서 좋았으나, 톱밥수종에 따른 차이를 보였다. 균사생육에 영향을 미치는 쌀겨첨가량$(X_1)$, 배지의 초기 $pH(X_2)$ 및 수분함량 $(X_3)$을 각각 종속변수로 하고, 균사의 생육길이를 독립변수(Y)로 하여 반응 표면분석한 결과, 참나무 톱밥의 경우, 쌀겨첨가량 31.01%(w/w), 배지의 PH 5.31, 그리고 수분함량 69.03%(w/v)에서 얻어졌으며, 이때 기대되는 균사의 생육길이는 8.32cm이었다. 특히, 쌀겨 첨가량$(X_1)$과 수분함량$(X_3)$)의 회귀계수가 높아, 이 변수들이 균사생육에 큰 영향을 미침을 알 수 있었다. 뽕나무 톱밥배지의 경우, 쌀겨첨가량, 배지의 초기 pH 및 수분함량의 정상점은 각각 28.77%(w/w), 5.28및 69.8%(w/v)로, 예측되는 균사의 생육길이는 7.60 cm이었다. 오리나무 톱밥 배지의 정상점은 쌀겨첨가량 28.74%(w/w), 배지의 pH 6.04및 수분함량 66.96%(w/v)으로, 이때, 예상되는 균사의 생육길이는 5.38cm이었다. 이상의 결과로부터 목질진흙버섯의 균사 생육과 독립변수들 사이에는 상관관계가 높았고, 쌀겨첨가량과 배지의 초기 pH가 수분함량보다 균사생육에 더 큰 영향을 미쳤으며, 목질진흙버섯의 균사 생육을 위한 최적의 톱밥 수종은 참나무(Quercus aliena)>뽕나무(Morus alba)>오리나무(Alnus japonica)의 순이었다.
4가지 물질의 분말을 10배액, 100배액, 500배액, 1000배액, 1500배액, 2000배액을 농도별로 처리하여 목이버섯 균사생장과 균사밀도를 조사한 결과는 다음과 같다. Senna은 대조구에 비하여 10배액, 100배액, 500배액, 1000배액, 1500배액 2000배액의 6가지 처리 모두가 균사생장과 밀도가 좋았으며 그중 100배액이 가장 좋았다. L-citrulline 분말은 처리농도 500배액이 대조구에 비해 같은 기간 내에 7.86mm/15일이 더 빨리 자랐으며 균사밀도도 좋아 최적 희석배수를 나타내었다. L-carnitine 분말은 100배액은 대조구에 비해 균사생장이 3.4 mm/15일로 촉진되었으며 균사밀도도 촉진되었다. Garcinia cambogia 분말은 대조구에 비해 6가지 희석배수 모두 균사생장이 억제되는 경향을 나타내었다. 10배액의 가장 진한 희석배수에서 가장 균사생장이 억제되었고 1000배액은 거의 대 조구와 비슷한 경향을 나타내었다. 따라서 L-citrulline, L-carnitine, Senna, Garcinia cambogia 순으로 균사생장과 균사밀도에 촉진적으로 작용하였다.
매미누꽃동충하초(Paecilomyces sinclairii)를 전라남도 백양사의 인근 숲에서 채집하여 균주를 순수 분리하고 균사의 최적 배양조건과 특성을 조사하였다. 균사생장에 적합한 pH는 $5{\sim}9$의 범위였으며 pH 8에서 가장 왕성한 균사생장을 보였고, 온도는 $25{\circ}C$가 적합하였다. 균사생장에 가장 적합한 배지는 Hamada 배지였으며 탄소 영양원은 dextrin, 질소 영양원은 glutamine인 것으로 조사되었다. 균사의 생장은 C/N비가 20:1일 때, 옥수수추출물과 우유가 혼합한 배지에서 가장 양호하였다. 자실체는 20%의 누에번데기가 첨가된 현미배지에서 500lux, $25{\circ}C$의 조건으로 배양할 때 가장 자실체 형성이 우수하였다.
버들송이(A. cylindracea) 의 인공재배(人工栽培)를 위한 균사 배양조건과 원기형성 조건을 톱밥의 종류, 첨가제의 종류 및 농도, 수분의 함량, 온도, pH 별로 조사하였다 . 톱밥배지에서 균사생장에 가장 양호한 첨가제의 종류 및 농도는 밀기울 30%였으며, 톱밥의 종류에 있어서 단독(單獨) 사용시(使用時)는 참나무 톱밥, 혼합(混合) 사용시(使用時)는 참나무 + 낙엽송 톱밥이 가장 양호하였다. 수분의 최적함량은 65%였으며 균사생장 최적온도는 $25\:{\sim}\:28^{\circ}C$였다. 톱밥배지에서 원기형성에 가장 적합한 첨가제의 종류 및 농도, 톱밥의 종류 등은 전술(前述)한 결과와 거의 일치(一致)하였는데 첨가제의 종류는 밀기울, 밀기울 + 미강 30% 일 때 원기형성이 가장 양호하였으며, 원기형성에 가장 적합한 톱밥은 단독(單獨) 사용시(使用時)는 참나무 톱밥, 혼합(混合) 사용시(使用時)는 참나무 + 낙엽송 톱밥, 참나무 + 버드나무 톱밥이었다. 원기형성 최적온도는 $17{\pm}2^{\circ}C$이였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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