평활근 세포에 대한 shear stress의 영향을 알아보기 위해 슬라이드 글라스위에 배양된 牛 대통맥의 평활근 세포를 120시간 동안 0~26 dyn/$cm^2$의 각기 다른 일정한 shear stress의 유체에 노출하였다. 실험 장치를 순환하는 배지의 lactate dehydrogena ase의 농도측정 결과, 본 연구에서 적용된 shear stress 범위에서는 유체의 흐름으로 인하여 세포가 슬라이드 글라스 표면으로부터 이탈되는 현상은 없었다. 표면 $cm^2$ 당 존재하는 세포의 수를 측정한 결과, 평활근 세포는 정체배양시 가장 빨리 성장하였다. 표변에서의 shear stress가 증가할수록 i영활근 세포의 성장은 늦었으며, shear stress가 17 dyn/$cm^2$ 이상에서는 세포의 성장이 관찰되지 않았다.
The differentiation of mouse embryonic stem(ES) cell into smooth muscle cells(SMC) may play a major role in cardiovascular development and under pathophysiological conditions. Therefore, in the present study, we have examined the differentiation of ES cells and its related gene expression. SMC differentiation was indicated by cellular morphology and time-dependent induction of dibutyryl adenosine 3,5-cyclic monophosphate(DBcAMP)and retinoic acid(RA) on smooth muscle ${\alpha}$-actin($SM{\alpha}A$), smooth muscle myosin heavy chain(SMMHC) gene expression. The control was undifferentiated ES cells(protein expressions represent 50-60kDaOct-4). The results of this study show that morphology of embryoid body and confirmation of $SM{\alpha}A$ expression by immunocytochemistry. Moreover, SMMHC and desmin expression was significantly increased by time dependent manner(5, 7, 15 days), in contrast to $SM{\alpha}A$ expression was slightly decreased on 15days. In conclusion, DBcAMP and RA stimulate mouse ES cells differentiation into SMC and enhanced $SM{\alpha}A$, SMMHC and desmin expression.
The present study was done to investigate the effect of co-culturing muscle satellite cells (MSCs) and intramuscular preadipocytes (IPs) on the differentiation of adipocytes and muscle cells isolated from Korean native cattle. MSCs and IPs were single-cultured in 10% fetal bovine serum/Dulbecco's modified Eagles medium (FBS/DMEM) for 48 h followed by culturing in 5% FBS/DMEM as the growth media. Then, the growth media was replaced by differentiation media composed of 2% FBS/DMEM without any additives for the single- or co-culture of muscle cells and intramuscular adipocytes to induce the differentiation of both cell types. Cell differentiation was measured by morphological investigation and cytosolic enzyme analysis of glycerol-3-phosphate dehydrogenase (GPDH) for the adipocytes and creatine kinase (CK) for the muscle cells. In the morphological test, the presence of muscle cells did not stimulate adipocyte differentiation showing more differentiation of the adipocytes in the single-culture compared to the co-culture condition. However, the differentiation of muscle cells was promoted by adipocytes in the co-culture. The results of the enzymatic analysis were highly associated with the morphological results with a statistically higher GPDH activity (p < 0.05) appearing in the single-culture than in the co-culture, whereas the opposite was true for the CK activity of the muscle cells (p < 0.05). By manipulating in vivo the milieu using a co-culture, we could detect the difference in the rate of cell differentiation and suggest that a co-culture system is a more reliable and precise technique compared to a single-culture. Further studies on various co-culture trials including supplementation of differentiating substances, gene expression analysis, etc. should be done to obtain practical and fundamental data.
Increasingly nursing science is embracing the concepts and methodology derived from psycho-neuroimmunology. It has been previously shown that stress increases and immune function declines in students undergoing examinations. To date, however, no many studies have been reported on stress levels, immune function and interventions in Korean students undergoing their first clinical nursing rotation. It was proposed that nursing students during their first clinical rotation experience increase in stress because of the novelty of the situation and their lack of clinical knowledge. It was also hypothesized that biofeedback and progressive relaxation, methods of self-regulation of involuntary autonomic nervous system responses, would reduce the stress response. The purpose of this study is to test the effectiveness of progressive muscle laxation using biofeedback The effectiveness of the experimental methods was tested by measuring the degree of symptoms of stress (SOS) and the values of ephinephrine, pulse rate, blood pressure and natural killer cells. The subjects of this study were thirty nursing students divided into two groups: experimental group was progressive muscle relaxation group using biofeedback and control group. This study was conducted for 8 weeks of clinical practice. Biofeedback training was done by software developed by J&J company (1-410 form for progressive muscle training). Progressive muscle relaxation training according to Jacobson's Theory was done by messaged word from biofeedback. The data was analyzed using Chronbach' ${\alpha}$ and t-test of the SPSS program and the significance level of statistics was 5%. The results of the study were : 1) The progressive muscle relaxation training using biofeedback was effective for the reduction of symptoms of stress(t=-4.248, p<.001) under clinical practice stress conditions. 2) The progressive muscle relaxation training using biofeedback was not effective for the values of epinephrine(t=-1.294, p=.206). 3) The progressive muscle relaxation training using biofeedback was effective for the reduction of systolic blood pressure (t=-2.757, p=.01). 4) The progressive muscle relaxation training using biofeedback was effective for the reduction of diastolic blood pressure (p=-2.032, 0=.05). 5) The progressive muscle relaxation training using biofeedback was not effective for the reduction of pulse rate(t=-15, p=.988). 6) The progressive muscle relaxation training using biofeedback was effective for the maintenance of natural killer cells (t=2.381, p=02). The first clinical rotation for student nurses is a stressful experience as seen by the rise in the SOS in the control group. Biofeedback using progressive muscle relaxation were effective in preventing the rise of symptoms of stress and the blood pressure means when comparing the pre to post clinical experience, The mean natural killer cell count was depressed in the control group but not significantly different in the experimental groups, It is proposed here that stress via the hypothalamic - pituitary - adrenal axis suppressed the NK cell count whereas the relaxation methods prevented the rise in stress and the resulting immune depression. We recommend relaxation techniques using biofeedback as a health promotion technique to reduce psychological stress. In summary. the progressive muscle relaxation training using biofeedback was effective for the reduction of symptoms of stress under clinical practice stress conditions.
Clear cell sarcoma (CCS), also called malignant melanoma of soft parts, is a rare malignant soft tissue tumor and is often associated with tendons or aponeuroses. Most of CCS involve extremities, especially lower extremities, but a tumor occurring in the trunk is rare. We report an extremely rare case of CCS originated in the upper thoracic back muscle. To our knowledge, this case is the second report of CCS of the back muscle.
We have established in culture a spontaneously immortalized bovine embryonic fibroblast (BEF) cell line that has lost p53 and $p16^{INK4a}$ functions. MyoD is a muscle-specific regulator capable of inducing myogenesis in a number of cell types. When the BEF cells were transduced with MyoD they differentiated efficiently to desmin-positive myofibers in the presence of 2% horse serum and 1.7 nM insulin. The myogenic differentiation of this cell line was more rapid and obvious than that of C2C12 cells, as judged by morphological changes and expression of various muscle regulatory factors. To confirm that lack of the p53 and $p16^{INK4a}$ pathway does not prevent MyoD-mediated myogenesis, we established a cell line transformed with SV40LT (BEFV) and introduced MyoD into it. In the presence of 2% horse serum and 1.7 nM insulin, the MyoD-transduced BEFV cells differentiated like the MyoD-transduced BEFS cells, and displayed a similar pattern of expression of muscle regulatory proteins. Taken together, our results indicate that MyoD overexpression overcomes the defect in muscle differentiation associated with immortalization and cell transformation caused by the loss of p53 and Rb functions.
A new cell-cross bridge mechanics model is proposed to analyze the mechanics of heart muscle. Electrophysiology of a cardiac cell is numerically approximated using the previous model of human ventricular myocyte. Ion transports across cell membrane initiated by action potential induce excitation-contraction mechanism in the cell via cross bridge dynamics. Negroni and Lascano model (NL model) is employed to compute the tension of cross bridge closely related to ion dynamics in cytoplasm.
Losartan is a selective angiotensin II (Ang II) type 1 ($AT_1$) receptor antagonist which inhibits vascular smooth muscle cells (VSMCs) contraction and proliferation. We hypothesized that losartan may prevent cell proliferation by activating AMP-activated protein kinase (AMPK) in VSMCs. VSMCs were treated with various concentrations of losartan. AMPK activation was measured by Western blot analysis and cell proliferation was measured by MTT assay and flowcytometry. Losartan dose- and time-dependently increased the phosphorylation of AMPK and its downstream target, acetyl-CoA carboxylase (ACC) in VSMCs. Losartan also significantly decreased the Ang II- or 15% FBS-induced VSMC proliferation by inhibiting the expression of cell cycle associated proteins, such as p-Rb, cyclin D, and cyclin E. Compound C, a specific inhibitor of AMPK, or AMPK siRNA blocked the losartan-induced inhibition of cell proliferation and the $G_0/G_1$ cell cycle arrest. These data suggest that losartan-induced AMPK activation might attenuate Ang II-induced VSMC proliferation through the inhibition of cell cycle progression.
Skeletal muscle tissues feature cellular heterogeneity, including differentiated myofibers, myoblasts, and satellite cells. Thanks to the presence of undifferentiated myoblasts and satellite cells, skeletal muscle tissues can self-regenerate after injury. In skeletal muscle regeneration, the collective motions among these cell types must play a significant role, but little is known about the dynamic collective behavior during the regeneration. In this study, we constructed in vitro platform to visualize the migration behavior of skeletal muscle cells in specific conditions that mimic the biochemical environment of injured skeletal muscles. We then visualized the spatiotemporal distribution of stresses arising from the differential collectiveness in the cellular clusters under different conditions. From these analyses, we identified that the heterogeneous population of muscle cells exhibited distinct collective migration patterns in the injury-mimicking condition, suggesting selective activation of a specific cell type by the biochemical cues from the injured skeletal muscles.
Objectives : This study is to effect of improving muscle atrophy through water extract on the solid-phase fermentation extraction with Phellinus linteus of discarded Schisandra chinensis in an atorvastatin-induced atrophy C2C12 cell. Methods : C2C12 myoblast were differentiated into myotube by 2% horse serum medium for 6 days, and then treated solid-phase fermentation(S-P) extract at different concentrations for 24h. To investigate the effect of S-P extract on the induction of muscle atrophy and expression of atrophy-related genes and apoptosis in differentiated C2C12 myotubes using a GSH, ROS, real-time PCR, western blots analysis. Results : As a result of treatment with atorvastatin at concentrations of 5, 10, and 20 uM on the 6th day of differentiation in C2C12 myotube cells, it was confirmed that the cell morphology was damaged in a concentration-dependent manner, and the length and thickness of the myotube also decreased in a concentration-dependent manner. Treatment with S-P extract (50, 100 and 200 ㎍/㎖) increased of GSH and inhibited ROS in the atorvastatin-induced muscle atrophy cell model at a concentration that did not induce toxicity. In addition, it was confirmed that it has an effect on muscle reduction by inhibiting apoptosis of muscle cells as well as being involved in protein production and degradation of muscle cells. Conclusions : Atorvastatin-induced atrophy C2C12 cell, S-P extract activates related to differentiation/generation and proteolysis, and inhibits cell death of atrophy in C2C12 cell. Based on this, it is necessary to prove its effectiveness through animal models and human application test, but it is considered to be discarded Schisandra chinensis can present the potential for development as a recycling industrial material.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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