It is important to coordinated interaction among neurons, astrocytes and endothelial cells to maintain the function of brain. To study their regulatory mechanisms in vitro system, the co-culture system among the isolated cells from brain may be needed. However, the method for purifying brain microvascular endothelial cells (BMEC) far culture have not established yet. In this study, the proper culture methods of mice cells using two different strains, CD1 and C57BL6, to obtain the pure and plentiful endothelial cells were described. The flatted-round forms of CD1 endothelial cells grew on the collagen-IV coating plates, while the purified cells from C57 mice preferred type collagen-I dishes for their growth. Both cells displayed anti-PECAM-1 (CD31) and von Willebrand Factor immune-reactivity. These results indicated that different coating materials not only improve attachment of isolated cells but also promoting growth of cells, suggesting that this method of purifying murine Brain microvascular endothelial cells (BMEC) provides a suitable model to investigate blood-brain-barrier (BBB) properties within neurovascular unit in vitro.
An embryo-derived platelet activating factor (PAF) has been demonstrated to play an important role in reproduction. This report examined the effect of PAF on ovulation, fertilization, embryo development, implantation and fetal viability by using murine model. PAF had no stimulatory effect on ovulation and fertilization. But PAF had stimulatory effect on embryo development in in-vitro test, in spite of no effect on implantation and fetal viability. These results demonstrate that exogenous PAF could enhance embryo development and implantation and give suggestion that PAF may play an role in human IVF program.
Objective: In this study, we investigated the effects of Rhizoma Cimicifugae (RC) on the induction of nitric oxide (NO) in RAW 264.7 murine macrophages treated with lipopolysaccharide (LPS). Methods: We examined whether RC have an antipyretic effect by inhibition of COX and/or NOS in fever that is evoked by an intraperitoneal injection of LPS in rats. Results: 1. RC inhibited NO metabolites produced by activated murine macrophage in a dose-dependent manner. 2. RC had an antipyretic effect in a dose-dependent manner in LPS-induced fever. 3. RC inhibited levels of both COX-2 protein and iNOS protein increased by the treatment of LPS in brain tissues as well as brain blood vessels. 4. There were no changes in proteins of nNOS/COX-1. Conclusions: RC has an antipyretic effect by attenuating the level of iNOS and COX-2 protein.
In the present study, we determined the antifungal effect of obacunone isolated from Phellodendri Cortex against Candida ablicans, a pathogenic fungus. The antifungal effect was analyzed by an in-vitro susceptibility test and in a murine model of disseminated candidiasis. Possible mechanism of the antifungal activity was also examined. Analyses of data resulting from the susceptibility test revealed that the compound inhibited C. albicans growth. At 25 ${\mu}g$ obacunone/ml, there was app. 45% reduction of CFUs (colony forming units) as compared to obacunone-untreated C. albicans yeast cells (P<0.01). In the murine model of disseminated candidiasis due to C. albicans, obacunone enhanced resistance of mice against disseminated candidiasis. During an entire period of 30-day observation, control animals all died within 14 days, whereas 60% of obacunone-treated mice survived (P<0.05). In addition, obacunone inhibited the hyphal production, a major virulence factor of C. albicans, from the blastoconidial form. Thus, obacunone appears to have antifungal activity for C. albicans infection. This may possibly be mediated by the blockage of hyphal production.
Objectives : Ulcerative colitis is a chronic relapsing inflammatory disease in the gastrointestinal tract. We investigated whether Aurantii fructus immaturus (AFI) pharmacopuncture has antioxidative and anti-inflammatory effects. Methods : in vitro experiments, 1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl (DPPH) free radical scavenging activity, superoxide dismutase (SOD) activity, prevention on $H_2O_2$-induced cell death in RAW264.7 cell line, DNA fragmentation, and cyclooxygenase-2 mRNA expression induced by lipopolysaccharide (LPS), were analyzed to investigate antioxidative and anti-inflammatory effect of AFI pharmacopuncture. in vivo experiment, a murine model of dextran sulfate sodium (DSS)-induced colitis was used to examine the effect of AFI pharmacopuncture on CV12 at different doses of 5 ${\mu}l$, 0.5 ${\mu}l$, 0.05 ${\mu}l$ for 10 days. Body weight, colon length and macroscopic features were investigated. Results : AFI pharmacopuncture showed DPPH free radical scavenging and SOD active effects in a dose-dependent manner. AFI pharmacopuncture showed a protective effect against $H_2O_2$-induced cell injury and also attenuated LPS-induced COX-2 mRNA expression. In a DSS- induced colitis murine model, however, AFI pharmacopuncture at CV12 had no anti-inflammatory effects. Conclusions : The present results suggest that AFI pharmacopuncture extract may have anti- inflammatory and antioxidative effects in vivo test, but further research on the underlying mechanism is required.
Atopic dermatitis (AD) is an allergic and inflammatory skin. Recently, the limitations and side effects of drug therapy, and possibility of alternative therapies, such as music therapy are emerging in the treatment of AD. Thus, the present study determined whether traditional Korean music, Daegeum Sanjo, regulates AD symptoms by comparing the rhythm, Jinyangjo-jangdan and Jungmori-jangdan in an AD-like murine model. Jinyangjo-jangdan and Jungmori-jangdan of Daegeum Sanjo reduced the duration of scratching behavior increased by DNFB challenge. Jinyangjo-jangdan and Jungmori-jangdan of Daegeum Sanjo attenuated clinical symptoms. However, Jinyangjo-jangdan and Jungmori-jangdan of Daegeum Sanjo did not inhibit IgE, histamine, interleukin (IL)-4, IL-6, or thymic stromal lymphopoietin levels in serum or AD-like skin lesions. In conclusion, the present study suggests that it is possible for Jinyangjo-jangdan and Jungmori-jangdan of Daegeum Sanjo to ameliorate AD symptoms. However, further study is needed to clarify significant mechanisms of Jinyangjo-jangdan and Jungmori-jangdan of Daegeum Sanjo therapy for AD symptoms.
Herein, we demonstrate that butein (1) can prevent swelling in a murine lymphedema model by suppressing tumor necrosis factor α (TNF-α) production. Butein derivatives were synthesized and evaluated to identify compounds with in vitro anti-inflammatory activity. Among them, 20 µM of compounds 7j, 7m, and 14a showed 50% suppression of TNF-α production in mouse peritoneal macrophages after lipopolysaccharide stimulation. Compound 14a, exhibited the strongest potency with an in vitro IC50 of 14.6 µM and suppressed limb volume by 70% in a murine lymphedema model. The prodrug strategy enabled a six-fold increase in kinetic solubility of compound 1 and five-fold higher levels of active metabolite in the blood for compound 14a via oral administration in the pharmacokinetics study. We suggest that the compound 14a could be developed as a potential therapeutic agent targeting anti-inflammatory activity to alleviate lymphedema progression.
The mouse kidney transplantation model serves as an invaluable tool for exploring various aspects of the transplant process, including acute rejection, cellular and humoral rejection, ischemia-reperfusion injury, and the evaluation of novel therapeutic strategies. However, conducting venous anastomosis in this model poses a significant challenge due to the thin and pliable characteristics of the renal vein, which often obstruct clear visualization of the resected vein's edge. This study proposes the adoption of a two stay suture technique to enhance the visualization of the renal vein's edge, thereby facilitating efficient and successful venous anastomosis. A total of 22 mice served as kidney donors in this study. The conventional anchoring suture technique was employed for venous anastomosis in 11 of these mice, while the remaining 11 underwent the two stay suture technique. The anastomosis duration and completion rates were then compared between these two groups. The conventional anchoring suture technique yielded an average anastomosis time of 29 minutes and a completion rate of 64%. In contrast, the two stay suture technique demonstrated a substantial improvement, with an average anastomosis time of 14 minutes and a completion rate of 100%. The two stay suture technique offers a promising solution to enhance visualization during venous anastomosis in murine kidney transplantation. This technique may particularly benefit novices by enabling them to perform venous anastomosis more easily, swiftly, and successfully.
Histological examination of biopsy or postmortem lung tissue from patients with asthma usually reveals thickened airway walls. This change is called airway remodeling, which is characterized by airway eosinophilia, hyperplasia of goblet cells and smooth muscle, and subepithelial fibrosis [1,2]. In this study, we investigated the time-course functional, morphological, biochemical changes of remodeling in a ovalbumin (OVA)-induced murine chronic asthma model. (omitted)
Background and Purpose: Bone metastases rarely occur in patients with oral squamous cell carcinoma (OSCC), so the molecular mechanisms of bone metastasis of OSCC remains unclear. Studies with animal models allow progresses in understanding the molecular events for bone metastasis and provide new targets for therapy. So we tried to establish a murine model for bone metastasis of oral squamous cell carcinoma. Materials and Methods: Human OSCC cells (KB cell line) were xenografted to nude mice via direct inoculation into the tibial marrow. Mice with tibial tumors were sacrificed once a week, until seven weeks after the injection of human tumor cells. Growth of tibial tumors were observed by histology. Expression of TGF-$\beta$ and CXCR-4 in bone OSCC (experimental) and subcutaneous tumor (control) was also evaluated by immunohistochemical staining. Results: Bone OSCC was successfully induced by intra-tibial injection of KB cells. Tumor mass was developed in the marrow tissues of tibia and finally invade the endosteum of tibia. Immunohistochemical staining showed higher expression of TGF-$\beta$ in bone tumors than in subcutaneous tumors. Conclusion: A murine model of bone metastasis of OSCC was suggested that imitated the clinical findings of distant vascular metastasis. This bone tumor model should facilitate understanding of the molecular pathogenesis of OSCC bone metastasis, and aid in the developement of treatment strategies against OSCC bone metastasis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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