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Biochemical Analysis on the Parallel Pathways of Methionine Biosynthesis in Corynebacterium glutamicum

  • Hwang, Byung-Joon;Park, Soo-Dong;Kim, Youn-Hee;Kim, Pil;Lee, Heung-Shick
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제17권6호
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    • pp.1010-1017
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    • 2007
  • Two alternative pathways for methionine biosynthesis are known in Corynebacterium glutamicum: one involving transsulfuration (mediated by metB and metC) and the other involving direct sulfhydrylation (mediated by metY). In this study, MetB (cystathionine ${\gamma}-synthase$) and MetY (O-acetylhomoserine sulfhydrylase) from C. glutamicum were purified to homogeneity and the biochemical parameters were compared to assess the functional and evolutionary importance of each pathway. The molecular masses of the native MetB and MetY proteins were measured to be approximately 170 and 280 kDa, respectively, showing that MetB was a homotetramer of 40-kDa subunits and MetY was a homohexamer of 45-kDa subunits. The $K_m$ values for the O-acetylhomoserine catalysis effected by MetB and MetY were 3.9 and 6.4 mM, and the maximum catalysis rates were $7.4\;(k_{cat}=21\;S^{-1})\;and\;6.0\;(k_{cat}=28\;S^{-1})\;{\mu}mol\;mg^{-1}\;min^{-1}$, respectively. This suggests that both MetB and MetY can be comparably active in vivo. Nevertheless, the $K_m$ value for sulfide ions by MetY was 8.6mM, which was too high, considering the physiological condition. Moreover, MetB was active at a broad range of temperatures $(30\;and\;65^{\circ}C)$ and pH (6.5 and 10.0), as compared with MetY, which was active in a range from 30 to $45^{\circ}C$ and at pH values from 7.0 to 8.5. In addition, MetY was inhibited by methionine, but MetB was not. These biochemical data may provide insight on the role of the parallel pathways of methionine biosynthesis in C. glutamicum with regard to cell physiology and evolution.

성장기의 쥐와 늙은 쥐 조직의 Glutathione Peroxidase 활성에 대한 Methionine 투여의 효과 (Effect of Methionine Supplementation on Glutathione Peroxidase Activity in Young and Old Murine Tissues)

  • Cha-Kwon Chung
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제23권3호
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    • pp.429-435
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    • 1994
  • 자라나는 과정의 젊은 흰쥐와 14개월 된 늙은 흰쥐, 생쥐들을 대상으로 Met 투여에 따른 간, 혈장, 신장, 비장 등의 glutathione peroxidase(GSHPx) 효소 변화를 측정 비교하였다. 성장기의 쥐에 있어서 Se을 Selenite 형태로 투여했을 때 0.5%의 식이 Met 공급은 같은 Se을 Se-Met 형태를 공급했을 때 보다 효소 활성이 증가하였다. 그러나, 14개월 된 늙은 쥐에서는 Met 투여에 대한 효소 활성은 큰 변화가 없었다. 일반적으로 식이 Se 증가는 효소 활성과 거의 정비례하나 1ppm Se 수준 이상에서는 완만하게 증가 또는 거의 정체하는 상태를 보이지만, 늙은 쥐에서는 Se의 식이 수준이 2ppm이 되어도 여전히 효소 활성이 증가하는 경향을 보였다. 성장기의 생쥐 실험에서도 2ppm Se 수준에서의0.3%와 0.8%의 식이 Met 투여는 효소 활성에 큰 영향이 없었다. 그러나 실험식이 투여 18일 경엔 4일째 보다 Met 투여군이 4.2배의 증가를 보인 반면 비투여군은 2.5배의 증가에 머물렀다. 18일경 이후 효소 활성이 감소하여 42일재는 반으로 감소함을 보였다. Se의 생체 활성은 특히 식이 Se 수준이 낮을 때 Met에 의해 증가되는 폭이 컸으며 Se 수준이 높을수록 상대적으로 감소함을 보였다. 위의 제반 결과에서 Met의 요구량이 Se-Met에 의해 대체되고 있음을 짐작할 수 있다. 그러므로 식이 Met 수준 상태에 따라 효소의 활성이 달라질 수 있다는 것을 시사한다.

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메티오닌과 셀렌이 에탄올 중독된 흰쥐의 뇌지질과산화에 미치는 영향 (Effect of Methionine Levels on Brain Lipid Peroxidation in Ethanol-treated Rats of Selenium Deficiency)

  • 조수열;이미경;박은미;장주연;김명주
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제26권1호
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    • pp.109-115
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    • 1997
  • 에탄을 투여로 인한 뇌조직의 지질과산화에 미치는 식이성 Met과 Se의 효과를 구명코자 Se을 결핍시킨 횐쥐를 대상으로 Met을 수준(0, 3, 9g/kg diet)별로 급여 하였으며, 실험기간은 5주와 10주로 사육하여 뇌조직의 알코을 대사효소와 유리기 제거 효소계의 활성을 관찰하였다. 알코을 대사효소인 ADH 활성은 5주와 10주군에서 에탄을 투여시 증가되었고 Met정상급여군이 결핍과 과량급여군에 비해 유의적인 증가를 나타내었다. AIDH 활성은 에탄을 투여로 유의하게 감소되었고 특히 Met와 Se 동시 결핍시 감소가 가장 현저하였다. 투여기간이 길수록 활성은 감소하는 경향이었다. MAO활성은 에탄올 투여군이 대조군에 비해 유의적으로 증가하였으며, Met급여에 의해 활성은 억제되는 것으로 나타났다. SOD 활성은 에탄올 투여로 유의적인 감소를 보였으며 5주 및 10주 모두 Met 과량급여군이 결핍과 정상급여군에 비해 유의적으로 증가하였다. GSH-Px 활성은 에탄을 투여로 유의적으로 감소되 었으며, Met과 Se 동시 결핍군에서 가장 감소정도가 큰 것으로 나타났다. Met 급여수준이 증가할수록 그 활성은 유의적으로 증가하였으며, 10주군이 5주군에 비해 활성이 증가하였다. 에탄올 투여로 증가된 GST 활성은 Met결핍에 의해 더욱 가중되었으며 10주군이 5주군에 비해 GST 활성이 유의적으로 증가된 것으로 보아 장기간의 Met 결핍은 에탄을 중독을 심화시킬 것으로 생각된다. Catalase 활성은 에탄을 투여로 유의적인 증가를 나타내었고 Met 결핍군이 정상급여군 및 과량 급여군에 비하여 유의적인 증가를 보였다. GSH함량은 에탄올에 의해 유의적으로 감소되었는데 Met 급여 수준이 증가할수록 에탄올로 인해 감소된 GSH함량이 유의적으로 증가되었으며, 10주군이 5주군에 비해 증가 정도가 현저하였다. 과산화의 지표인 LPO 함량은 에탄을 투여시 증가되었고 Met 결핍군은 정상급여군에 비해 유의적으로 증가되었으며, 특히 Met 과량급여시 5주군에 비해 10주군이 유의적으로 증가하였다. 이 상의 결과에서 Se 결핍시 Met 급여로 인해 에탄올 대사효소의 활성 증가 및 에탄올에 의해 증가된 뇌의 지질과산화를 줄이는 것으로 보아 Met이 생체의 노화를 방지할 수 있을 것으로 생각되며, Se 결핍으로 증가된 지질과산화 반응에 대한 보호와 적응 수단으로써 방어 효소의 활성도가 높아진 것으로 사료된다.

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자식(自殖)된 다수다얼성(多穗多蘖性) 옥수수(MET)의 특성(特性) 비교(比較) 시험(試驗) (Plant Characters of Selfed MET Maize Line)

  • 최봉호;이희봉
    • 농업과학연구
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    • 제12권2호
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    • pp.166-173
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    • 1985
  • 5세대(世代)나 자화수정(自花受精)시켜 육성(育成)한 다수다얼성(多穗多蘖性)의 MET 계통(系統)의 식물학적(植物學的) 특성(特性)을 알고자 미국종(美國種) 일대(一代) 교잡종(交雜種)옥수수와 3개(個)의 수수${\times}$수단그라스 교잡종(交雜種)과 비교(比較) 시험(試驗)한 결과(結果)를 요약(要約)하면 다음과 같다. 1. 전(全) 공시품종(供試品種)들의 일반적(一般的) 생육상황(生育狀況)은 신개간지(新開墾地)에 가까운 토양관계(土壤關係)로 충분(充分)한 생육(生育)을 얻지 못했다(종실수량(種實收量) 등(等)). 2 생육시기별(生育時期別)로 예취(刈取)하여 단위면적당(單位面積當) MET 계통(系統)의 생초중(生草重)을 비교(比較)하여 본 결과(結果) 비교(比較) 옥수수 품종(品種)을 100%로 하였을 경우(境遇) MET 계통(系統)은 평균(平均) 97.8%로서 10a당(當) 5.652kg였다. 3. 단위면적당(單位面積當) MET 계통(系統)의 건물중(乾物重) 역시 비교품종(比較品種)에 비(比)하여 94.5%로서 10a당(當) 1,602kg이었다. 4. MET 계통(系統)의 특성(特性)은 다분얼(多分蘖), 다수성(多穗性)인 관계(關係)로 생초중(生草重)과 건물중(乾物重) 의 증가(增加)는 경엽(莖葉)의 무게에 기인(基因)하였다. 5. 성장속도(成長速度)를 보면 MET 계통(系統)이 자식계통(自植系統)에서 나타나는 자식열세현상(自殖劣勢現象) 때문에 비교품종(比較品種)인 일대(一代) 잡종(雜種)들에 비(比)하여 매우 저조(低調)하였다(MET의 평균(平均) 초장(草長)은 234.7cm, 그외(外) 교잡종(交雜種)의 평균(平均) 초장(草長)은 250.7cm였다). 6. MET 계통(系統)과 비교(比較)하기 위(爲)해 공시(供試)한 다른 4개품종(個品種)은 모두 미국(美國)에서 널리 재배(栽培)하는 다수성(多收性) 품종(品種)이지만 본(本) 연구(硏究)에서는 흑조위축병(黑條緯縮病)에 매우 약(弱)한 것으로 나타났다(미국종(美國種) 평균(平均) 이병율(罹病率)은 20% 이상(以上), MET 계통(系統)은 5%였다). 7. 종실수량(種實收量)을 보면 MET 계통(系統)이 10a당(當) 390.1kg으로 다른 미국종(美國種)의 평균수량(平均收量) 508.7kg에 비(比)하면 약(約) 76.7% 밖에 안되었다. 그러나 주당(株當) 종실수(種實數)로 환산(換算)하면 1,170개(個)로 미국종(美國種)들의 690개(個) 보다 훨씬 많았다. 이처럼 10a당(當) 종실수량(種實收量)을 무게로 환산(換算)하면 MET 계통(系統)이 적은 이유(理由)는 MET 계통(系統)이 자식계통(自殖系統)과 유사(類似)하기 때문이고 입수(粒數)로 환산(換算)하면 MET가 많은 것은 이 계통(系統)이 소립종(小拉種)(100립종(粒重)=10gr정도(程度))이기 때문이다. 8. 3개(個)의 수수${\times}$수단그라스 교잡종(交雜種)의 청예(靑刈) 수량(收量)을 MET 계통(系統)과 비교(比較)한 결과(結果) 10a당(當) 생초중(生草重)이나 건물중(乾物重)이 모두 MET 계통(系統)과 큰 차이(差異)가 없었다. 9. 따라서 농민(農民)이 재배(栽培)할 교잡종(交雜種) 값이 고가(高價)인 경우(境遇)에 MET 계통(系統)을 청예용(靑刈用)으로 이용(利用)하는 것은 종자대(種子代)의 절감(節減)은 물론(勿論) 단위면적당(單位面積當) 필요(必要)한 종자량(種子量)이 다른 교잡종(交雜種)에 비(比)해 적어 이중(二重)의 효과(效果)를 얻을 수 있을 것으로 생각된다.

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Myomodulin A 및 유도체들의 합성 및 생리활성 (Synthesis and Biological Activities of Myomodulin A and Its Analogs)

  • 박남규
    • 생명과학회지
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    • 제22권3호
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    • pp.387-397
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    • 2012
  • 군소인 Aplysia kurodai의 중추신경절로부터 정제된 myomodulin A (MMA)가 정제되었다. MMA의 일차구조는 Pro-Met-Ser-Met-Leu-Arg-Leu-$NH_2$이며, 이 펩타이드는 다른 연체동물에서 발견된 myomodulin 계열의 펩타이드와 같은 구조를 지닌다. 정제된 MMA는 Mytilus edulis의 anterior byssus retractor muscle (ABRM)에서 phasic contraction을 조절하는 것으로 나타났다. MMA의 구조와 활성간의 상관관계를 알아보기 위해서 MMA, Des[$Pro^1$]-MMA, Des[$Pro^1,Met^2$]-MMA, Des[$Pro^1,Met^2,Ser^3$]-MMA 및 MME를 합성하였다. Des[$Pro^1$]-MMA, Des[$Pro^1,Met^2$]-MMA 및 Des[$Pro^1,Met^2,Ser^3$]-MMA의 일차구조는 각각 Met-Ser-Met-Leu-Arg-Leu-$NH_2$, Ser-Met-Leu-Arg-Leu-$NH_2$ 및 Met-Leu-Arg-Leu-$NH_2$이다. MMA 및 합성 물질들을 사용하여 ABRM 및 Achatinafulica의 소낭과 penial retractor muscle에 대해 활성을 측정하였다. MMA는 $1{\times}10^{-8}$ M 또는 더 낮은 농도에서 ABRM의 수축활성을 증가시키는 것으로 나타났지만, $1{\times}10^{-8}$ M 또는 고농도에서는 phasic contraction을 억제하였다. MMA와 유도체들은 소낭에 대해서는 수축반응을 보였지만, penial retractor muscle에 대해서는 이완 활성을 나타내었다. 이러한 결과들은 MMA의 C-말단부위에 있는 Met-Leu-Arg-Leu-$NH_2$가 ABRM의 수축반응뿐만 아니라 연체동물의 생식기능 및 소화 활성을 조절하기 필요한 최소한의 구조라는 것을 나타낸다.

다수다얼성 재래종 옥수수 계통의 청예수량 (Silage Yield of Korean Local Maize Lines(MET) with Many Tillers and Ears)

  • 이희봉;최봉호;조영찬
    • 한국작물학회지
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    • 제30권3호
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    • pp.277-286
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    • 1985
  • 다수다얼성 재래종 옥수수 (MET라 칭함)의 자식5세대인 3계통을 Siliage생산을 목적으로 상이한 재식밀도에서 대조품종인 수원 19호, 부여 #3 $\times$ #2를 공시하여 재배한 결과 그 성적은 다음과 같다. 1. 수확기의 초장에 대한 분산분석은 품종간에 유의차가 인정되지 않았으며, 특히 MET 계통은 교잡종이나 합성 품종에 비해 초기생육이 늦었는데 이는 MET계통이 재내종으로 자식열세 현상때문이라 추측된다. 재식밀도의 차이에 있어서 공시 품종의 초장은 큰 효과를 기대할 수 없었다. 2 수확기에서 총생체중은 MET 1이 교잡종보다 10a당 2000kg이 많았으며 특히, 밀식구인 60$\times$20cm에서 가장 높았다. 3. 단위 면적당 건물중 역시 생체량과 같은 경향의 증감으로 나타났으며, 10a부 MET 1의 총건물중은 2.4톤으로 수원 19호보다 10% 높았는데, 밀식구인 60$\times$ 20cm에서 그 효과가 컸다. 4. 10a당 종실수량은 MET 1 이 교잡종에 비해 소식구에서 낮았다. 5. MET계통의 평균 분얼수는 4.5개인 반면에 교잡종과 합성품종에서는 나타나지 않았다. 6. MET계통의 재배상의 가장 큰 문제로 도복율이 높았는데 MET계통의 착수고를 낮춤으로서 피해를 경감시킬 수 있을 것으로 생각되며 7. MET계통의 100입중은 9gr인 반면에 교잡종과 합성품종은 30gr정도이었다.

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The Antitumor Effect of C-terminus of Hsp70-Interacting Protein via Degradation of c-Met in Small Cell Lung Cancer

  • Cho, Sung Ho;Kim, Jong In;Kim, Hyun Su;Park, Sung Dal;Jang, Kang Won
    • Journal of Chest Surgery
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    • 제50권3호
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    • pp.153-162
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    • 2017
  • Background: The mesenchymal-epithelial transition factor (MET) receptor can be overexpressed in solid tumors, including small cell lung cancer (SCLC). However, the molecular mechanism regulating MET stability and turnover in SCLC remains undefined. One potential mechanism of MET regulation involves the C-terminus of Hsp70-interacting protein (CHIP), which targets heat shock protein 90-interacting proteins for ubiquitination and proteasomal degradation. In the present study, we investigated the functional effects of CHIP expression on MET regulation and the control of SCLC cell apoptosis and invasion. Methods: To evaluate the expression of CHIP and c-Met, which is a protein that in humans is encoded by the MET gene (the MET proto-oncogene), we examined the expression pattern of c-Met and CHIP in SCLC cell lines by western blotting. To investigate whether CHIP overexpression reduced cell proliferation and invasive activity in SCLC cell lines, we transfected cells with CHIP and performed a cell viability assay and cellular apoptosis assays. Results: We found an inverse relationship between the expression of CHIP and MET in SCLC cell lines (n=5). CHIP destabilized the endogenous MET receptor in SCLC cell lines, indicating an essential role for CHIP in the regulation of MET degradation. In addition, CHIP inhibited MET-dependent pathways, and invasion, cell growth, and apoptosis were reduced by CHIP overexpression in SCLC cell lines. Conclusion: C HIP is capable of regulating SCLC cell apoptosis and invasion by inhibiting MET-mediated cytoskeletal and cell survival pathways in NCI-H69 cells. CHIP suppresses MET-dependent signaling, and regulates MET-mediated SCLC motility.

Effects of Supplementary Mineral Methionine Chelates (Zn, Cu, Mn) on the Performance and Eggshell Quality of Laying Hens

  • Lim, H.S.;Paik, I.K.
    • Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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    • 제16권12호
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    • pp.1804-1808
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    • 2003
  • A layer experiment was conducted to determine the effects of supplementary methionine chelates (Cu, Zn and Mn), individual or in combination, on laying performance, eggshell quality, gizzard erosion, and IgG level of serum for 8 weeks. Five hundred 96-wk-old force molted ISA Brown layers were assigned to five dietary treatments. Basal diet was formulated to meet or exceed the nutrients requirements listed in NRC (1994). Five experimental diets were control, Zn-methionine chelate (Zn-Met) supplemented, Cumethionine chelate (Cu-Met) supplemented, Zn-Mn-methionine chelate (Zn-Mn-Met) supplemented and Zn-Mn-Cu-Met supplemented diet. Each treated diet was supplemented with respective mineral(s) at the level of 100 ppm in the form of methionine chelate. Egg production was increased by Cu-Met supplementation but decreased by Zn-Met supplementation. Egg weight was significantly (p<0.05) lower in Cu-Met treatment than those of the control and Zn-Met treatment. Specific gravity of eggs and eggshell strength were highest and soft egg production was lowest in Cu-Met treatment. Gizzard erosion index was significantly increased by supplementation of Cu-Met, Zn-Mn-Met or Zn-Mn-Cu-Met. Zinc content in liver significantly increased by Zn-Met, but not by Zn-Mn-Cu-Met treatment. In conclusion, 100 ppm Cu in Cu-Met chelate improved laying performance and eggshell quality but also increased gizzard erosion index. Supplementation of Zn-Met or its combination with other mineral chelates had no beneficial effects on laying performance and eggshell quality.

Association between metabolic syndrome components and cardiac autonomic modulation in southern Indian adults with pre-metabolic syndrome: hyperglycemia is the major contributing factor

  • Endukuru Chiranjeevi Kumar;Girwar Singh Gaur;Dhanalakshmi Yerrabelli;Jayaprakash Sahoo;Balasubramaniyan Vairappan;Alladi Charanraj Goud
    • The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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    • 제27권1호
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    • pp.49-59
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    • 2023
  • Metabolic syndrome (MetS) involves multi-factorial conditions linked to an elevated risk of type 2 diabetes mellitus and cardiovascular disease. Pre-metabolic syndrome (pre-MetS) possesses two MetS components but does not meet the MetS diagnostic criteria. Although cardiac autonomic derangements are evident in MetS, there is little information on their status in pre-MetS subjects. In this study, we sought to examine cardiac autonomic functions in pre-MetS and to determine which MetS component is more responsible for impaired cardiac autonomic functions. A total of 182 subjects were recruited and divided into healthy controls (n=89) and pre-MetS subjects (n=93) based on inclusion and exclusion criteria. We performed biochemical profiles on fasting blood samples to detect pre-MetS. Using standardized protocols, we evaluated anthropometric data, body composition, baroreflex sensitivity (BRS), heart rate variability (HRV), and autonomic function tests (AFTs). We further examined these parameters in pre-MetS subjects for each MetS component. Compared to healthy controls, we observed a significant cardiac autonomic dysfunction (CAD) through reduced BRS, lower overall HRV, and altered AFT parameters in pre-MetS subjects, accompanied by markedly varied anthropometric, clinical and biochemical parameters. Furthermore, all examined BRS, HRV, and AFT parameters exhibited an abnormal trend and significant correlation toward hyperglycemia. This study demonstrates CAD in pre-MetS subjects with reduced BRS, lower overall HRV, and altered AFT parameters. Hyperglycemia was considered an independent determinant of alterations in all the examined BRS, HRV, and AFT parameters. Thus, hyperglycemia may contribute to CAD in pre-MetS subjects before progressing to MetS.

The role of serum lipoxin A4 levels in the association between periodontal disease and metabolic syndrome

  • Dogan, Esra Sinem Kemer;Dogan, Burak;Fentoglu, Ozlem;Kirzioglu, Fatma Yesim
    • Journal of Periodontal and Implant Science
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    • 제49권2호
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    • pp.105-113
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    • 2019
  • Purpose: An unresolved inflammatory state contributes to the pathogenesis of periodontal disease and metabolic syndrome (MetS). Therefore, the purpose of this study was to evaluate the role of lipoxin A4 (LXA4), a proresolving lipid mediator, in the association between periodontal disease and MetS. Methods: Sixty-seven patients with MetS and 65 patients without MetS were included in the study. Sociodemographic information was obtained via a questionnaire, and detailed medical diagnoses were made. Periodontal parameters (plaque index [PI], gingival index [GI], probing pocket depth [PD], and clinical attachment level [CAL]) and metabolic parameters were measured, and serum LXA4 levels were determined. The associations among MetS, periodontal parameters, and serum LX levels were evaluated by adjusted multivariate linear regression analyses. Results: Patients with MetS were older and had a higher body mass index than patients without MetS. Periodontal parameters (PI, GI, PD, and CAL) were higher in patients with MetS than in those without MetS. Serum LXA4 levels were higher in patients without MetS. Multivariate linear regression analysis indicated a positive association between MetS and periodontal parameters (PD and CAL). Negative associations were established between MetS and LXA4 levels, and between LXA4 and periodontal parameters (PI, PD, and CAL). Conclusions: The presence of higher values of periodontal parameters in patients with MetS and the negative relationship of LXA4 with MetS and periodontal disease may support the protective role of proresolving lipid mediators in the association between periodontal disease and MetS.