Halobacterium Halobium에서 항우울제의 부분 몰 부피와 몇 가지 지질의 부유물은 과량의 부피 팽창 계를 사용하여 $25^{\circ}C$에서 측정되었다. 일반적인 항우울제 인 Fluoxetine의 효능은 오랫동안 지질 용해도와 관련이 있는 것으로 알려져 왔다. Halobacterium Halobium의 보라색 막에서 유일한 막 단백질 인 소포의 변성은 280nm에서 흡수 변화에 의해 연구되었고 과도한 부피 팽창 계로 330nm에서 형광 변화를 보였다. 확산 교환에 의한 점성 중합체 용액의 1H NMR 분석은 측정을 위한 중요한 단계로, Halobacteriun Halobium에서 Fluoxetine의 부분 몰 부피와 입자 크기는 양성으로 측정되었다. 항우울제는 낮은 사기와 우울증에 근거하여 다양한 인지 및 정신 증상을 유발하는 질병을 예방하여 일일 수행 능력을 저하시키는 걸로 나타났다.
최근 심근세포 또는 신경세포에서 발표된 여러 종류의 calcium channel중 calcium antagonist로 차단되는 channel 또는 차단되지 않는 channel 등이 있는지 알아보기 위해 실험을 시행하였다. 돼지 소장 평활근으로부터 고농도의 KCl(150mM)로 부하된 세포 포막낭을 만들어 고농도의$K^+$ 또는 전기자극으로 $^{45}Ca$의 이동을 유발시켜 다음과 같은 성적을 얻었다. 저농도의 $K^+$용액에서의 $^{45}Ca$이동보다 고농도의 $K^+$-용액에서의 $^{45}Ca$이동이 유의하게 증가되었으며(p<0. 05) 이때 유입되는 $^{45}Ca$의 양은 시간에 따라 서서히 감소되었다. 전기자극(3V, 15Hz, 25msec)을 하였을때 유입되는 $^{45}Ca$의 양은 전기자극을 하지 않은 대조군에 비하여 현저하게 증가되었고, 자극시간에 따른 $^{45}Ca$의 유입량은 2분 동안 계속 증가되었다. Diltiazem 또는 nifedipine을 처치하였을때, 고농도의 $K^+$-용액에 의한 $^{45}Ca$의 유입은 억제되지 않았으나 전기자극에 의해 유도되는 $^{45}Ca$의 유입은 유의하게 억제되었다(p<0.005). 상기의 실험성적으로 돼지 소장 평활근으로부터 분리한 세포막에서의 calcium이동 중 전기자극에 의해 이루어지는 것은 calcium antagonist로 차단되는 calcium channel을 통하여 이루어지는 것으로 사료된다.
본 연구에서는 베지클의 응용성을 확장하기 위한 기초연구로서, DPPC(dipalmitoylphosphaticylcholine)/Chol(Cholesterol)계에 불소화계면활성제($C_8F_{17}(CH_2)_2OCO-CH_2CH(SO_3Na)COO(CH_2)_2C_8F_{17}$, FS)/불소화지방산염 (($C_7F_{15}COONH_4$, FFS)을 여러 가지 비율로 변화시켜 첨가함으로써 베지클을 변형 제조하고, 그 물리화학적 성질을 비교측정하였다. 제조된 베지클계에 대한 제타-전위 측정(Zetamaster Particle Electrophoresis Analyzer) 결과, 균일한 전하의 베지클이 형성되는 것으로 확인되었고, 이는 FFS 분자가 FS와 DPPC 사이에서 보조계면활성제로 기능하여 DPPC와 FS의 각 성분이 동일 베지클내에 공존하도록 작용했기 때문으로 풀이된다. 베지클의 입자크기 결정에서는 FFS의 농도가 증가할수록 그 크기가 감소하고, 제타-전위도 음의 값으로 더욱 작아지는 것으로 나타났다. 베지클의 분산도 변화에서도 DPPC/Chol/FS/FFS계의 경우가 DPPC/Chol/FS계에 비해 안정성이 훨씬 큰 것으로 조사되었다. 베지클의 서방유출 실험에서도 막내에 포집된 MB(Methylene Blue)의 유출속도가 DPPC/Chol/FS/FFS계에서 감소된다는 결과를 얻었고, 이는 FFS의 첨가로 인해 막의 유동성이 감소되기 때문으로 풀이된다. 이 결과는 형광방출 측정의 $I_{Excimer}/I_{Monomer}$값에서도 확인되는 것으로 막의 미세점도가 FFS 첨가 베지클에서 증가되는 것으로 나타났다. 단백질로서 알부민에 대한 친화도를 비교한 결과에서는 DPPC/Chol/FS/FFS계의 친화도가 다소 낮아지는 것으로 나타났다. 이들 실험결과에 바탕하여 FFS의 첨가에 의해 DPPC/Chol/FS 베지클계는 더욱 안정하고 균일한 막의 구조를 갖는 리포솜을 형성한다는 결론을 얻었다.
본 연구에서는 스테아르산(SA), 올레산(OA), 리놀레산(LA) 등의 지방산이 지질 소포체 막과의 상호 작용에 미치는 영향에 관하여 살펴보았다. 이를 위하여 지방산 종류 및 농도 변화에 따른 리포좀 평균 입자 크기 및 제타 전위, 리포좀 막의 deformability, fluorescence anisotropy ratio 등을 측정하고 TEM 관찰을 통하여 지방산 첨가가 리포좀 막의 유동성 변화에 미치는 역할에 관하여 살펴보았다. 기본적으로 SA, OA, LA 등의 지방산 첨가는 동일한 경향을 나타내었다. 즉, 지방산을 첨가함에 따라 리포좀이 보다 치밀한 패킹을 갖게 되어서 리포좀의 크기는 감소하고 제타 전위 값은 증가하였으나, 지방산의 과도한 첨가는 리포좀에서 다형(polymorphic) 구조를 가지는 지질 입자 응집체로의 전이를 일으켰다. SA, OA 및 LA 지방산 시스템에서의 최소 리포좀 크기와 가장 치밀한 리포좀 패킹은 레시틴 대비 지방산의 몰 비율이 각각 0.70, 0.50, 0.25인 조건에서 관찰되었으며, 리포좀 막의 deformability와 fluorescence anisotropy ratio 측정에 의한 리포좀 막의 유동성 측정 결과는 TEM 및 입자 크기 측정 결과와 일치함을 알 수 있었다.
Jang, Hye-Ock;Lee, Chang;Choi, Min-Gak;Shin, Sang-Hun;Chung, In-Kyo;Yun, Il
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제7권3호
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pp.119-124
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2003
To elucidate the molecular mechanism of pharmacological action of local anesthetics, we studied membrane actions of tetracaine, bupivacaine, lidocaine, prilocaine and procaine. Fluorescence polarization of n-(9-anthroyloxy)stearic acid (n-AS) was used to examine the effects of these local anesthetics on differential rotational mobility of different positions of the number of synaptosomal plasma membrane vesicle (SPMV) phospholipid carbon atoms. The four membrane components differed with respect to 3, 6, 9 and 16-(9-anthroyloxy)stearic acid (3-AS, 6-AS, 9-AS and 16-AP) probes, indicating that differences in the membrane fluidity might be present. Degrees of the rotational mobility of 3-AS, 6-AS, 9-AS and 16-AP were different depending on depth of hydrocarbon interior. In a dose-dependentmanner, tetracaine, bupivacaine, lidocaine, prilocaine and procaine decreased anisotropy of 3-AS, 6-AS, 9-AS and 16-AP in the hydrocarbon interior of the SPMV. These results indicate that local anesthetics have significant disordering effects on hydrocarbon interior of the SPMV, thus affecting the transport of $Na^+$ and $K^+$ in nerve membranes and leading to anesthetic action.
Direct exposure of renal tubular brush-border membranes (BBM) to free cadmium (Cd) causes a reduction in phosphate (Pi) transport capacity. Biochemical mechanism of this reduction was investigated in the present study. Renal proximal tubular brush-border membrane vesicles (BBMV) were isolated from rabbit kidney outer cortex by Mg precipitation method. Vesicles were exposed to $50{\sim}200\;{\mu}M\;CdCl_2$ for 30 min, then the phosphate transporter activity was determined. The range of Cd concentration employed in this study was comparable to that of the unbound Cd documented in renal cortical tissues of Cd-exposed animals at the time of onset of renal dysfunction. The rate of sodium-dependent phosphate transport $(Na^+-Pi\;cotransport)$ by BBMV was determined by $^{32}P-Iabeled$ inorganic phosphate uptake, and the number of $Na^+-Pi$ cotransporters in the BBM was assessed by Pi-protectable $^{14}C-labeled$ phosphonoformic acid $([^{14}C]PFA)$ binding. The exposure of BBMV to Cd decreased the $Na^+-Pi$ cotransport activity in proportion to the Cd concentration in the preincubation medium, but it showed no apparent effect on the Pi-protectable PFA binding. These results indicate that an interaction of renal BBM with free Cd induces a reduction in $Na^+-Pi$ cotransport activity without altering the carrier density in the membrane. This, in turn, suggest that the suppression of phosphate transport capacity $(V_{max})$ observed in Cd-treated renal BBM is due to a reduction in $Na^+-Pi$ translocation by existing carriers, possibly by Cd-induced fall in membrane fluidity.
n-Alkanols의 분자적 약리작용기전 탐구에 기초자료를 제공하기 위하여 소의 신선한 대뇌피질로부터 분리한 synaptosomal plasma membrane vesicles (SPMV) 지질 이중층의 측방확산운동에 미치는 n-alkanols의 영향을 형광 probe법으로 검색하였다. n-Alkanols는 SPMV 지질 이중층의 측방확산운동 범위와 속도를 농도 의존적으로 증가시켰고 1-nonanol까지는 탄소수가 두개 증가될 때마다 그 효력은 약 10배 가량 증가되었으나 탄소수 10개인 1-decanol의 효력은 오히려 감소되는 경향을 나타내었다.
In order to investigate structure-antibiotic activity relationships of brevinin-1 and thanatin containing Rana box composed of basic loop formed by disulfide bridge in their arboxy terminus, thanatin, brevinin 1 and their analogues (T-B1, T-B2 and B-T) in which their Rana box sequence exchanged was designed and synthesized by the solid phase method using Fmoc-chemistry. The basic sequence of Rana box of thanatin had more significant effect on both antibacterial and antifungal activity than that of brevinin 1. The tail sequence (QRM) of thanatin was found to be important in its antibacterial and antifungal activity. Rana box sequence of brevinin-1 did not have a significant effect on its antitumor and phospholipid vesicle-aggregating activities. Brevinin-1 showed stronger $\alpha$-helical structure in the membrane-mimicking environment such as SDS micelle than thanatin. A remarkable increase in a-helicity of bervinin-1 plays more important role in antibiotic activity than that of thanatin. Furthermore, antibacterial activity of thanatin against E. coli resulted from the disruptive effect against the outer cell membrane of E. coli.
Martinec, Jan;Feltl, Tomas;Nokhrina, Katerina;Zazimalova, Eva;Machackova, Ivana
식물조직배양학회지
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제27권5호
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pp.375-377
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2000
It is now generally accepted that a phosphoinositide cycle is involved in the transduction of a variety of signals in plant cells. In animal cells, the hydrolysis of phosphatidyl-4,5-bisphosphate catalysed by phosphatidylinositol - specific phospholipase C yields to D-myo-inositol - 1,4,5-trisphosphate and diacylglycerol, which are well known second messengers. The binding of InsP$_3$to a receptor located on the endoplasmic reticulum triggers a calcium release from the endoplasmic reticulum. We have detected and partially characterised key components of phosphoinositide signaling. First, tobacco microsomal fraction and plasma membrane PI-PLC. Consecutively, using a radioligand binding assay we have identified a $Ca^{2+}$ -dependent high affinity InsP$_3$binding site in microsomal membrane fraction vesicle preparation and then we have measured inositol-1,4,5-trisphosphate induced calcium release from tobacco microsomal fraction. These findings suggest that phosphoinositide signaling system is present and operates in the tobacco suspension culture.e.
To investigate the effect of ginseng extracts on the changes of flllidity and lysis of liposome reverse phase evaporation vesicle (REV) was employed as model membrane and methylene blue was used as photosensitizer. Fluoresence polarization (P vaule) that represented fluidity of liposome was increased by photooxidation. All of the ginseng saponin inhibited the increasing rate of P value; the order of effect was ginseng water extract>biol saponin>triol saponin>crude saponin. In trapped G-6-P% measurement for lysis of liposome, ginseng water extract and crude saponin promoted the lysis of liposome. Therefore, we thought that ginseng extracts acted as both antioxidant and detergent.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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