Mitis-salivarius sucrose bacitracin(MSB) medium is widely used in the selective isolation of mutans streptococci(MS), a designation for a group of oral cariogenic species. Recently, we have isolated three bacterial strains grown on MSB agar from human dental plaques. The three strains exhibited biochemical characteristics similar to those of the biotype IV of MS, with the exception that they manifested a positive reaction for arginine deaminase. The objective of this study was to identify and characterize these three clinical isolates. The bacteria were identified with biochemical tests as well as by 16S rDNA cloning and sequencing. In order to compare the antibiotics susceptibility of the clinical isolates with that of type strain, the minimum inhibitory concentrations of 9 antibiotics were determined using broth dilution assays. The results identified all of our three clinical isolates as Enterococcus faecalis. All E. faecalis strains were found to be susceptible to penicillin G, amoxicillin, augmentin, and vancomycin, but were resistant to ciprofloxacin, cefuroxim axetil, and clindamycin. Our findings indicate that E. faecalis is capable of growing on MSB agar, and suggest that the MSB medium be improved so that only MS should be recoverable on the medium, as originally devised for their selection.
Yoo So Young;Kim Pyung Sik;Hwan Ho Keel;Lim Seong Hoon;Kim Kwang Won;Choe Son Jin;Min Byung Moo;Kook Joong Ki
Journal of Microbiology
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제43권2호
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pp.204-208
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2005
The objective of this study was to both isolate and identify non-mutans streptococci organisms (nonMSO) from dental plaques recovered on mitis-salivarius sucrose bacitracin agar (MSB) plates. The dental plaque samples, which had been collected from 63 human subjects, were diluted and plated on MSB. The bacteria growing on the MSB plates were then identified with biochemical tests, as well as with 16S rDNA cloning and sequencing techniques. Our data indicated that bacteria from 30 subjects had been recovered on the MSB plates. Among the 21 typical colonies selected from the 30 subjects, 12 colonies, derived from 10 subjects, were identified as non-MSO. These 12 colonies were determined to be Streptococcus anginosus (8 colonies), S. sanguinis (1 colony), and Pantoea agglomerans (3 colonies). These results strongly suggest that a new selective medium will be required for the reliable isolation of mutans streptococci.
가시오갈피의 조직배양을 통한 대량증식방법체계 확립의 방법으로 기내배양에서의 캘러스형성 및 식물체 분화에 영향을 미치는 배지와 식물생장 조절물질 및 농도의 최적조건을 구명코자 실시한 실험 결과는 다음과 같다. 1. MS배지를 기본으로하여 여러 가지 식물생장 조절물질(2, 4-D, TDZ, IAA, NAA, BAP) 을 단독 처리할 때 2, 4-D 2mg/l 에서 callus 형성율이 45.5%로 가장 양호하였으며 shoot의 분화는 TDZ 처리시 양호하였으며 간헐적으로 multiple shoot와 root분화가 생겼다. 2. MS배지를 기본으로하여 식물생장조절물질을 2, 4-D와 TDZ의 조합처리시 callus 형성율은 2, 4-D 2mg/ l +TDZ 0.7mg/ l 일때 가장 양호하였으며 shoot의 분화는 2, 4-D의 농도가 낮고 TDZ의 농도가 높은 2, 4-D 0.1mg/ l +TDZ 0.7mg/ l 에서 양호하였다. 3. 배지조성에 따른 callus 형성은 $B_5,\;MSB_5$ 배지 모두 MS배지를 기본으로하여 실시한 실험과 마찬가지로 2, 4-D 2mg/ l +TDZ 0.7mg/ l 에서 양호하였으며, $B_5$배지에서 2, 4-D 2mg/ l +TDZ 0.7mg/ l 처리시 100%의 callus형성율을 나타냈다. Shoot의 분화는 auxin류인 2, 4-D보다 cytokinin류인 TDZ처리시 양호하였고 조합처리 또한 2, 4-D의 농도가 낮은 2, 4-D 0,1mg/ l 일때 shoot분화가 형성되었으며 $MSB_5$ 배지에서 양호한 shoot의 분화가 형성되었다.
Streptococcus mutans strains were isolated from dental plaques of carious lesions of 53 patients on mitis-salivarius-bacitracin (MSB) and mitis-salivarius(MS) medium as a supplement. The epidemiological investigation was carried out to determine the biotypes and serotypes of S. mutans isolates. For the serotyping, autoclaved extract antigens from the isolates and serotype-specific antisera against seven known serotypes of S. mutans were prepared. The serotypes of the isolates were demonstrated in immunodiffusion test. In addtition, the prevalence of ${\beta}$-hemolysis on 5% sheep blood agar plate in restricted anaerobic condition and yellow pigment production on 5% sucrose agar plate in less anaerobic condition among the isolates were investigated. The results were as follows: 1. Forty-eight S. mutans strains were isolated from dental plaque samples of 33 patients (62.3%) among 53 patients. 2. Of the isolates, some strains were not grown on MSB medium. 3. Serotype c S. mutans was found in 60.6%, serotype d was found in 30.3% of the patients who were known to harbor S. mutans. 4. Of. the isolates, serotype c isolates were most prevalent (43.8%), serotype d isolates were 25.0%, and serotype b, e, f and g isolates were also found but in lower frequencies. Serotype a S. mutans were not detected. 5. The correlation between serotype and biotype of the isolates was found in 78.6% of the typing cases. 6. Strains revealed ${\beta}$-hemolysis were in 52.1% of the isolates, strains produced yellow pigment were in 47.9% of the isolates, and with one exception, all the strains were belong to serotype c, e and f. 7. The majority of the isolates which revealed ${\beta}$-hemolysis appeared to be yellow pigmented, these isolates were belong to serotype c, e and f.
Streptococcus mutans는 구강 내에 상존하는 치아우식증의 주요 원인균으로서 치면의 피막에 부착 후 glucan을 형성하여 세균의 군락을 이루며, 외부로부터 공급된 자당대사를 통하여 유기산을 생성함으로써 법랑질을 탈회시킨다. 치아우식 활성도의 평가를 위한 단클론항체를 이용한 방법은 진료실에서 빠른 시간 내에 간편하게 타액에 존재하는 Streptococcus mutans의 정량분석이 가능한 방법이다. 이 연구는 3세에서 6세 사이의 어린이 15명을 대상으로 자극성 타액을 채취하여 시판 중인 단클론항체를 이용한 Salivacheck$^{TM}$ Mutans, strip을 이용한 Dentocult$^{(R)}$-SM 그리고 MSB배지 배양법으로서 타액 내 Streptococcus mutans를 측정한 후 그 값을 우식경험치아수와 비교하여 상관관계를 알아보았다. Saliva-check$^{TM}$ Mutans를 이용한 방법은 Dentocult$^{(R)}$-SM과 MSB배지법과 통계학적으로 유의한 상관관계를 보였으나(p<0.05), MSB배지법은 어린이의 우식경험치아수와 통계학적으로 유의한 결과를 나타내지 않았다(p=0.34).
An extremely thermostable xylanase gene, xynB, from the hyperthermophilic bacterium Thermotoga maritima MSB8 was successful expressed in Kluyveromyces lactis. The response surface methodology (RSM) was also applied to optimize the medium components for the production of XynB secreted by the recombinant K. lactis. The secretion level (102 mg/l) and enzyme activity (49 U/ml) of XynB in the optimized medium (yeast extract, lactose, and urea; YLU) were much higher than those (56 mg/l, 16 U/ml) in the original medium (yeast extract, lactose, and peptone; YLP). The secretory efficiency of mature XynB was also improved when using the YLU medium. When the mRNA levels of 13 characterized secretion-related genes in the K. lactis cultured in YLP and YLU were detected using a semiquantitative RT-PCR method, the unfolded protein response (UPR)-related genes, including ero1, hac1, and kar2, were found to be up-regulated in the K. lactis cultured in YLU. Therefore, the nutrient ingredients, especially the nitrogen source, were shown to have a significant influence on the XynB secretory efficiency of the host K. lactis.
토마토(Lycopersicon esclentum MILL.) 교잡종 2계통 및 야생종 3종(L. peruvianum, L. glandulosum, L. pimpinellifolium,) 11계통의 배축절편을 배양재료로 해서 캘러스 형성 및 기관 분화의 차이를 배지별, 계통별로 조사하였다. 13계통 가운데 비교적 캘러스 형성 및 기관분화가 다른 종에 비하여 우수한 것은 T-7 (L. glandulosum, Peru산)으로 나타났다. 이 계통에서의 캘러스 유기 및 기관분화는 배지조성에 영향을 받았지만 사용된 모든 배지에서 식물체 재분화가 관찰되었다. 전반적으로 줄기분화는 zeatin 3.0 + IAA 0.02 mg/L가 첨가된 배지에서 가장 양호했다. 몇몇 계통의 경우는 TDZ 0.5 mg/L + NAA 0.5 mg/L 처리구에서도 캘러스 형성 및 기관분화율이 높았다. 뿌리는 TDZ 0.5 mgh + NAA 0.5 mg/L 처리구에서만 많이 발생하였는데, 특히 T-21 (L. peruvianum, Peru산) 계통에서 뿌리분화가 53.3%로 가장 좋았다. TDZ 0.5 mg/L + NAA 0.5 mg/L 처리구에서 100%의 줄기분화력을 보여준 T-7계통(L. peruvianum, Peru산)은 배양절편당 분화된 줄기의 크기 및 돈에 있어서 가장 좋았다. 그러나 본 실험에 공시된 여러 종의 Lycopenicon 계통을 고려할때 TDZ 0.5 mg/L + NAA 0.5 mg/L 처리구 보다는 zeatin 3.0 + IAA 0.5 mg/L이 첨가된 배지에서 대체로 줄기분화 및 생장이 양호했다.
갈파래 속(Ulva spp.) 해조류는 연안에서 자주 대발생되어 생태환경과 산업활동에 여러 가지 문제를 일으키기 때문에 이를 해결할 수 있는 방안이 요구된다. 본 연구에서는 화합물과 온도를 이용하여 구멍갈파래(Ulva australis, ULAUS)의 대발생 경감에 보다 효과적으로 활용될 수 있는 기술을 확립하고자 연구를 수행하였다. 그 결과, 화합물간의 혼합처리에 의해 각각의 단독처리보다도 ULAUS 엽상체 고사에 있어서 상승효과를 나타내는 혼합물 조합 3건($H_2O_2$+N-vanillylnonanamide; $H_2O_2$+nonanoic acid; $H_2O_2$+sodium citrate)을 탐색하였다. 아울러, peracetic acid 100 ppm, sodium percarbonate 100 ppm, hydrogen peroxide 30 ppm, sodium chlorite 200 ppm, menadione sodium bisulfite (MSB) 4 ppm 처리 시 $25^{\circ}C$보다는 $40^{\circ}C$의 온수로 처리할 때, ULAUS 사멸을 현저하게 증진시킬 뿐만 아니라 보다 빠른 시간 내에 고사시키는 효과를 나타내었다. 공시된 화합물 중에서 peracetic acid, sodium percarbonate, hydrogen peroxide가 보다 좋은 효과를 보였다. 마찬가지로 $40^{\circ}C$ 온수에 sodium citrate 1,000 ppm (pH 3.0) 또는 acetic acid 200 ppm (pH 3.5)을 처리할 때에도 ULAUS 엽상체 고사에 상승적 작용을 보였는데 이들 화합물 용액 산도(pH)를 8.0으로 하였을 때에는 상가적 작용을 나타냈다. 따라서 이들 결과는 향후 환경 친화적으로 갈파래 대발생을 제어하기 위한 실용화 기술 중의 한 가지로서 발전시킬 수 있을 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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