This study was done for the determination and excretion profile of superdrol and its metabolites in human urine using both liquid chromatography with electrospray ionization mass spectrometry and gas chromatography with mass spectrometry after trimethylsilylation. Superdrol and its two metabolites were detected in human urine after administration of superdrol to healthy volunteers. The intra-day recovery ranged 89.7-113.2%, accuracy ranged 91.8-113.8% and reproducibility ranged 0.2-6.8% and inter-day recovery ranged 89.3-104.1%, accuracy ranged 95.2-103.0%, reproducibility ranged 0.7-7.8%. We found that superdrol M1 was a hydration at C-3 and superdrol M2 was a hydroxylation at D-ring. Superdrol and two metabolites were excreted as their glucuronided fractions. The glucuro-/sulfa-conjugated ratio of superdrol, superdrol M1 and superdrol M2 were 0.02, 0.02, 0.01, respectively. The excretion studies showed that superdrol and two metabolites were reached 4.3 h after oral administration and superdrol and superdrol M1 were detected until 48 h in human urine.
Measurement of globotriaosylceramide (Gb3, ceramide trihexoside) in urine has clinical importance for monitoring after enzyme replacement therapy in Fabry disease patients. The disease is an X-linked lipid storage disorder that results from a deficiency of the enzyme ${\alpha}$-galactosidase A (${\alpha}$-Gal A). The lack of ${\alpha}$-Gal A causes an intracellular accumulation of glycosphingolipids, mainly Gb3. A simple, rapid, and highly sensitive analytical method for Gb3 in urine was developed without labor-extensive pre-treatment by electrospray ionization MS/MS (ESI-MS/MS). Only simple 5-fold dilution of urine is necessary for the extraction and isolation of Gb3 in urine. Gb3 in diluted urine was dissolved in dioxane containing C17:0 Gb3 as an internal standard. After centrifugation it was directly injected and analyzed through guard column by in combination with multiple reaction monitoring mode of ESI-MS/MS. Eight isoforms of Gb3 were completely resolved from urine matrix. C24:0 Gb3 occupied 50% of total Gb3 as a major component in urine. Linear relationship for Gb3 isoforms was found in the range of 0.005${\sim}$5.0 ${\mu}$g/ml. The limit of detection (S/N=5) was 0.005 ${\mu}$g/ml and limit of quantification was 0.05 ${\mu}$g/ml for C24:0 Gb3 with acceptable precision and accuracy. Correlation coefficient of calibration curves for 8 Gb3 isoforms ranged from 0.9598 to 0.9975. This method could be useful for rapid and sensitive 1st line Fabry disease screening, monitoring and/or diagnostic tool for Fabry disease.
A cytoplasmic-genetic male sterile line(MS) in rapes of which fertility is not restored under any temperature regimes and have the better quaility of and oil cake was developed. A MS line named Mokpo-MS, which is form the cross between Tower and Isuzu and its stamens is degenerated completely by interact~g with cytoplasmic and nuclear genes was selected. This MS line was found as a complete cytoplasmic-genetic male sterile having the quality of oil and oil cake were greatly improved by introducing Zero-erucic and Zero-glucosinolate gene from Tower.
Won, S.H.;Lee, B.H.;Kim, K.Y.;Lee, H.S.;Lee, H.J.;Jo, J.
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.19
no.3
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pp.273-280
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1999
Hypocotyl explants of Medicago saliva cv. Vernal were cultured on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with various combinations of growth regulators. After six weeks of culture, somatic embryos were formed from calli on MS medium containing $4mg/{\ell}$ 2,4-D and $0.1mg/{\ell}$ kinetin, or $4mg/{\ell}$ 2,4-D and $0.5mg/{\ell}$ kinetin. The mature somatic embryos were developed to plantlets when subcultured on MS basal medium. In order to obtain secondary somatic embryogenic calli, cotyledon of regenerated plantlets were cultured on a callus induction medium. Embryogenic calli were formed on MS medium containing $4mg/{\ell}$ 2,4-D alone. For induction and development of secondary somatic embryogenesis, the embryogenic calli were transferred to MS basal medium containing either 2,4-D or NAA. Multi-secondary somatic embryogenesis was the most effective on MS basal medium with $0.1mg/{\ell}$ 2,4-D. The rate of secondary somatic embryo formation of regenerated plants was 18 times higher than that of seed grown plants. The mature secondary somatic embryo were germinated into plantlets on MS basal medium after six weeks of culture.
Kim, Inyoung;Shin, Dongwon;Paek, Jihyun;Kim, Jeongkwon
Mass Spectrometry Letters
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v.8
no.1
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pp.14-17
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2017
The effect of cationization agent concentration on glycan detection via matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS) was investigated using $Na^+$ ions in the form of NaCl as the cationization agent. NaCl solution concentrations ranging from 1 mM to 1 M were investigated. Glycans from ovalbumin were mixed with the cationization agent solution and the 2,5-dihydroxybenzoic acid (2,5-DHB) matrix solution in a volume ratio of 1:1:1. The resulting mixture was loaded onto the MALDI plate. Two MALDI-TOF MS instruments (Voyager DE-STR MALDI-TOF MS and Tinkerbell RT MALDI-TOF MS) were used for detection of glycans. The best detection, in terms of the number of identified glycans, the peak intensity, and the signal-to-noise (S/N) ratio, was obtained with NaCl concentrations of 0.01-0.1 M for both MALDI-TOF MS instruments.
Objectives: This study was performed to verify the validity and judgment criteria setting of a health status assessment tool based on dietary patterns for middle-aged women. Methods: A total of 474 middle-aged women who visited the Comprehensive Medical Examination Center at Hanmaeum Hospital in Changwon were enrolled (IRB 2013-0005). The validity was verified using clinical indicators for the diagnosis of metabolic syndrome (MS), and it was used to set the criteria for the tool. A logistic regression analysis was performed for validation. The area under-receiver operation (AUC), sensitivity, specificity, and Youden Index were calculated through ROC curve analysis. Statistical analysis was performed by SPSS 21, and p value <0.05 was considered to be statistically significant. Results: The mean score of the group with no MS (73.3 points) was significantly higher compared to the group with MS (65.7 points) (p<0.001). An analysis of the association between the tool scores and risk of MS showed a 0.15-fold reduction in the risk of MS every time the tool's score increased by one point. As the result of the ROC curve analysis, the assessment reference point was set to 71 points, indicating 77.0% sensitivity and 61.0% specificity. Risk of MS was significantly higher in the group with a score of less than 71.0 than a group with more than 71 points (OR=5.28, p<0.001). Conclusions: This study was the first attempt to develop a health status assessment tool based on the dietary patterns for middle-aged women, and this tool has proven its usefulness as an MS assessment tool through the application of middle-aged women in the field of health screening.
Cucumber (Cucumis sativus L.) plants were regenerated through organogenesis and somatic embryogenesis in cotyledon and hypocotyl cultures. The shoots were efficiently formed on the basal region of cotyledons cultured on MS medium containing 1.0㎎/L zeatin and 0.1㎎/L IAA in all cultivars used. Embryogenic calli were formed on hypocotyl segments cultured on MS medium containing 1.0㎎/L 2,4-D in cv. group 'Nakhab' and maintained by consecutive subculture on the same medium every 2-3 weeks without loss of embryogenic ability. Upon transfer to MS basal medium, high frequency somatic embryogenesis was achieved easily from embryogenic callus. Regenerated plantlets through organogenesis and somatic embryogenesis were transplanted to pots and gradually acclimatized to greenhouse condition where they subsequently produced fruits.
When the leaves, roots and stem segments of seedling of Polygonatum odoratum were cultured on Murashige and Skoog medium with 2.0mg/l BAP, stem segments were the most efficient explants for adventitious shoot inductino. To observe the efficient combination of growth regulators on the adventitious shoot formation , stem segments were cultured on MS medium with various kinds of cytokinins (BAP, kinetin, zeatin). From this experiment, cytokinin treatement was prerequisite for theadventitious shoot formatino,especially BAP was the most effective. Auxin (NAA or IBA) in combination with cyotokinin highly enhanced the adventitious shoot formation. Twenty five percents of explants produced the adventitious shoots on medium with 2.0mg/l BAP solely, while 83% of explants produced the adventitious shoots on medium with 2.0mg/l BAP and 0.1mg/l IBA. Root formationform adventitious shoot was promoted after transfer to 1/2 MS medium supplemented with 0.1mg/l IBA and 0.5mg/l zeatin, thereafter the plantlets with shoots and roots were cultured on 1/2MS medium lacking growth regulators. When the stem segments were cultured to MS medium with 1.0mg/l 2,4 NAA and IBA , yellow and nodulous cali were formed from the stem segments which were developed into adventitious roots. These roots were actively grew after transferred to MS liquid medium lacking growth regulators.
Park, Jong-Suk;Kim, Suk-Weon;In, Dong-Su;Eun, Jong-Seon
Journal of Plant Biotechnology
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v.30
no.1
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pp.109-113
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2003
Cryopreservation of embryogenic callus derived from apical meristem culture was attempted by slow prefreezing method (two-step method) with various cryoprotectants in sweetpotato cv. 'Yulmi' Precultured embryogenic calli on medium containing 10 mg/L ABA prior to slow prefreezing in liquid nitrogen indicated higher survival rate than 1.0 mg/L ABA preteatment. The cryoprotectant comprising 1.28 M DMSO in 0.4 M sucrose solution gave the best survival (over 46%) of sweetpotato cells exposed to liquid nitrogen as determined by TTC reduction and FDA staining method. Cryopreserved calli cultured on MS medium with 1.0 mg/L 2,4-D were grown for 4 weeks in the dark and induced embryos after another 4 weeks. They were subcultured on MS medium supplemented with 0.1 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L kinetin for 2 weeks and regenerated into normal plantlets in MS basal medium.
Kim, Ghee-Hwan;Kim, Won;Kim, Jin-Sung;Jin, Qingri;Kang, Won-Ku;Lee, Jong-Hwa;Ha, Jung-Heun;Jeong, Eun-Ju
Journal of Pharmaceutical Investigation
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v.37
no.3
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pp.179-186
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2007
A simple, sensitive and selective liquid chromatographic/tandem mass spectrometric method (LC-MS/MS) was developed and validated for doxifluridine and 5-fluorouracil (5-FU) quantification in dog heparinized plasma. Sample preparation was based on liquid-liquid extraction using a mixture of isopropanol/ethyl acetate (1/9 v/v) to extract doxifluridine, 5-FU and 5-chlorouracil (5-CU, an internal standard) from plasma. Chromatography was performed on a C-18 analytical column and the retention times were 2.7, 1.5 and 1.7 min for doxifluridine, 5-FU and 5-CU, respectively with shorter analysis time within 5 min than previously reported methods. The ionization was optimized using ESI negative mode and selectivity was achieved by tandem mass spectrometric analysis by multiple reaction monitoring (MRM) using the transformations of m/z 244.8>107.6, 129.0>42.0 and 144.9>42.1 for doxifluridine, 5-FU and 5-CU, respectively. The achieved low limit of quantification was 20.0 ng/mL and the assay exhibited linear range of 20-2000 ng/mL ($R^2>0.99957$ for doxifluridine and $R^2>0.99857$ for 5-FU), using $100{\mu}L$ of plasma. Accuracy and precision of quality control samples for both doxifluridine and 5-FU met KFDA and FDA Guidance criteria of 15% for accuracy with coefficients of variation less than 15%. This method demonstrated adequate sensitivity, specificity, accuracy, precision and stability to support the simultaneous analysis of doxifluridine and 5-FU in dog plasma samples in pharmacokinetic and bioequivalence studies.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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