This study investigated bacterial growth-inhibitory effect of 69 therapeutic herbal plants extracts on 9 bacterial strains using a disc diffusion assay. Especially, the antimicrobial activity of Psoraleae semen, which showed different activity on pathogenic Gram-positive and Gram-negative bacteria, was evaluated by MIC (minimal inhibition concentration) and biofilm formation assay. The effect of Psoraleae semen extract on bacterial cell membranes was examined by measurement of protein leakage (optical density at 280 nm) and scanning electron microscope (SEM). No clear zone was formed on discs containing Gram-negative bacteria, but Gram-positive bacteria exhibited clear zones. The MICs of Psoraleae semen extract were $8{\mu}g/mL$ for Streptococcus mutans, and $16{\mu}g/mL$ for Enterococci and Staphylococcus aureus. In addition, biofilm formation was inhibited at concentration $8-16{\mu}g/mL$. Protein leakage values and SEM images revealed that cell membranes of Gram-positive bacteria were impaired following exposure to the extract. Further, the extract inhibited the growth of Listeria monocytogenes in sausages. These results indicate that Psoraleae semen extract could be utilized as a natural antimicrobial agent against Gram-positive bacteria.
Kim Hyunkyung;Lee Jue-Hee;Shim Jin Kie;Han Yongmoon
YAKHAK HOEJI
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v.49
no.4
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pp.323-329
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2005
Antimicrobial peptides are evolutionary ancient weapons for animal and plant species to depend themselves against infectious microbes. In the present study, we investigated if an antimicrobial peptide was produced from Coptidis Rhizoma. For the determination, protein substance from the medicinal plant was isolated by various preparations. Among the preparations, the protein portion dissolved in phosphate-buffered saline solution (CRP-DS) that contained the most amount of protein $(90\%)$ resulted in maximal inhibition of Candida albicans which causes local and systemic infections. Analyses by gel-electrophoresis and gel-permeation chromatography showed the CRP-DS formed a single band of approximately 11.8 KDa as molecular size. Antifungal activity of the CRP-DS was almost equivalent to antifungal activity by fluconazole, resulting in MIC (minimal inhibitory concentration) of approximately $50{\mu}g/ml$. The antifungal activity was a dose-dependent. The antifungal activity appeared to be inactivated by heat-treatment and ionic strength, respectively. In a murine model, the CRP-DS enhanced resistance of mice against disseminated candidiasis. The HPLC analysis demonstrated maximum $4\%$ of berberine as residual content in the CRP-DS preparation resulted in no influence on the antifungal activity. In addition, protein portion isolated from Phellodendri Cortex producing the alkaloid component like Coptidis Rhizoma had no such anticandidal effect. These results indicate that the protein substance from Coptidis Rhizoma was responsible for the antifungal activity.
In order to design a novel synthetic peptide with improved fungicidal activity but low hemolytic activity, a hybrid peptide, cecropin A(l-8)-magainin 2(1-12), and its analogue peptides were synthesized by the solid phase method. Antifungal and hemolytic activities of the synthetic peptides were assessed by the growth inhibition against Trichosporon beigelii and the cell membrane lysis against human red hlood cells, respectively. Analogue 2 in which Lys at position 12 in cecropin A(1-8)-magainin 2(1-12) was substituted with Ala showed most potent antifungal activity (MIC: 2.5.$\mu$g/ml) with minimal hemolytic activity (0.5% hemolysis at the (200.$\mu$g/ml peptide). This peptide (A2), therefore, could be useful as a model for further designing potent antifungal peptides without cytotoxicity.
This study aimed to evaluate in vitro effects of Rheum undulatum L. root on the development of dental caries, especially its effects on viability, dental plaque formation, and glycolytic acid production of Streptococcus mutans and Streptococcus sobrinus. Methanol extract of Rheum undulatum L. root and its fractions were prepared and tested. Among the test extract and fractions, dichloromethane fraction (DF) showed the most active antibacterial activity (inhibition zone: 13-17 mm) against S. mutans and S. sobrinus in a disc diffusion method. Minimal inhibitory concentrations (MICs) of DF against these bacteria ranged from 0.25 to 0.5 mg/mL. Furthermore, DF significantly inhibited the caries-inducing factors of these bacteria. At sub-MIC levels, DF inhibited in vitro dental plaque formation by S. mutans and S. sobrinus ($IC_{50}$= 0.079 and 0.142 mg/mL, respectively), which was caused, in part, by the inhibitory effect on the activity of glucosyltransferases. A significant reduction of glycolytic acid production was found at the concentration as low as 0.032 mg/mL for S. mutans and 0.063 mg/mL for S. sobrinus. The possible bioactive compounds that are inducing in vitro anti-cariogenic activity of DF are unknown. Based on the preliminary phytochemical analysis, the activity of DF may be related to the presence of anthraquinones, cardiac glycosides, coumarines, sterols/terpenes, and phenolics. These results indicate that DF is probably useful for the control of dental plaque formation and subsequent dental caries development.
To investigate anticariogenic effects of extracts from pine needles and twigs, we measured the extracts' antimicrobial activities against Streptococcus mutans, their glucosyltransferase (GTase) inhibitory effects and their stabilities under various conditions of heat and pH. The 70% ethanol extracts of pine needles and twigs showed greater antimicrobial activities against S. mutans than the hot water extracts, and the pine twig extracts showed greater antimicrobial activity than the pine needle extracts. More specifically, the n-hexane fractions of the pine needles and twigs had the greatest effects against S. mutans, and their minimal inhibition concentration (MIC) was 0.6 mg/mL. The results of the extracts' GTase inhibitory effects indicated that the 70% ethanol extracts had greater effects than hot water extracts, and the pine twig extracts showed greater effects than the pine needle extracts. The antimicrobial activity against S. mutans for the pine needle n-hexane traction was greatly reduced as temperature increased, and was also largely affected by changes in pH. These results suggest that extracts from pine needles and twigs have anticariogenic effects and could be used as anticariogenic food additives.
Chitosan has been known to have an antimicrobial activity. Chitosan samples having different molecular weights were tested for the antimicrobial activity against Escherichia coli in a liquid medium and on the paper sheets coated with different types of chitosan samples. In a liquid medium, Chitosan A $(Mw\;3,000{\sim}5,000)$ and B $(Mw\;200,000{\sim}500,000)$ showed minimal inhibitory concentration (MIC) of 40 and $10\;{\mu}g/ml$, respectively. The MIC of chitosan C $(Mw\;500,000{\sim}1,500,000)$ was similar to that of chitosan B. The paper sheets coated with chitosan A, B, and C also showed growth inhibition against E. coli. As a typical agricultural product, strawberry was tested for the extension of shelf life by using the chitosan-coated packaging papers. Storage experiments showed that chitosan-coated packaging papers extended the shelf life of strawberry at the chilling temperature of $4^{\circ}C$.
First. the purification and analysis of alliin in garlic from different origins by alliin-HPLC determination method were studied. Allinase in garlic was inactivated by heating in boiling water followed by extraction of alliin in garlic with 80% methanol. To remove free amino acids and alliin homologs in garlic, garlic extract was separated by cation exchange column which was packed with amberlite CG-120 resin using 40L d-water as eluent. Alliin in garlic extract was crystallized in a mixture of acetone (50$^{\circ}C$):H$_2$O:acetic acid=70:29:1 and then recrystallized in a mixture of acetone (50$^{\circ}C$):H$_2$O:acetic acid=75:24:1. Obtained alliin was identified by melting point. TLC, microscope observation and mass spectrometry. High performance liquid chromatography (HPLC) following pre-column derivatization of cystein derivatives with o-phthaldialdehyde/2-mercaptoethanol has succeessfully been applied to the analysis of various garlics. Each alliic of standard solution and garlic extract was derivatized to isoindole derivative by o-phthaldialdehyde /2-mercaptoethanol and then analyzed by HPLC. Six point calibration was done by using alliin peak area. Lineality was observed at 0 ∼ 1.0mg/ml of alliin concentration. Weighted regression line function was Y=6254X - 256077. By this function, alliin contents in various garlics were 0.34 ∼ 0.73% fresh weight. Second study was designed to evaluate the effects of garlic extracts of various concentrations on the growth of various pathogenes (Eubacterium limonsum, Bacteroides fragilis, Salmonella typhimurium, Salmonella typhi, Shigella sonnei, Kiebsiella pneumoniae, Enterobacter cloacae, Pserdomonas aeruginosa, Escherichia coli). For antimicrobial effects against microorganism, totally minimal inhibition concentrations (MIC) of alliin were from 5,000 to 20,000ppm. MIC of ethanol extract were 1,250 to 10,000ppm.
Tolerance against heat, sanitizers, and antibiotics of 112 Cronobacter isolates classified by desiccation was determined to permit effective biocontrol in powdered foods. The isolates were classified into three groups: dry-tolerant (n=37), dry-sensitive (n=7), and dry-intermediate (n=68). The strains that were highly tolerant to drying also showed high heat tolerance that they seemed to have high tolerance to heat after dry stress in powdered foods like infant formula. Sodium hypochlorite and benzalkonium chloride concentrations necessary to achieve a 5-log reduction in viable counts (CFU/mL) were 15-25 ppm and 5-15 ppm, respectively. However, there was little difference of the efficacy of these sanitizers between dry-sensitive and -tolerant strains for planktonic cells suspended in 3% albumin. The minimal inhibition concentration (MIC) of $\beta$-lactam ampicillin was 64-128 ppm for 90% of the strains. The isolates were consistently sensitive to kanamycin and naldixic acid (MIC=4 ppm). Dry-tolerant strains displayed more antibiotic resistance than dry-sensitive strains. The results indicate that dry-tolerant Cronobacter isolates often possess heat and antibiotic resistance, indicated the need for potent sterilization treatments of powdered foods.
Kang, Eun-Jin;Park, Ji Hun;Jin, Seul;Kim, Young-Rok;Do, Hyung-Ki;Yang, Woong-Suk;Lee, Jae-Yong;Hwang, Cher-Won
Journal of Environmental Science International
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v.28
no.2
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pp.225-233
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2019
In this study, we investigated the in vitro anti-biofilm activities of plant extracts of chives (Allium tuberosum), garlic (Allium sativum), and radish (Raphanus sativus L.) against environment harmful bacteria (gram-positive Staphylococcus aureus and, gram-negative Salmonella typhimurium and Escherichia coli O157:H7). In the paper disc assay, garlic extracts exhibited the highest anti-biofilm activity. The Minimal Inhibitory Concentration (MIC) of all plant extracts was generally higher for gram-negative bacteria than it was for gram-positive bacteria. Gram-negative bacteria were more resistant to plant extracts. The tetrazolium dye (XTT) assay revealed that, each plant extract exhibited a different anti-biofilm activity at the MIC value depending on the pathogen involved. Among the plant extracts tested, garlic extracts (fresh juice and powder) effectively reduced the metabolic activity of the cells of food-poisoning bacteria in biofilms. These anti-biofilm activities were consistent with the results obtained through light microscopic observation. Though the garlic extract reduced biofilm formation for all pathogens tested, to elucidate whether this reduction was due to antimicrobial effects or anti-biofilm effects, we counted the colony forming units of pathogens in the presence of the garlic extract and a control antimicrobial drug. The garlic extract inhibited the E. coli O157:H7 biofilm effectively compared to the control antimicrobial drug ciprofloxacin; however, it did not inhibit S. aureus biofilm significantly compared to ciprofloxacin. In conclusion, garlic extracts could be used as natural food preservatives to prevent the growth of foodborne pathogens and elongater the shelf life of processed foods.
The alone and combined effects of bacteriocin produced from Enterococcus faecalis MJ-213 and potassium sorbate against the food-borne pathogenic bacteria were studied. Bacteriocin minimal inhibitory concentration (MIC) values for Staphylococcus aureus ATCC 6538 and Salmonella enteritidis ATCC 13076 were 50 and 100 ${\mu}g$/ml, respectively. Bacteriocin (100 ${\mu}g$/ml) alone was active against S. aureus and S. enteritidis, but it was lower in antimicrobial effectiveness than the combination of bacteriocin (100 ${\mu}g$/ml) with potassium sorbate (100 ${\mu}g$/ml), which reduced initial counts (6 log cycle) of S. aureus and S. enteritidis by 1 and 3 log cycle, respectively. The bactericidal activity of bacteriocin of E. faecalis MJ-213 heated at $100^{\circ}C$ for 30 min or $121^{\circ}C$ for 15 min was markedly decreased as compared with the control. Moreover, the activity of bacteriocin was completely abolished by pepsin or protease II, but not affected by ${\alpha}$-amylase or lipase. The activity of bacteriocin adjusted to pH 6.0-8.0 showed almost the same inhibition ratio compared with the bacteriocin unadjusted pH, and though the inhibition ratio against pathogenic bacteria was reduced than the control, the bacteriocin was stable at pH 4.0 or 10.0, relatively. Furthermore, the combined treatment of bacteriocin and potassium sorbate than the alone treatment of bacteriocin significantly decreased (p<0.05) the viable cell counts of S. aureus or S. enteritidis inoculated on grind beef during storage at $4^{\circ}C$.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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