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Novel approaches for generating and manipulating diploid strains of Chlamydomonas reinhardtii

  • Kariyawasam, Thamali;Joo, Sunjoo;Goodenough, Ursula;Lee, Jae-Hyeok
    • ALGAE
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    • 제34권1호
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    • pp.35-43
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    • 2019
  • Genetic study of haploid organisms offers the advantage that mutant phenotypes are directly displayed, but has the disadvantage that strains carrying lethal mutations are not readily maintained. We describe an approach for generating and performing genetic analysis of diploid strains of Chlamydomonas reinhardtii, which is normally haploid. First protocol utilizes self-mating diploid strains that will facilitate the genetic analysis of recessive lethal mutations by offering a convenient way to produce homozygous diploids in a single mating. Second protocol is designed to reduce the chance of contamination and the accumulation of spontaneous mutations for long-term storage of mutant strains. Third protocol for inducing the meiotic program is also included to produce haploid mutant strains following tetraploid genetic analysis. We discuss implication of self-fertile strains for the future of Chlamydomonas research.

신품종 '미소' 느타리버섯의 4극성 불화합 시스템 (Tetrapolar incompatibility system of Pleurotus ostreatus new strain 'Miso')

  • 이병주;김용균;김홍규;양의석;임용표
    • 한국버섯학회지
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    • 제7권4호
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    • pp.141-149
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    • 2009
  • 본 연구는 신품종 '미소' 느타리버섯에 대한 성양식에서의 불화합성 체계를 이해하고자 수행하였으며 이 실험결과 자실체로부터 채취한 단포자의 교배를 통해 신품종 '미소' 느타리버섯이 자웅이체성이고 4극성 교배양식을 나타내는 것을 확인하였다. 꺽쇠연결이 없는 분리된 담자포자는 단핵균사로 판단되었고, 이러한 단핵균사간 화합, 불화합성 여부는 빠른 생육과 활력있는 발달형태를 통해 어느 정도 육안으로도 확인이 가능하였으며 두 단핵 균사체의 대치배양 후에 형성되는 꺽쇠연결을 현미경으로 관찰하여 명확히 확인되었다. 예외적으로 교배가 화합성인 경우 형성되는 이핵 균사체가 대치배양의 한쪽 가장자리에서만 꺽쇠연결이 발견되는 일방향 이핵화 현상이 관찰되었다. 이 실험결과로부터 4극성 교배에 있어서 $A_1A_2B_1B_2$의 이핵 균사체로부터 발생하는 네 가지 유전자 형태, 즉 $A_1B_1$, $A_1B_2$, $A_2B_1$, 그리고 $A_2B_2$가 화합성 테스트에 의해 결정되었으며 선발된 나머지의 단핵 균사체의 교배형은 Tester 계통을 이용하였다.

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강원지역 포장에서 분리한 감자 역병균 (Phytophthora infestans) 의 metalaxyl에 대한 감수성 변화 (Changes of metalaxyl sensitivity of Phytophthora infestans isolated from potato fields of Gangwon area)

  • 장현철;정은경;이윤수;김병섭
    • 농약과학회지
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    • 제7권1호
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    • pp.25-31
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    • 2003
  • 감자역병에 대한 각종 살균제의 방제효과 변화를 조사한 결과 metalaxyl의 방제가는 dimethomorph 및 하 haboxam 과 비슷한 방제효과를 나타내었다. 실내에서 metalaxyl에 대한 반응을 조사한 결과 2001년 분리된 균주중 저항성균은 4.9%, 중도 저항성균은 87.8%, 감수성균이 7.3%로 나타났다. 2002년 분리된 균주들은 저항성균이 14.5%, 중도 저항성균이 80.1%, 감수성균이 5.4%로 각각 나타났으며, 저항성균은 대부분이 횡계 지역에서 분리된 균이었다. 감자역병균의 교배형을 조사한 결과 2001년에 분리된 모든 균은 A1형으로 나타났으며, 2002년 분리된 균주중 86.4 %는 A1형으로 나다났고, 평창군 횡계 지역에서 분리한 균에서만 A2형이 출현하였다. Metalaxyl의 방제효과가 증가된 주요한 원인은 90 년대 초에 비하여 저항성균의 밀도가 줄어든 반면, 중도 저항성균과 감수성균의 밀도가 증가되었으며, metalaxyl에 저항성을 지난 A2균의 밀도가 줄어든 것에 기인하는 것으로 판단되었다.

배과원에서 교미교란제를 이용한 복숭아순나방과 사과애모무늬잎말이나방 발생소장과 방제 (Seasonal Catch and Control of Grapholita molesta(Lepidoptera:Tortricidae) and Adoxophyes orana(Lepidoptera:Tortricidae) by Mating Disruption in Pear Orchards)

  • 조영식;송장훈;황해성
    • 한국응용곤충학회지
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    • 제49권2호
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    • pp.139-144
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    • 2010
  • 본 연구는 배 과원에서 과실과 신초 등에 피해를 주는 복숭아순나방과 사과애모무늬잎말이나방에 대한 교미교란제의 효과를 검토하기 위해 수행하였다. 2007년에 복숭아순나방은 4회의 발생 peak를 보였으나 처리에 따라 약간 다르게 나타났다. 관행방제의 경우 4월 중 하순에 가장 많은 수가 포획되었고, 6월 중순, 8월 중순, 9월 상.중순에 각각 발생 peak를 보였으나 무방제구의 경우, 4월 발생량은 미미하였다. 사과애모무늬잎말이나방도 4회의 발생 peak를 보였다. 교미교란제 처리구에서는 예찰트랩으로 거의 포획되지 않았고, 무방제구와 관행방제구에서는 유사하게 포획되었다. 배 과원 나방류의 피해는 2006년의 경우, 사과애모무늬잎말이나방에 대한 교미교란제 처리구와 관행방제구간에는 유의성이 있었으며, 특히 교미교란제처리구에 살충제 처리내용에 따라 8월의 피해엽율간에는 유의성이 달랐고, 복숭아순나방에 의한 신초와 수확한 과실에서도 유사한 결과를 보였다.

RAPD 분자지표를 이용한 복숭아순나방(Grapholita molesta)의 집단 유전적 변동 분석 (Gene Flow of Oriental Fruit Moth, Grapholita molesta, Populations Analyzed by RAPD Molecular Markers)

  • 손예림;김용균
    • 한국응용곤충학회지
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    • 제47권1호
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    • pp.37-44
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    • 2008
  • 복숭아순나방(Grapholita molesta)은 사과에 주요 해충이다. 이 해충을 환경친화형 방법으로 방제하기 위해 성페로몬을 이용한 교미교란제 처리 기술이 개발되고 있다. 광범위한 영역에 대한 교미교란제의 처리는 복숭아순나방 방제에 효과적이나 이러한 광범위영역에 대한 구체적 크기를 결정하는 방법은 알려지지 않았다. 이를 결정하기 위해서는 복숭아순나방의 교미행동 범위를 결정할 수 있는 방법이 개발되어야 하며, 이를 위해 복숭아순나방의 이동을 추적할 수 있는 분자지표의 개발이 필요하게 되었다. 본 연구는 RAPD (random amplified polymorphic DNA) 기술을 이용하여 효과적인 두 개의 분자지표를 개발하였다. 상이한 지역과 시기에 따라 구분되는 야외 복숭아순나방 집단들에 대해서 이들 분자지표를 이용하여 집단 유전 분석이 실시되었다 이들 분자지표들은 특정지역에서 복숭아순나방 집단들이 시기적으로 유전적 조성에 뚜렷한 차이를 보여 주었다. 또한 서로 다른 지역의 복숭아순나방 집단들은 거리에 따라 상대적으로 차이가 증가하였지만, 계절이 진행함에 따라 그 차이가 감소하였다.

국내 고추역병균 Phytophthora capsici 집단의 교배형 분포 특성에 따른 Metalaxyl 감수성 (Metalaxyl Sensitivity Related with Distribution Feature of Mating Type of Phytophthora capsici Population from Red Pepper in Korea)

  • 송정영;유성준;이윤수;김병섭;김홍기
    • 한국균학회지
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    • 제31권2호
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    • pp.98-102
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    • 2003
  • 1995년부터 1998년까지 75곳의 국내 고추포장들로부터 수집된 433개의 고추역병균 Phytophthora capsici 집단의 교배형 분포 특성에 따른 metalaxyl 감수성을 분석하였다. Metalaxyl $2{\mu}g/ml$ 농도에서 P. capsici 집단의 평균 균사생장 저해율은 68.2%였으며, 저항성균의 발생율은 평균 28.6%였다. 포장단위별로 metalaxyl에 대한 반응을 조사한 결과 A1형 또는 A2형 단일 교배형만 출현한 포장들의 균주들은 서로 비슷한 수준의 감수성을 나타냈으며, 대부분 포장단위별로 약제 감수성이나 저항성 중의 하나로 구분됐다. 그러나 교배형이 혼재하여 분포하는 각 포장단위별 균주들간의 약제에 대한 반응은 단일교배형 포장균주들에 비해 매우 다양했으며, 포장별로 저항성균의 발생비율도 다양했다. 이러한 결과들은 국내에 분포하는 고추역병균 P. capsici 집단의 metalaxyl 약제에 대한 다양한 감수성이 각 포장단위별 A1 : A2교배형 발생비와 매우 밀접한 관계가 있다는 것을 의미한다.

Edwardsiella tarda 인위감염에 의한 넙치, Paralichthys olivaceus의 가계별 내성변이 (Family variation in survival of olive flounder Paralichthys olivaceus after Edwardsiella tarda infection in challenge tests)

  • 김현철;손새봄;정종근;이정호;최혜승;노재구;박철지;민병화;김종현;김경길;명정인
    • 한국어병학회지
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    • 제22권3호
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    • pp.275-282
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    • 2009
  • 본 연구는 에드워드 내성 정도를 기준으로 선발된 넙치 친어를 이용하여 $4{\times}4$ 펙토리얼 교배를 통해 얻어진 16가계 넙치의 에드워드 인위 감염 결과를 이용하여 교배 그룹, 교배 암컷, 교배 수컷의 효과를 분석하였다. 내성 친어간의 교배에 의해 생산된 교배구(RR)의 내성 지수, 생존율, 생존 일수는 각각 17.98, 13.77%, 18.36일로 나타났으나, 민감 친어간의 교배에 의해 생산된 교배구(SS)는 각각 12.46, 2.71%, 12.40일로 나타났다. 이상의 결과에서, 에드워드 질병내성 형질에 대한 가계간, 개체간 내성 정도의차이가 존재하는 것을 확인하였고, 인위 감염 결과를 이용하여 질병 저항성에 대한 선발이 가능할 것으로 판단된다.

담배나방의 우화, 교미 및 산란의 행동과 일일리듬 (Behavior and Circadian Rhythm of Emergence, Copulation and Oviposition in the Oriental Tobacco Budworm, Heliothis assulta Guenee)

  • 조점래;부경생
    • 한국응용곤충학회지
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    • 제27권2호
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    • pp.103-110
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    • 1988
  • 사육실조건($25pm$$1^{\circ}C$, 광주기 16L:8D, 상대습도 60%)에서 조사된 담배나방(Heliothis assclta Gueness)의 우화, 교미 및 산란의 행동과 일일리듬은 다음과 같다. 불꺼진 후 3시나 이내에 75% 이상이 우화하였으며, 우화된 날개확장과 경화까지는 약 33분이 소요되었다. 성충 수컷은 교미때까지 촉각 운동, 날개 진동, hairpencils확장 , 암컷 산란관 두드림등 일련의 행동을 보였으나, 암컷은 복부끝의 수죽과 이완, 날개 진동 등의 다소 단순한 행동을 보였다. 모든 교미는 암기간 전반기에 주로 일어났으며, 불꺼진 2시간 전후에서 최대 피크를 보였으나, 처녀 암컷의 경우 연령증가에 따라 빨라지는 경향을 보였다. 교미율은 24시간된 미교미암컷에 가장 높았으며, 연령증가에 따라 감소되는데 같은 경향이 미교미수컷에서도 나타났다. 교미지속기단은 평균 $77\pm$14분이었다. 산란 역시 암기간 전체를 통하여 일어났지만, 불꺼진 후 2시간 이내에 최적 피크를 보였으며, 산란수는 교미후 3일에서 가장 많았다. 교미율, 산란수, 수명은 성비에 따라 달랐으며, 교미한 성충의 수명이 교미하지 않은 것보다 더 짧았다.

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제주재래흑돼지×Landrace F2 집단의 성장형질에 대한 교배조합의 효과 (Effect of Mating Types on the Growth Traits of F2 Population between Landrace and the Jeju Native Black Pigs)

  • 강용준;조상래;정동기;이재봉;박희복;조인철;한상현
    • 한국수정란이식학회지
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    • 제31권1호
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    • pp.65-72
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    • 2016
  • This study was conducted to examine effects of mating type on the growth traits in an $F_2$ population produced by reciprocal intercrosses between Landrace and the Jeju Native Black pig (JBP). The $F_2$ progeny were produced by two different mating types based on the grand dams of founder breeds JBP (Cross_1) and Landrace (Cross_2). The body weights at 21 days after birth (BW21D) was significantly different between Cross_1 and Cross_2 (P<0.05), showing that the BW21D of Cross_1 has about 0.25 kg heavier than Cross_2. The significant differences were found between males and females for the growth traits including the body weights (BWB, BW21D, BW70D and BW140D) and average daily gains (ADG, eADG and lADG) (P<0.05). Males were heavier BWB, BW21D and BW140D levels, and higher ADG and lADG levels than females. On the other hand, females had heavier BW70D and higher eADG levels than those of males. When considering the mating types and sex simultaneously the Cross_2 males had the heaviest BW140D among the combinations of cross and sex. In conclusion, it is desirable to choose Landrace as grand dams in the reciprocal intercrosses between Landrace and JBP for producing their progeny construction and to plan the production of $F_2$ males for industrial purposes. These results suggested that it may be one of useful strategies to improve the productivity through out selection of the mating type of founder breeds and the progeny sex, especially in Landrace, JBP and their related populations.

열대거세미나방 성페로몬 성분에 대한 수컷의 촉각 반응 (Electroantennogram Responses of Spodoptera frugiperda Males (Lepidoptera: Noctuidae) to Sex Pheromone Compounds)

  • 조점래;김정환;서보윤;서미자;이관석
    • 한국응용곤충학회지
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    • 제60권4호
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    • pp.363-367
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    • 2021
  • 본 연구는 성페로몬에 대한 열대거세미나방 수컷 성충의 촉각 반응 및 중복 교미 여부를 확인하기 위해 수행하였다. 성페로몬 성분인 Z9-14:Ac에 대한 열대거세미나방 수컷 성충의 촉각 반응은 농도 의존적으로 농도가 증가할수록 크게 나타났다. 조사한 7성분 중 Z9-14:Ac 성분에 대한 촉각 반응이 가장 컸다. 성페로몬의 혼합 성분에 대한 촉각 반응이 단일 성분에 비해 컸다. 열대거세미나방 수컷 성충은 실험실 조건에서 중복교미가 가능하고, 첫 교미율이 58.3%인데 비해서 두 번째 교미율이 72.2%로 증가하였다. 교미한 수컷 성충의 촉각 반응과 교미하지 않은 수컷 성충의 촉각 반응의 차이가 없었다. 성페로몬 트랩에 교미하지 않은 수컷이 시험기간 중에 포획되지 않았다. 대조구인 교미하지 않은 암컷 성충을 장착한 트랩에서도 교미하지 않은 수컷 성충은 포획되지 않았다. 비록 실내에서 교미한 수컷 성충은 성페로몬 성분에 대해 교미하지 않은 수컷 성충처럼 촉각 반응을 보였다고 할지라도 실제 야외 망실 하우스에서 교미를 한번 한 수컷 성충은 비행 능력 등 활력의 문제로 트랩에 포획되지 않았을 가능성이 있다고 생각된다. 야외 노지에서 열대거세미나방 성페로몬에 대한 수컷 성충의 유인 정도는 추후 좀 더 많은 검토가 필요할 것으로 본다.