A series of oxazolidinone-based strobilurin analogues were efficiently synthesized by the reaction of 3-(2-bromomethylphenyl) oxazolidin-2-one with 1-substituted phenyl-2H-pyrazolin-3-one. Their structures were confirmed and characterized by $^1H$-NMR, $^{13}C$-NMR, elemental analysis, and mass spectroscopy. In addition, the crystal structure of the target compound 3-(2-((1-phenyl-2H-pyrazol-3-yloxy)methyl)phenyl) oxazolidin-2-one was determined by single crystal X-ray diffraction. The bioassay results of these compounds indicated that some of the oxazolidin-2-one derivatives containing N-substituted phenyl 2H-pyrazol ring exhibited potential in vivo fungicidal activities against M. grisea at the dosage of $1\;g\;L^{-1}$.
Rice blast caused by Magnaporthe oryzae is a major disease. In the present study, we aimed to identify and evaluate the novel bacterial isolates from rice rhizosphere for biocontrol of M. oryzae pathogen. Sixty bacterial strains from the rice plant's rhizosphere were tested for their biocontrol activity against M. oryzae under in vitro and in vivo. Among them, B. amyloliquefaciens had significant high activity against the pathogen. The least disease severity and highest germination were recorded in seeds treated with B. amyloliquefaciens UASBR9 (0.96 and 98.00%) compared to untreated control (3.43 and 95.00%, respectively) under in vivo condition. These isolates had high activity of enzymes in relation to growth promoting activity upon challenge inoculation of the pathogen. The potential strains were identified based on 16S rRNA gene sequencing and dominance of these particular genes were associated in Bacillus strains. These strains were also confirmed for the presence of antimicrobial peptide biosynthetic genes viz., srfAA (surfactin), fenD (fengycin), spaS (subtilin), and ituC (iturin) related to secondary metabolite production (e.g., AMPs). Overall, the results suggested that application of potential bacterial strains like B. amyloliquefaciens UASBR9 not only helps in control of the biological suppression of one of the most devastating rice pathogens, M. grisea but also increases plant growth along with a reduction in application of toxic chemical pesticides.
Banana blast was frequently encountered in greenhouses of Jeju province during a local survey of plan diseases from 1985 to 1986. The disease incidence on banana was very severe up to $100\%$ in a greenhouse. The causal fungus was identified as Pyricularia angulata Hashioka based on mycological characteristics and Path genicity of the fungus. The symptom of blast produced on leaves of banana was circular to oval, dark brow spots with yellow margins which measured 1-10mm in diameter, and the symptom on fruits was circular to oval reddish brown or dark brown, depressed spots which measured up to 20mm in diameter. The symptoms were scattered not only on leaves and fruits of banana but. also on petioles, leaf sheaths, bunch stalks and crowns The pathogen was characterized that conidia were hyaline, 2 septated, ovate to pyriform with a small hilum solitary at ends of den tides of conidiophores, and measured $16.0-34.0\times7.0-12.0{\mu}m$ (average $22.5\times9.0{\mu}m$) and conidiophores were mostly 2 septated, occasionally 2 or 3 branched, denticulate at the tips, and measured $7.5-100.0\times3.0-5.0{\mu}m$(average $90.0\times4.0{\mu}m$). The optimum temperature range for mycelial growth of the fungus on PDA was $26-28^{\circ}C$. The result of pathogenicity tests revealed that P. angulata had pathogenicity only on banana. On the other hand Pyricularia grisea (Cke.) Sacc. isolated from Digitaria sanguinalis(L.) Scopo. was not pathogenic to banana. It was revealed that the leaves were the most susceptible to P. angulata among several parts of banana in inoculation tests. Thirty-day-old fruits of banana were more susceptible to the fungus than 60-day-old fruits, and bunch stalks were more susceptible than the fruits.
Rice Oryza sativa accelerated cell death and resistance 1 (OsACDR1) encodes a putative Raf-like mitogen-activated protein kinase kinase kinase (MAPKKK). We had previously reported upregulation of the OsACDR1 transcript by a range of environmental stimuli involved in eliciting defense-related pathways. Here we apply biochemical, gain and loss-of-function approaches to characterize OsACDR1 function in rice. The OsACDR1 protein showed autophosphorylation and possessed kinase activity. Rice plants overexpressing OsACDR1 exhibited spontaneous hypersensitive response (HR)-like lesions on leaves, upregulation of defense-related marker genes and accumulation of phenolic compounds and secondary metabolites (phytoalexins). These transgenic plants also acquired enhanced resistance to a fungal pathogen (Magnaporthe grisea) and showed inhibition of appressorial penetration on the leaf surface. In contrast, loss-of-function and RNA silenced OsACDR1 rice mutant plants showed downregulation of defense-related marker genes expressions and susceptibility to M. grisea. Furthermore, transient expression of an OsACDR1:GFP fusion protein in rice protoplast and onion epidermal cells revealed its localization to the nucleus. These results indicate that OsACDR1 plays an important role in the positive regulation of disease resistance in rice.
Natural wild-type strains of Bacillus subtilis are extensively used in agriculture as biocontrol agents for plants. This study examined two antagonist B. subtilis strains, KB-1111 and KB-1122, and the results illustrated that KB-1122 was a more potent inhibitor of the indicator pathogen than KB-1111. Thus, to investigate the intrinsic differences between the two antagonist strains under normal culture conditions, samples of KB-1111 and KB-1122 were analyzed using MALDI-TOF-MS. The main differences were related to 20 abundant intracellular and 17 extracellular proteins. When searching the NCBI database, a number of the differentially expressed proteins were identified, including 11 cellular proteins and 10 secretory proteins. Among these proteins, class III stress-response-related ATPase, aconitate hydratase, alpha-amylase precursor, and a secretory protein, endo-l, 4-beta-glucanase, were differentially expressed by the two strains. These results are useful to comprehend the intrinsic differences between the antagonism of KB-1111 and KB-1122.
In order to search potent antifungal substances from domestic plants, 40 plants cultivated in Korea were collected. After extracting with methanol (MeOH) and concentrating to dryness, the MeOH extracts were screened for in vivo antifungal activity against six plant diseases at a concentration of $2000{\mu}g/mL$. Fourteen extracts showed disease-controlling activity more than 90% against at least one of the 6 plant diseases tested; eight, seven, and three extracts controlled more than 90% the development of rice blast, tomato late blight, and wheat leaf rust, respectively. However, none of the extracts exhibited in vivo antifungal activity more than 90% against rice sheath blight, tomato gray mold, and barley powdery mildew. From the MeOH extracts of Angelica gigas and A. dahurica showing potent controlling activity against rice blast, 1 and 2 antifungal substances, respectively, were isolated by solvent partitioning and column chromatography. The three compounds were identified to be coumarins, namely, decursin, imperatorin, and isoimperatorin, by mass spectrometry and NMR spectroscopy. They were examined for in vitro and in vivo antifungal activities together with umbelliferone (7-bydroxycournarin) and scopoletin (6-methoxy-7-hydroxycoumarin) containing a free hydroxyl group at position 7 to investigate the structure-activity relationship. In vitro, most of 50% growth inhibitory concentrations ($IC_{50}$) were over $200{\mu}g/mL$, indicating that they have relatively weak antifungal activity. The antifungal activity of decursin and scopoletin, containing cyclic alkoxy groups instead of free hydroxyl group at position 7, was stronger than umbelliferone and scopoletin. Especially, decursin and imperatorin showed potent antifungal activities against Pythium ultimum and Magnaporthe grisea, respectively, with $IC_{50}$ values less than $25{\mu}g/mL$. In vivo, decursin and imperatorin showed potent antifungal activity against rice blast, whereas other coumarins hardly controlled the development of 6 plant diseases tested. These results suggest that the antifungal activity of 7-hydroxycoumarin derivative is substantially increased when the hydroxyl group at position 7 is protected by a stable cyclic alkoxy grouping.
Shin Sang Chul;Roh Jong Yul;Shim Hee Jin;Kim Soon Kee;Kim Chul Su;Park Il Kwon;Jeon Mun Jang;Je Yeon Ho
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.10
no.2
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pp.131-136
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2005
Beauveria bassiana F-101, which has high toxicity toward Acantholyda parki as well as Thecodiplosis japonensis, was an isolate to develop an alternative control system against the major forest pests. Up to now, in B. bassiana, only one pr1 gene has been isolated and characterized. Therefore, we here reported the identification of a pr1-like gene, which would be a factor of toxicity from B. bassiana F-101. The oligonucleotides for the amplification of the pr1-like gene, were chosen based on the conserved regions of the subtilisin family enzymes, pr1 genes of B. bassiana and Metarhizium anisopliae, and proteinase K of Tritirachium album. The cloned PCR fragment had 1111 bp including 52 bp intron. The deduced Pr1-like peptide showed a low identity with Pr1s of entomopathogenic fungi such as B. bassiana Pr1 (BbPr1) and M. anisopliae Pr1 (MaPr1) as well as the proteinase K of T. album (TaPrK). Instead, the deduced peptide had a substantially high amino acid sequence identity $(>65\%)$ with the serine proteases of Magnaporthe grisea (MgSPM1) and Podospora anserina (PaPspA). These results, therefore, appear to suggest that the putative Pr1-like peptide of B. bassiana F-101 belongs to the subtilisin-like serine protease family and may be a novel gene.
Rice blast (Magnaporthe oryza B.) is one of the most important diseases in rice that causing great yield losses every year around the world. It is important to screen valuable genetic resources for improving blast resistance. This study was conducted to identify the blast resistance in 279 Korean rice landraces using blast nursery tests and isolate inoculum screening. The results showed that 11 landrace accessions found to be resistant to rice blast in blast nursery and inoculation screening tests and the degree of lesions in most accessions showed that they were susceptible to reactions. In order to find the distribution of blast resistant genes, a molecular survey was conducted to identify the presence of major blast resistance (R) gene in 279 Korean landraces. The results revealed that their frequency distribution was Pik-m (36.2%), Piz (25.4%), Pit (13.6%), and Pik (10%). Besides, the frequency distribution of Piz-t, Pii, Pik-m/Pik-p, Pi-39(t), Pib, Pi-d(t)2, Pita/Pita-2 and Pi-ta genes were identified as less than 10%. The results did not consist with the reactions against blast diseases between genotypes and phenotypic part of the nursery tests and isolate inoculation. For concluding these results, we used genome-wide SSR markers that have closely been located with resistance genes. The PCoA analysis showed that the landrace accessions formed largely two distinct groups according to their degree of blast resistance. By comparing genetic diversities using polymorphic information contents (PIC) value among the resistant, total and susceptible landraces, we found that PIC values decreased in four SSR markers and increased in six markers in the resistant accessions, which showed contrary to total and susceptible groups. These regions might be linked to resistance alleles. In this study, we evaluated the degree of blast resistance and the information about the distribution of rice blast resistant genes in Korean rice landraces. This study might be the basis for association analysis of blast resistance in rice.
Koo, Sung Cheol;Choi, Man Soo;Chun, Hyun Jin;Shin, Dong Bum;Park, Bong Soo;Kim, Yul Ho;Park, Hyang-Mi;Seo, Hak Soo;Song, Jong Tae;Kang, Kyu Young;Yun, Dae-Jin;Chung, Woo Sik;Cho, Moo Je;Kim, Min Chul
Molecules and Cells
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v.27
no.5
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pp.563-570
/
2009
We previously isolated the OsCBT gene, which encodes a calmodulin (CaM)-binding protein, from a rice expression library constructed from fungal elicitor-treated rice suspension cells. In order to understand the function of OsCBT in rice, we isolated and characterized a T-DNA insertion mutant allele named oscbt-1. The oscbt-1 mutant exhibits reduced levels of OsCBT transcripts and no significant morphological changes compared to wild-type plant although the growth of the mutant is stunted. However, oscbt-1 mutants showed significant resistance to two major rice pathogens. The growth of the rice blast fungus Magnaporthe grisea, as well as the bacterial pathogen Xanthomonas oryzae pv. oryzae was significantly suppressed in oscbt-1 plants. Histochemical analysis indicated that the hypersensitive-response was induced in the oscbt-1 mutant in response to compatible strains of fungal pathogens. OsCBT expression was induced upon challenge with fungal elicitor. We also observed significant increase in the level of pathogenesis-related genes in the oscbt-1 mutant even under pathogen-free condition. Taken together, the results support an idea that OsCBT might act as a negative regulator on plant defense.
Species of Genus Trichoderma are commercially applied as biological control agents against fungal Pathogens. A powerful biocontrol agent, Trichoderma sp. SJG-99721 was isolated from 305 isolates by morphological characters, chitinase activities and antifungal activities against Phytophthora capsiei. The isolate was identified as Trichoderma harzianum from various features such as growth rate at $27^\circ{C}$, significant growth ratio of $27^\circ{C}$ to $17^\circ{C}$, amount of aerial mycelium, types of branching: system, and disposition patterns of phialide and phialospore. Trichoderma harzianum SJG-99721 have been shown to act as a powerful biological agent against fungal phytopathogens; Botrytis cinerea, Rhizoctonia solani, Phytophthora cryptogea, Phytophthora capsiei, Sclerotinia sclerotiorum, Mycoshaerella melonis, Alternaria sotani, Fusarium oxysporum, Collectotrichum gloesporioodes, Alternaria alternata, Phythium ultimum, Phytophthora drechsleri, Pyricularia grisea.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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