Lee, C. H.;C. U. Han;K. S. Jang;Park, Y. H.;H. K. Lim;Kim, J.C.;Park, G. J.;J.S. Cha;Park, J. E.
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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2003.10a
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pp.67.2-68
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2003
A rice cultivar, Taebaegbyeo, is highly resistant to rice blast and moderately resistant to bacterial leaf blight (BLB) caused by Magnaporthe grisea and Xanthomonas oryzae pv. oryzae, respectively. To study the rice disease resistance mechanism, we generated rice deletion M3 mutants by gamma-ray irradiation. Blast and BLB responses of 16,000 M3 mutants were screened by inoculating mixtures of 4 races (KJ-201, H-1113a, KI-313, KI-409) of M. grisea and 3 Korean races of X. oryzae pv. oryzae. We selected so far 21 M3 mutants of Taebaegbyeo showing high susceptibility to the diseases. One of the mutants, KCT-6417, was susceptible to KI-1113a race of M. grisea, suggesting the deletion of a race-specific blast resistance gene in the mutant. To isolate rice genes involved in blast resistance and defense response, we take a PCR-based suppression subtractive hybridization approach using cDNAs of blast-inoculated wild type and the KCT-6417 as a tester and a driver, respectively. Genes specifically expressed in the wild type will be presented. The selected genes would give us a clue to understand mechanism for the race specific resistance and defense responses against M. grisea H-1113a in Taebaegbyeo.
Rhizoctonia leaf blight (large patch) has become a serious problem in Korean lawn grass, which is extremely hard to treat and develops mostly from the roots of lawn grass to wither it away. Rhizoctonia leaf blight (large patch) is caused by Rhizoctonia solani AG2-2 (IV). To develop zoysia japonica with strong disease tolerance against this pathogenic bacterium, ${\beta}-1,3-glucanase$ was cloned from zoysia japonica, which is one of the PR-Proteins known to play a critical role in plant defense reaction. ${\beta}-1,3-glucanase$ is known to be generated within the cells when plant tissues have a hypersensitive reaction due to virus or bacterium infection and secreted outside the cells to play mainly the function of resistance against pathogenic bacteria in the space between the cells. This study utilized the commonly preserved part in the sequence of corn, wheat, barley, and rice which had been researched for their disease tolerance among the ${\beta}-1,3-glucanase$ monocotyledonous plants. Based on the part, degenerate PCR was performed to find out the sequence and full-length cDNA was cloned. E.coli over-expression was conducted in this study to mass purify target protein and implement in vitro activation measurement and antibacterial test. In addition, to interpret the functions of ZjGlu1 gene, each gene-incorporating plant transformation vectors were produced to make lawn grass transformant. Based on ZjGlu1 protein, antibacterial activity test was conducted on 9 strains. As a result, R. cerealis, F. culmorum, R.solani AG-1 (1B), and T. atroviride were found to have antibacterial activity. The gene-specific expression amount in each organ showed no huge difference in the organs based upon the transformant and against 18s gene expression amount.
Bacterial diseases of soybean has been recognized as a limiting factor of soybean production in Korea as it was estimated to cause around 10 percent of yield losses annually. The purpose of the study is to obtain information on the diseases through proving the kinds of pathogens and epidemiology, The wire brush method and multineedle appeared to be the best way of inoculation under all circumstances. Wire brush method, especially, was effective in shortening the incubation period and manifesting the lesion development by introducing more inoculum per unit of area. In case of spray inoculation it was necessary to apply a small amount(1 : 1,000) of wetting agent, twin-20, otherwise it was unabled to produce the diseases under field conditions. Two kinds of bacterial diseases caused by Pseudomonas glycinea and Xanthomonas phaseoli var. sljense were found from surveyed areas in Kore. Wild fire disease on soybean caused by Pseudomonas tabaci had not detectable during the experiment although there were several reports on the disease from other countries. when the pathogens were introduced into sterile soil, bacterial leaf blight pathogen could exsisted until 30 days while bacterial pustule pathogen survived only 4 days under the natural conditions of later June. Both bacteria, however, could produce the disease after more than 10 months period of storage in refrigerator when they were exsisted in infected plant tissues. In warehouse, non-temperature controlled, the bacteria lose their infectability within 6 months period from October to April even though they exsisted in infected tissues. Surface infested seeds with the pathogens could not produced the diseases on seedling stages of soybean plants when the seeds were planted in sterile soil after inoculation by dipping the seeds into bacterial suspensions, although germination was depressed by the pathogens when the seeds were planted on agar media.
Xanthomonas oryzae pv. oryzae, causal agent of bacterial leaf blight (BLB) of rice, had been collected and identified using Biolog and fatty acid analysis. Epidemics of BLB had been occurred all the times at several rice cultivating areas in Korea in 1999-2004. Most X. oryzae pv. oryzae isolated in 1999 and 2002 belonged to Korean race K1, but more than 50% of the pathogen isolated in 2003 belonged to Korean race K3. Especially, most pathogens isolated in Jeonnam and Joenbuk provinces belonged to Korean race K3. Inoculation test of near isogenic lines (NIL) of rice carrying single resistance genes against BLB showed that many isolates belonging to Korean race 1 reacted differently to diverse resistant monogenic lines of rice. Southern blot analysis also showed that the bacterial pathogens belonged to the same race had different numbers of avirulence genes. This results suggested that each Korean race type may respond to many resistance genes of rice. All the K3 races isolated in Jeonnam and Joenbuk provinces were able to cause disease on Xa3 monogenic lines of rice. Since most rice cultivars cultivated in Jeonnam and Jeonbuk were carrying Xa3 resistance genes, the bacterial pathogens isolated in Jeonnam and Jeonbuk were likely to develop to adapt to Xa3 resistance gene. Together with avirulence gene patterns of the bacterial isolates and the results of disease reaction of monogenic lines of rice to them, Korean X. oryzae pv. oryzae was classified into 19 pathotypes. This newly classified pathotypes should help the breeding of new resistance rice cultivars in Korea.
Bacterial leaf blight (BLB) caused by Xanthomonas oryzae pv. oryzae (Xoo) is a very serious disease in rice growing regions of the world. There are no effective ways of protecting rice from the disease. In this study, the bacteriophage (phage) mixtures infecting Xoo were investigated as biological control agent on BLB. The effects of pH, heat and ultraviolet on the stability of phages were investigated to check and increase the possibility of practical use in the field. Phages were rather stable between pH 5 and pH 10. The infectivity dropped sharply when the phages were incubated at $50^{\circ}C$ and more than 90% of the phages were inactivated after two minutes of ultraviolet treatment. The phages were stable for 7 days at the rice plant leaves, and the phages survived 10 times more than other treatments when mixed with skim milk. Although the skim milk increased the stability of the phages, the control efficacy was not effective. However, the phage mixtures reduced the occurrence of BLB when they were treated with Tecloftalam WP or Acibenzolar-S-methyl simultaneously. The results indicated that the Xoo phages could be used as an alternative control method to increase the control efficacy and reduce the use of agrochemicals.
A new primer set was developed for the detection and identification of Xanthomonas oryzae pv. oryzae, the bacterial leaf blight (BLB) pathogen in rice plant. The nucleotide sequence of hpaA gene was determined from X. o. pv. oryzae str. KACC10331, and the sequence information was used to design primers for the application of the polymerase chain reaction (PCR). The nucleotide sequence of hpaA from X. o. pv. oryzae str. KACC 10331 was aligned with those of X. campestris pv. vesicatoria, X. campestris pv. campestris, X. axonopodis pv. citri, and X. axonopodis pv. glycines. Based on these results, a primer set(XOF and XOR) was designed for the specific detection of hpaA in X. o. pv. oryzae. The length of PCR products amplified using the primer set was 534-bp. The PCR product was detected from only X. o. pv. oryzae among other Xanthomonas strains and reference bacteria. This product was used to confirm the conservation of hpaA among Xanthomonas strains by Southern-blotting. Furthermore, PCR amplification with XOF and XOR was used to detect the pathogen in an artificially infected leaf. The sensitivity of PCR detection in the pure culture suspension was also determined. This PCR-based detection methods will be a useful method for the detection and identification of X. o. pv. oryzae as well as disease forecasting.
This study was initiated to evaluate the qualitative characteristics of creeping bentgrass(Agrostis palustris Huds.) cultivars for the climate In Korea through the NTEP(Nat'l Turfgrass Evaluation Program) data. 'L-93' showed the highest rating in overall mean visual quality. It was also the most prominent cultivar in seedling vigors, ground cover, and genetic color especially in summer. In case of turf texture, 'Penn A-1' and 'A-2' were the finest group, but the poorest group in cold tolerance. Leaf density and thatch accumulation were lower with 'Penncross', 'Pennlinks', 'Crenshaw', and 'L-93' as compared with 'Penn A'-type and 'G'-type cultivars. Resistance to moss invasion was greater with 'Penn A'-type and 'G'-type cultivars, but 'Penncross' was the least. These observations indicated that leaf density was considered to associate with the characters of turf quality, thatch accumulation and resistance to moss invasion. 'Penn A'-type cultivars were highly resistant to snow mold. Greater resistance to brown patch was associated with 'Penn A' and 'Penncross'. Higher resistance to pythium blight was found with 'Penncross' and 'Pennlinks'. 'L-93' showed higher resistance to dollar spot, but not to pythium. Therefore, these results demonstrated that turf maintenance program for the new bentgrass cultivars should be different from a conventional management for the cultivar of 'Penncross'.
The non infecting, plant associated bacteria have attracted increased attention for stimulating plant growth and as environmental friendly plant protecting agents. Pink-pigmented facultatively methylotrophic bacteria (PPFMs), classified as Methylobacterium spp., are persistent colonizers of plant leaf surfaces. As the leaves of most or all plants harbor PPFMs that utilize leaf methanol as their sole source of carbon and energy, which is a specific attribute of the genus Methylobacterium. Although they are not well known, these bacteria are co-evolved, interacting partners in plant metabolism. This claim is supported, for example, by the following observations: (1) PPFMs are seed-transmitted, (2) PPFMs are frequently found in putatively axenic cell cultures, (3) Low numbers of seed-borne PPFMs correlate with low germinability, (4) Plants with reduced numbers of PPFM show elevated shoot/root ratios, (5) Foliar application of PPFMs to soybean during pod fill enhances seed set and yield, (6) Liverwort tissue in culture requires PPFM-produced vitamin B12 for growth, (7) treated plants to suppress or decrease disease incidence of sheath blight caused by Rhizoctonia solani in rice, and (8) the PPFM inoculation induced number of stomata, chlorophyll concentration and malic acid content, they led to increased photosynthetic activity. Methylobacterium spp. are bacterial symbionts of plants, shown previously to participate in plant metabolism by consuming plant waste products and producing metabolites useful to the plant. There are reports that inform about the beneficial interactions between this group of bacteria and plants. Screening of such kind of bacteria having immense plant growth promoting activities like nitrogen fixation, phytohormone production, alleviating water stress to the plants can be successfully isolated and characterized and integration of such kind of organism in crop production will lead to increased productivity.
'Goamibyeo', a mid-late maturing ecotype with high amylose content in kernels, was developed by the rice breeding team of National Yeongnam Agricultural Experiment Station(NYAES) in 2000 and released in 2001. This variety was derived from the three way cross of Milyang 95//Kimcheonaengmi/$2^*Ilpumbyeo$ (in 1992 summer) through the pedigree breeding method and designated as 'Milyang 168' in 1997. The heading date of 'Goamibyeo' was Aug. 18 in ordinary season with culm length of 85 cm. However, 'Goamibyeo' showed susceptible to bacterial leaf blight, stripe virus and leaf blast disease. The amylose content of 'Goamibyeo' in milled rice kernels is about 26.7% with translucent and clear in chalkness. Thus, 'Goamibyeo' is expected to be used as a source grain for rice noodle industries. The milled rice yield potential of 'Goamibyeo' is about 5.38 MT/ha in local adaptability test of three years and it would be adaptable to Yeongnam plain of Korea.
To examine the relationship between air pollution and occurrence of disease in plants, we investigated the alteration of physiology and biochemistry of Ginkgo biloba by inoculating with Coniothyrium sp. and fumigating with 0.1 ${\mu}l/l\;SO_{2-}$ Visual damage did not appear but photosynthesis, $CO_2$ use efficiency(CUE) and water use efficiency(WUE) were reduced when G. biloba was exposed to $SO_{2-}$for 7days (8 hours a day). When inoculated with Coniothyrium sp., the seventies of damage in G. biloba showed a threefold difference between $SO_{2-}$ treatment (SI) and $SO_{2-}$ free treatment (SFI) at day 42 from initial inoculation. Little difference was observed in sugar contents that may be used pathogens feed, among control, SFI and SI. In spite of the reduction in photosynthetic rate, sugar contents and CUE were maintained. WUE was enhanced 13% more at SI than SFI. The $CO_2$fixation boosted because of enhanced WUE, and thus sugar synthesis was not affected. In addition, sugar transport seems to be retarded for some internal alteration. Consequently, the severity of SI was more serious than that of SFI because Coniothyrium sp. easily invades into the physical texture of G. biloba weakened by $SO_2$ fumigation and because sugar was accumulated in leaves of G. biloba.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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