• 한국식품위생안전성학회지
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• 제35권3호
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• pp.213-218
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• 2020

본 연구는 건강기능식품 호로파종자식이섬유 중 4-hydroxyL-isoleucine에 대한 분석법을 개발하는 연구이다. 최적분석 조건을 확립하기 위해 시료 채취량, 전처리 용매 및 이동상 용매 조건을 비교 검토하였으며, HPLC-PDA를 이용하여 시료 중의 4-hydroxy-L-isoleucine를 분석하였다. 분석 시 사용한 컬럼은 Capcell Pack UG120 C₁₈ (Shiseido, 4.6×250 mm, 5 ㎛)이며, 유도체 시약으로 OPA를 선정하였다. 확립된 시험법에 대해 특이성, 직선성, 검출한계, 정량한계, 정확성, 정밀성 등의 밸리데이션을 수행하였다. 5-100 ㎍/mL 농도에서 결정계수(R²) 0.999 이상으로 높은 직선성을 확인하였다. 또한, 회수율은 91.7-96.4%이었고, 정밀성은 0.5-1.1%의 상대표준편차(%RSD)를 확인하였다. 개발된 시험법은 호로파종자추출물 중 4-hydroxy-L-isoleucine 분석을 위한 시험법으로 활용되기에 적합한 것으로 판단된다.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제14권1호
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• pp.70-76
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• 2001

This experiment was conducted to investigate the effects of crystalline isoleucine supplementation of a low protein, corn-soybean meal diet on the performance and immune function of weanling pigs. Forty-five crossbred ($Duroc{\times}Landrace{\times}Large\;White$) piglets, weighing an average of $11.00{\pm}0.07kg$, were assigned to either a control diet containing 20% crude protein (0.64% isoleucine), a 16% crude protein diet without isoleucine supplementation (0.41% isoleucine) or a 16% crude protein diet supplemented with isoleucine (0.64% isoleucine). Reducing the crude protein content of the diet from 20 to 16% significantly (p<0.05) reduced both average daily gain and feed intake. Feed conversion also tended (p=0.07) to be poorer for a low protein diet without isoleucine supplementation. Isoleucine supplementation of the 16% crude protein diet increased both gain and feed intake to a level similar to that obtained by pigs fed the 20% crude protein diet (p>0.05). Blood urea nitrogen, serum total protein and serum globulin were significantly (p<0.05) higher for pigs fed the unsupplemented 16% crude protein diet than for pigs fed the isoleucine-supplemented diet or the control. Egg albumin antibody titre decreased significantly (p<0.05) in pigs fed the diet with isoleucine supplementation, whereas the antibody titre of pigs fed the low protein and low isoleucine diet was similar to that of pigs fed the diet containing 20% crude protein and 0.64% isoleucine. It was suggested that crystalline isoleucine supplementation of a low protein and low isoleucine diet improved pig performance but suppressed humoral immune function.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제26권4호
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• pp.523-528
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• 2013

This study investigates the effects of three branched-chain amino acids (BCAA; valine, leucine, and isoleucine) on the in vitro ruminal fermentation of wheat straw using batch cultures of mixed ruminal microorganisms. BCAA were added to the buffered ruminal fluid at a concentration of 0, 2, 4, 7, or 10 mmol/L. After 72 h of anaerobic incubation, pH, volatile fatty acids (VFA), and ammonia nitrogen ($NH_3$-N) in the ruminal fluid were determined. Dry matter (DM) and neutral detergent fiber (NDF) degradability were calculated after determining the DM and NDF in the original material and in the residue after incubation. The addition of valine, leucine, or isoleucine increased the total VFA yields ($p{\leq}0.001$). However, the total VFA yields did not increase with the increase of BCAA supplement level. Total branched-chain VFA yields linearly increased as the supplemental amount of BCAA increased (p<0.001). The molar proportions of acetate and propionate decreased, whereas that of butyrate increased with the addition of valine and isoleucine (p<0.05). Moreover, the proportions of propionate and butyrate decreased (p<0.01) with the addition of leucine. Meanwhile, the molar proportions of isobutyrate were increased and linearly decreased (p<0.001) by valine and leucine, respectively. The addition of leucine or isoleucine resulted in a linear (p<0.001) increase in the molar proportions of isovalerate. The degradability of NDF achieved the maximum when valine or isoleucine was added at 2 mmol/L. The results suggest that low concentrations of BCAA (2 mmol/L) allow more efficient regulation of ruminal fermentation in vitro, as indicated by higher VFA yield and NDF degradability. Therefore, the optimum initial dose of BCAA for in vitro ruminal fermentation is 2 mmol/L.

• Journal of Nutrition and Health
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• 제4권4호
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• pp.39-46
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• 1971

Iso-butyl bromide의 합성을 시작으로 D.L-1-amino-3-methylbutylphosphonic acid의 합성을, Diethyl phophite의 합성을 시작으로 D.L-1-amino-2-phenyl ethylphosphonic acid의 합성을 하였다. 합성되어진 필수 아미노산인 Isoleucine analogue phosphonic acid는 각각 0.2%, 0.4%를 식이에 첨가했고 Phenylalanine analogue phosphonic acid는 0.35%와 0.7%를 각각 첨가하였으며 Standard-1과 Standard-2군과 비교군인 Isoleucine 0.2%와 0.4% Phenylalanine 0.35%와 0.7%군으로써 총 100마리의 숫쥐로 각 7주씩 14주의 사육 실험을 하였다. 동물 사육 기간내의 뇨채취와 사육후의 각 장기의 채취로써 총 질소와 P, glycogen측정을 시도하였다. 이러한 일련의 실험결과 (1) D.L-1-amino-3-methylbuthylphosphonic acid나D.L-1-amino-2-phenylethylphosphonic acid의 유기 합성에 있어서는 다 수율이 낮고 상당히 높은 융점을 보였으며 ${\alpha}-NH_2$기가 Ninhydrin 반응에 예민했다. (2) Aminophosphonic acid의 첨가군(D.L-1-amino-3-methylbutyl phosphonic acid, D.L-1-amino-2-Phenylethylphosphonic acid)에서나 Amino acid(Isoleucine, Phenylalanine)첨가군에 있어서 모든 장기의 무게, 총체내질소 보유율, 간장내 총단백질량과 인의양, 및 뇨를 통한 인의 배설량에 각각 큰 차이를 보이지 않았다. 이로 보아서 Phenylalanine Aminophosphonic acid나 Isoleucine aminophosphonic acid가 다 보통 아미노산인 Isoleucine이나 Phenylalanine에 못지않게 체내에서 이용됨이 밝혀졌다. (3) 그러나 Phenylalanine aminophosphonic acid 첨가군이 간의 glycogen 함량에 있어서 Phenylalanine 첨가군과 Standard군과 비교해 보았을때 높았으며 이는 통계적인 유의성을 나타냈다.(<0.05) 이는 Phenylalanine Aminophosphonic Acid가 active state로써 간내에서 쉽게 이용되어서 Tricarboxylic cycle의 intermediate로 incorporate되는 경향으로 생각 할 수 있다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제16권4호
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• pp.251-261
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• 1987

본(本) 실험(實驗)은 세균(細菌)에 의한 L-threonine의 효율적인 생성(生成)을 검토할 목적(目的)으로 Brevibacterium flavum ATCC 14067을 사용하여 L-threonine 생성능(生成能)이 우수한 균수(菌株)를 선발(選拔)하기 위해 변이원인 N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (NTG)로 처리하여 돌연변이주(突然變異株)를 유도(誘導)한 후(後), 다시 methionine 영양요구주, lysine 영양요구주, isoleucine 영양요구주, lysine 영양요구주, isoleucine 영양요구주, methionine 및 isoleucine 영양요구주를 선발(選拔)하였다. 또한 선발(選拔)된 영양요구성 변이주들 중에서 L-threonine 생성능(生成能)이 원균(原菌)에 비(比)해 $3{\sim}4$배(倍)정도 우수한 B-13균주(菌株)$(met^-)$를 선발(選拔)하여 L-threonine 생성력(生成力), 배지(培地) 조성(組成) 및 배양(培養)에 따른 몇가지 요인(要因)들에 대하여 실험한 결과 다음과 같은 결과(結果)를 얻었다. 1. L-threonine생성량은 원균주가 1.4mg/ml에 비해 methionine 영양요구성 변이주인 B-13은 4.86mg/ml로서 약 3.5배(倍)의 높은 생성량을 나타내었다. 2. B-13에 의한 L-threonine 생성(生成)에 적당한 배지조성(培地組成)은 glucose 10%, ammonium sulfate 2%, potassium phosphate monobasic 0.2%, magnesium sulfate 0.05%, biotin $200{\mu}g/l$ thiamine $300{\mu}g/l$이였으며 nicotinic acid 0.05% 첨가시 더욱 증가 되었다. 3. B-13에 있어서 유기영양원에 대한 효과는 yeast extract와 Peptone이 양호하였으며 영양요구물질인 metionine은 $100{\mu}g/ml$가 적당하였으며 aspartic acid와 homoserine 첨가시 L-threonine 생성이 증가되었으며 lysine 첨가시에는 감소하는 경향이 나타났다. 4. B-13에 의한 L-threonine 생성에 가장 적절한 pH는 $7.0{\sim}8.0$이였으며 배양일수(培養日數)는 4일(日)이 적당하였다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제19권6호
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• pp.583-587
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• 1991

대장균 W3110으로부터 NTG 및 UV를 사용하여 여러 단계의 돌연변이 실험을 거치면서 스레오닌 고생산균주인 대장균 TF427를 선별하였다. 선별된 변이주는 스레오닌 유사체인 AHV 내성, 메치오닌 및 이소루이신 요구성을 특징으로 한다. 5-L 발효조 실험에서 44시간 발효하였을 때 46.5g/l의 스레오닌이 생산되었다. 효모분석에 의하면, TF427의 아스파토키나아제 I의 활성은 스레오닌에 의해 저해받지 않았으며, 이 효소의 합성은 스레오닌과 이소루이신에 의해 억제를 받지 않았다.

• Journal of Nutrition and Health
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• 제12권1호
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• pp.31-41
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• 1979

Free amino acid in ethanol extracts and total amino acids in hydrolysates of eleven species of edible mushrooms were analyzed and determinated the contents five kind of new amino acid by means of amino acid autoanalyzer and gas liquid chromatography. The result obtained from this study are as follows. 1) Five kind of new amino acid turned out to be ${\alpha}$-aminobutyric acid, allo-isoleucine, ethanolamine, $\gamma$-aminobutyric acid and ornithine. 2) By means of amino acid autoanalyzer, the monoethanolamine was identified on the chromatogram ahead of alanine, ${\alpha}$-aminobutyric acid between peak of threonine and glycine, allo-isoeleucine between peak of valine and leucine, isoleucine, ${\gamma}$-aminobutyric acid followed by proline between peak of leucine, isoleucine and methionine and ornithine between peak of phenylalanine and tyrosine 3) By means of Gas liquid chromatography, the ${\alpha}$-aminobutyric acid was identified on the chromatogram between peaks of alanine and valine, allo-isoleucine between peaks of methionine and isoleucine, monoethanolamine followed by ${\gamma}$-aminobutyric acid between peaks of phenylalanine and ammonia, ornithine between the peaks of ammonia and lysine. 4) Of five amino acids which were identified, ornithine was the highest of its content in the mushroom extracts, and allo-isoleucine, ethanolamine, and ${\gamma}$-aminobutyric acid came next in decreasing order. 5) Also which were identified, ornithine was the highest of its content in the hydrolysates, and ${\alpha}$-aminobutyric acid, ${\gamma}$-aminobutyric acid, allo-isoleucine came next in decreasing order, ethanol extracts and hydrolysates of Auriculariaauricula-Judae(Fr.) $Qu\acute{e}l$ species didn't contain any of five kind of new amino acid. Ornithine also was the highest in the hydrolysates of ll mushrooms.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제24권3호
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• pp.327-330
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• 1996

An amino acid antimetabolite named YS-460 was isolated from the culture filtrate of a newly isolated Actinomycetes identified as Streptomyces sp. Fermentation was carried out in the synthetic medium at 30$\circ$C for 5 days. Purification was done by ion exchange resin, active carbon, silica gel column chromatography and obtained 38 mg of pure active substance per liter of the broth. YS-460, an amino acid like substance, has the molecular formula of C$_{7}$H$_{11}$NO$_{3}$- Its structure determined to be furanomycin by spectral analysis. It is active against some bacteria on a chemically defined medium and reversed competitively by L-isoleucine and non-competitively by L-leucine and L-valine.

• 미생물학회지
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• 제54권1호
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• pp.9-17
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• 2018

저온 환경에서의 생장에 영향을 주는 지방산 합성 관련 유전자 bkdR, sigL, yplP, des들의 역할을 알아보기 위하여 각각 유전자들이 상실된 Bacillus subtilis CU1065와 JH642 돌연변이들을 제조하였다. 이들 유전자들의 저온 민감성을 확인하기 위해 $37^{\circ}C$와 $15^{\circ}C$에서 세포들의 생장을 측정하였다. $37^{\circ}C$에서 야생형과 결실 돌연변이 균주는 거의 유사한 정도의 생장을 보였으나, $15^{\circ}C$에서 오직bkdR 결실 돌연변이만이 야생형에 비해 매우 느린 생장이 관찰되었으며 sigL, yplP 결실의 경우 야생형에 비해 다소 느리거나 유사한 생장을 보였다. bkdR, sigL, yplP 결실에 대한 이중, 삼중 돌연변이를 만들어 LB agar에서 $20^{\circ}C$로 키워 저온생장을 조사한 결과, bkdR 결실이 포함되지 않은 어떤 이중, 삼중 결실들에서는 저온에 민감한 생장을 보이지 않았다. 온도 민감성 특성을 보다 잘 알아보기 위하여 $37^{\circ}C$에서 $OD_{600}=0.4$까지 키워 $15^{\circ}C$로 온도를 내리는 저온충격 조건에서 생장하는 실험을 진행하였다. 이 실험에서 오직bkdR 결실 돌연변이만이 현저히 낮은 생장을 보였으며 추가적인 des 결실은 저온 민감성을 증가시킨다. bkdR은 branched-chain fatty acid을 합성하는 전구물질인 isoleucine, valine, leucine 아미노산을 생산하는 bkd operon을 활성화한다. bkdR 결실 돌연변이의 저온생장에서 이들 아미노산의 저온생장에 미치는 영향을 조사한 결과 isoleucine은 bkdR 결실에 대한 저온 민감성을 회복시켜주나 valine은 저온 민감성을 회복시켜 주지 못하는 결과를 보였다. isoleucine은 분해되어 anteiso-branched 지방산 합성의 전구물질로 만들어지는 반면에, valine은 iso-branched 지방산 합성의 전구물질로 만들어진다. 따라서 저온생장에서 branched-chain fatty acid 중 anteiso-branched 지방산이 중요한 역할을 하고 있음을 알 수 있었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제20권1호
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• pp.85-90
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• 1992

Saccharomyces속 효모를 사용하여 미강을 배지로 하여 에탄올을 발효특성을 조사하였다. 액화효소와 당화효소를 전처리한 미강에서 여러 Saccharomyces속 효모들을 배양한 결과 Saccharomyces cerevisiae IFO 2346이 높은 에탄올 생성 및 유리아미노산 함량을 나타내었다. 균체성장은 발효 24시간에 $3\times 10^8$cell/ml로 증가하였으며, 발효 72시간후 4.7의 에탄올을 생성하였다. 유리아미노산 총량은 발효과정중 1,099mg/l에서 829mg/l로 감소하였으나, glutamic acid, histidine 및 isoleucine은 오히려 각각 218%, 31%5 및 1%48로 증가하였다.