The inulin fructotransferse (depolymerizing) (IFTase, EC 2.4.1.93) gene of Arthrobacter sp. A-6 was cloned and expressed in Escherichia coli and Bacillus subtilis. The IFTase gene consisted of an ORF of 1.311 nucleotides encoding a polypeptide of 436 amino acids containing a signal peptide of 31 amino acids in the N-terminus. The molecular mass of the IFTase based on the nucleotide sequence was calculated to be 46.116 Da. The recombinant E. coli $DH5{\alpha}$ cells expressing the Arthrobacter sp. A-6 IFTase gene produced most of the IFTase intracelularly. In contrast, the recombinant B. subtilis DB 104 carrying the IFTas gene on a B. subtilis-E. Coli expression vector secreted the IFTase into the culture fluid efficiently.
The analysis of Jerusalem artichoke showed that it contains 12.09% of Inulin. The results obtained from the examination of the conditions for fructose production by cultivating Pencillum sp 1 in the Jerusalem articoke medium were as follows: 1. The optimum amount of water added to Jerusalem artichoke was 2.5 $\ell$ of distilled water per ㎏ of fresh Jerusalem artichoke. It this case, the concentration of Inulin was 4% (w/v). 2. The optimum temperature was $30^{\circ}C$, the initial optimum pH was 5.0 and the optimum cultural period was 72 hours. 3. Shaking culture with 50 ml of the medium and 120 oscills/min in 500 ml shaking flask was most effective as the culture method. 4. 0.1% of $NH_4H_2PO_4$ as a nitrogen source, 0.001 of $FeSO_47H_20$ and 0.001% of $MgSO_47H_2$ as metal salts were most effective. 5. Fructose production continued to increase for 72 hours under the optimum conditions for cultivation and the highest production rate to the Inulin was 95.25%.
The composition of soluble neutral carbohydrates in jerusalem artichoke tubers was measured and compared according to harvest dates and storage temperatures using HPLC. The breakdown of inulin $({\ge}GF8)$ into sucrose and fructo-oligosaccharides (GF2-GF7) was highest on November just after cold-shock. The composition of sucrose and fructo-oligosaccharides on March was much higher than that on September of previous year. Inulin $({\ge}GF8)$ proportion decreased from 66.4% to 33.1% but the proportion of fructo-oligosaccharides (GF2-GF7) and sucrose increased from 25% to 61% and from 3.4% to 13.6%, respectively. The storage at a low temperature $(4^{\circ}C)$ for 34 days increased the composition as well. However, the amount of fructo-oligosaccharides was decreased when the tubers harvested in March were stored at high temperature $(25^{\circ}C{\sim}40^{\circ}C)$. For the maximam yield of fructo-oligosaccharides in jerusalem artichoke, it is concluded that the tubers be harvested in March and/or stored at the low temperature.
Forty-six Streptococci were isolated from human dental plaque. Each isolated from a different person, and their morphological and physiological characteristics investigated. It was found that the isolated micro-organisms 1. Most found that the isolated micro-organisms 2. Acid produced from maltose, inulin, manitol, sorbitol, lactose, mannose, 3. In the sucrose broth, most of them formed gelatinous clusters adhearing to the wall of the tube.
Jo, Yeon-Jeong;Sinha, Jayanta;Park, Jong-Pil;Yun, Jong-Won
한국생물공학회:학술대회논문집
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2000.11a
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pp.587-589
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2000
The production of inulooligosaccharides from inulin by a dual endoinulinase system of Pseudomonas sp and Xanthomonas sp. was investigated the optimum conditions for a dual endoinulinase reaction were as follows : pH,5.8; temperature, $50^{\circ}C$; substrate concentration, 50 g/l; enzyme ratio, 3:1 as Xanthomonas endoinulinase to Pseudomonas endoinulinase. Under optimum conditions, the maximum yield of oligosaccharides was 90.5% in total sugar basis by dual endoinulinase system
The effect and osmotic characteristics of sugars for the growth of Saccharomyces rouxii $T_9$ were examined and their results obtained were as follows. (1) The best effective sugars for the growth of Saccharomyces rouxii $T_9$ were inulin, fructose and maltose. (2) Glucose, saccharose, galactose and arabinose were more effective on the media containing 20 percent of NaCl than containing none of NaCl, while fructose, inulin, xylose, sorbitol, raffinose, mannitol, mannose, trehalose and rhamnose were more effective on the media containing none of NaCl. (3) Maltose and lactose were excellent for the growth of Saccharomyces rouxii $T_9$ as addition of 5 to 10 percent on the media containing NaCl and more good in case of 15 percent or more addition on the media containing none of NaCl. (4) Saccharomyces rouxii $T_9$ was generally grown well on the media at the range of containing 15 to 30 percent of sugar concentration. (5) Saccharomyces rouxii $T_9$ was grown up to 80 percent concentration of glucose and 90 of saccharose and maltose.
Drought is more concerned to be a huge problem for agriculture as it affects plant growth and yield. Endophytic bacteria act as plant growth promoting bacteria that have roles for improving plant growth under stress conditions. The properties of four strains of endophytic bacteria were determined under water deficit medium with 20% polyethylene glycol. Bacillus aquimaris strain 3.13 showed high 1-aminocyclopropane-1-carboxylate (ACC) deaminase production; Micrococcus luteus strain 4.43 produced indole acetic acid (IAA). Exopolysaccharide production was high in Bacillus methylotrophicus strain 5.18 while Bacillus sp. strain 5.2 did not show major properties for drought response. Inoculation of endophytic bacteria into plants, strain 3.13 and 4.43 increased height, shoot and root weight, root length, root diameter, root volume, root area and root surface of Jerusalem artichoke grown under water limitation, clearly shown in water supply at 1/3 of available water. These increases were caused by bacteria ACC deaminase and IAA production; moreover, strain 4.43 boosted leaf area and chlorophyll levels, leading to increased photosynthesis under drought at 60 days of planting. The harvest index was high in the treatment with strain 4.43 and 3.13 under 1/3 of available water, promoting tuber numbers and tuber weight. Inulin content was unchanged in the control between well-watered and drought conditions. In comparison, inulin levels were higher in the endophytic bacteria treatment under both conditions, although yields dipped under drought. Thus, the endophytic bacteria promoted in plant growth and yield under drought; they had outstanding function in the enhancement of inulin content under well-watered condition.
A bacterial strain producing a novel endo-inulinase, hydrolysing inulin into oligosaccharides was isolated from soil and identified as Arthrobacter sp. S37 The enzyme production was induced by inulin and jerusalem artichoke extract. The maximum enzyme production was obtained with medium containing 1.5% jerusalem artichoke extract, 1.0% yeast extract, $0.5%\;NaNO_3,\;0.05%\;MgSO_4{\cdot}7H_2O,\;0.05%\;KCl,\;0.0016%\;FeCl_3{\cdot}6H_2O\;and\;0.05%\;KH_2PO_4$. The optimum temperature and pH for the enzyme production were $30^{\circ}C$ and 8.0, respectively. Under the optimum condition, the enzyme activity in the culture broth reached at maximum, 10.8 units/ml after cultivation for 24 hours.
The use of Jerusalem artichoke containing $\beta$-1, 2-fructose oligomer in the production of sorbitol that is used as food additives and precursor for the L-sorbose has been studied. Coimmobilization of both inulinase and oxidoreductase was considered for the simultaneous reaction for hydrolysis of inulin and conversion of glucose and fructose liberated from inulin to sorbitol. Both inulinase and oxidoreductase were immobilized in chitin(5%, w/v) and K-carrageenan(4%, w/v), The activity of oxidoreductase was specified by permeabilization of Zymomonas mobilis cell with 0.2% CTAB(Cetyltrimethylammonlumbromide). The use of inulinase for hydrolysis of inulin resulted in 36.65g/l of glucose and 85.32g/1 of fructose respectively. These are valuable substrates for sorbitol production. Using these hydrolyzates, accumulation of 35.64g/l for sorbitol occurred at $38^{\circ}C$ and pH6.2. When permeabilized cells and inulinase were coimmobilized, sorbitol produced at 30.15g/l although it is low compared with 35.64g/l in separated reactor system.
Endoinulase from Streptomyces sp. S56 was immobilized by adsorption on DEAE-cellulose in 0.01 M citrate-sodium phosphate buffer, pH 6.0 and the properties of immobilized and free enzymes were investigated. The immobilized enzyme preparation, having 40 inulase activity units per dried matrix, revealed the maximal activity at $pH\;4.5{\sim}5.5$ and $55{\sim}60^{\circ}C$ and were most stable at pH 6 and 45^{\circ}C$. The immobilization caused a drop in optimum pH and affinity toward inulin, a slight increase in optimum temperature, an important increase in thermal stability and maximum reaction velocity. The immobilized endoinulase hydrolyzed the tuber extract of jerusalem artichoke and inulin, mainly into fructose and inulobise, degrading 63 and 78% of the total sugar respectively, within 48 hrs in batch reactor.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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