Recent in vitro studies have demonstrated that extract of soft coral Dendronephthya gigantea (SCDE) had strong anti-inflammatory activities. However, the direct effects of SCDE on anti-inflammatory activities in vivo model remained to be determined. Therefore, the present study was designed to assess in vivo anti-inflammatory effect of SCDE using lipopolysaccharide (LPS)-stimulated zebrafish model. We also investigated whether SCDE has toxic effects in zebrafish model. The survival, heart beat rate, and developmental abnormalities were no significant change in the zebrafish embryos exposed to at a concentration below $100{\mu}g/ml$ of SCDE. However, lethal toxicity was caused after exposure to 200 and $400{\mu}g/ml$ of SCDE. Treating zebrafish model with LPS treatment significantly increased the reactive oxygen species (ROS) and nitric oxide (NO) generation. However, SCDE inhibited this LPS-stimulated ROS and NO generation in a dose-dependent manner. These results show that SCDE alleviated inflammation by inhibiting the ROS and NO generation induced by LPS treatment. In addition, SCDE has a protective effect against the cell damage induced by LPS exposure in zebrafish embryos. This outcome could explain the profound anti-inflammatory effect of SCDE both in vitro as well as in vivo, suggesting that the SCDE might be a strong anti-inflammatory agent.
본 실험은 생물반응기를 이용한 딸기 조직배양묘 대량증식 시 flurprimidol 을 처리하여 순화율을 향상시키고자 실시하였다. Flurprimidol 을 0, 0.1, 0.5, 1.0 및 $2.0mg{\cdot}L^{-1}$의 농도로 6주동안 처리하여 생육조사한 결과, flurprimidol을 첨가한 처리구의 생장량이 대조에 비해 감소하였고, 처리농도가 증가할수록 생장억제효과가 크게 나타났다. 초장은 대조가 7.9cm인 것에 비해 flurprimidol 처리는 2.2-3.7cm 범위로 매우 짧아졌다. 뿌리수는 대조가 51.8개/주에 비해 flurprimidol 처리가 11.6-34.2개/주 범위로 감소하였다. 뿌리길이는 대조가 4.36cm에 비해 flurprimidol 처리는 0.88-3.08cm 범위로 크게 짧아졌다. 그러나 액아수는 flurprimidol $2.0mg{\cdot}L^{-1}$ 처리를 제외하고 모든 처리구에서 대조의 8.6개/주에 비해 많이 발생하였을 뿐만 아니라 액아수가 증가할수록 그에 따라 잎수도 증가하였다. Flurprimidol $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ 처리 시 뿌리가 부패하여 지하부 발달이 불량하였다. Flurprimidol $1.0mg{\cdot}L^{-1}$와 $2.0mg{\cdot}L^{-1}$ 처리를 제외한 모든 처리의 순화율은 100%로 대조에 비해 23.3% 향상되었다. 순화 4주 후, flurprimidol $0.1mg{\cdot}L^{-1}$ 처리는 생체중을 제외한 지상부 및 지하부 생육이 대조와 비슷하게 회복되었다. 따라서 생물반응기를 이용한 딸기의 조직배양묘 대량 증식 시 순화율 향상을 위한 적정 flurprimidol 농도는 $0.1mg{\cdot}L^{-1}$였다.
이 실험에서 우리는 얌의 기내 비대근 유도와 순화에 영향을 미치는 탄소급원의 효과를 연구하였다. 첫 번째로 기내 비대근 유도를 위한 탄소원의 종류와 농도의 효과를 실험하였다. 7% sucrose처리에서 기내 비대근 유도 효율이 가장 높았으며, glucose처리에서는 기내비대근이 형성되지 않았다. 두 번째로 기내식물체의 순화 후 생존율과 비대근 형성율을 실험하였다. 순화 후 형성된 비대근의 직경(6.1 mm)과 생중량(0.5 g)은 7% sucrose에서 생육한 기내식물체에서 가장 높았다. 저농도(3%)의 sucrose처리에서 생육한 기내식물체의 순화 후 생존율은 100%였으나 식물체의 생육과 발달이 억제되었다. 이러한 결과는 얌의 기내 비대근 형성과 순화를 위해 7% sucrose처리가 적정하며 이러한 기술은 얌의 바이러스 및 병 저항성 클론과 우수 개체의 번식을 위해 적용이 가능하다.
본 연구에서는 단 삼(Salvia miltiorrhiza)의 추출물이 인체 결장암세포인 HT-29, 간암세포인 HepG2 및 직장 암세포인 HRT-18의 증식에 미치는 영향을 in vitro에서 확인하였다. 암세포의 배양액에서 단삼의 수용성 추출물과 에탄올 추출물의 암세포 증식억제효과는 농도에 비례하여 에탄올 추출물에서 더 효과적이었다. 이를 토대로 단삼의 에탄올 추출물의 급성독성, 수명연장 및 고형암형 성억제를 살펴보기 위해 in vivo 실험을 하였다. 급성독성실험결과 대조군의 15일 째의 평균체중은 32.3 g 이었고 실험군은 31.6 g으로 정상적인 상태를 유지하였으며, 흰쥐의 육종암세포인 sarcoma-180를 접종한 mouse의 수명연장실험결과 대조군에 비해 61%의 수 명연장 효과가 있음을 관찰하였다. 고형암억제 실험 결과에서도 대조군에 비해 에찬올 추출 물 처리군이 35%의 고형암 형성억제능을 나타내었다. 따라서 단삼의 에탄올 추출물 중에는 in vitro와 in vivo 실험을 통해 항암활성을 갖는 성분이 존재하며, 이성분은 유효한 항암제 로 개발될 수 있으리라 사료된다.
Zygotic embryo culture was performed to propagate evergreen oak, Quercus myrsinifolia, which has recalcitrant seeds and is difficult to propagate by cuttings. Zygotic embryos appeared in WPM medium after 14 days, and after 56 days, they developed into complete plants with cotyledons and roots. The medium suitable for zygotic embryo culture was 1/4 WPM medium, showing a shoot growth of 2.43 cm and root growth of 8.7 cm after 8 weeks of culture. As a result of investigating the effect of GA3 on the growth of plants germinated from zygotic embryos through GA3 treatment, the best growth was shown in 0.5 mg/l GA3 treatment. The in vitro rooting and growth of IBA-treated zygotic embryo-derived plants were good in the 0.5 mg/l IBA treatment and rooting and shoot growth were not observed at higher concentrations. And the callus induction rate also increased as the concentration of IBA increased. Plants grown in vitro were transferred to a plastic pot containing artificial soil and acclimatized in a greenhouse for about 4 weeks, resulting in more than 90% survival. As a result of this study, the zygotic embryo culture method was confirmed to be effective for mass propagation of Q. myrsinifolia. The results of this study are expected to contribute significantly to the mass propagation of elite Q. myrsinifolia.
An efficient protocol for in vitro multiple shoot bud induction and plant regeneration from mature green cotyledon derived callus tissues of Acacia sinuata has been developed. Callus formation occurs at all the concentrations of thidiazuron (TDZ) in Murashige and Skoog's (MS) medium, but 0.6 ${\mu}M$ proved to be the best with maximum callus formation frequency. Supplementation of TDZ in combination with indole-acetic acid (IAA) in MS media accelerates shoot bud organogenesis in differentiating callus tissues with 60-70% conversion of shoot buds into shoot Most efficient shoot organogenesis was recorded when TDZ induced calli were subcultured at different concentrations of 6-benzyla-denine (BA). Optimum shoot bud induction and plant regeneration from callus was achieved when 0.6 ${\mu}M$ (TDZ) induced calli were subcultured at 3.0 ${\mu}M$ (BA) where $16.6{\pm}0.74$ shoots/unit callus on obtained. Rooting in in vitro differentiated shoots was achieved when transferred to medium containing different concentration of indole-3-butyric acid (IBA) in full & half strength MS medium. The well rooted plantlets were hardened and transferred to net house with 90% survival rate.
The goal of this research was to develop an efficient cryopreservation protocol for germplasms of yam (Diosorea batatas), that were cultivated in Korea. Comparative studies with four other cryogenic techniques and subsequent experiments for shoot regrowth were conducted. in vitro-grown shoot-apices of the D. batatas were successfully cryopreserved by encapsulation-dehydration. The maximum survival of shoot-apices could be achieved when the precultured (with 0.3 M of sucrose for one day) and encapsulated (with a 3%(w/v) Na-alginate solution) apices were dehydrated for $3.5{\sim}4\;h$ prior to direct immersion in LN (liquid nitrogen). The frequency of regrowth rate of cryopreserved apices was not decreased during 3-month storage period. The thawing method markedly affected survival of the cryopreserved apices, and thawing at $40^{\circ}C$ for 3 min produced the best results. When cryopreserved apices were post-cultured on the post-culture medium (MS), supplemented with $0.2mgl^{-1}$ of BA ($N_6$-benzyladenine) and $0.2mgl^{-1}$ of kinetin, they showed direct shooting without callusing.
Jeong, Mi Jin;Yong, Seong Hyeon;Kim, Do Hyeon;Park, Kwan Been;Kim, Hak Gon;Choi, Pil Son;Choi, Myung Suk
Journal of Plant Biotechnology
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제49권3호
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pp.213-221
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2022
Wild garlic (Allium victorialis var. platyphyllum, AVVP) is a nontimber forest product used as an edible and medicinal vegetable. AVVP is usually propagated form offspring bulbs but it takes a long time to harvest. Using tissue culture technology could overcome this problem. This study investigated the optimal conditions for shoot multiplication, root growth, and plant growth by scooping AVVP bulbs. AVVP bulbs harvested from Ulleung Island, Korea, the main producer of AVVP, were surface-sterilized and used for in vitro propagation. Shoot multiplication was performed by the scooping method. More than five multiple shoots were induced from scooped tissue in Quoirin and Lepoivre (QL) medium containing plant growth regulators (PGRs); the maximum number of multiple shoots were induced from scooped tissue in QL medium containing 0.45 μM thidiazuron (TDZ) after 16 weeks of culture. Roots were induced directly at the base of the shoots in all treatments. In vitro rooting depended on the type of PGRs, and the best root-inducing treatment was QL medium containing 9.84 μM indole-3-butyric acid (IBA). Plants with in vitro roots were transferred to pots containing artificial soil and successfully acclimatized for 4 weeks. The acclimatized plants showed a survival rate of 80% after 20 weeks and gradually promoted growth depending on the acclimatization period. The results of this study will be of great help to AVVP dissemination through sustainable mass propagation.
본 연구는 야생 백하수오를 대상으로 기내증식의 최적 조건을 구명하기 위해 수행되었다. 기내 종자발아를 위하여 야생 백하수오 종자를 $GA_{3}$ 용액(100 ppm)에 24시간 침지처리 후 1.0 mg/L BA가 첨가된 WPM 배지에 치상하였을 때 91.6%의 발아율을 보였다. 신초 증식은 1.0 mg/L $GA_{3}$가 첨가된 배지에서 최대 5.2 cm까지 신초가 신장하였으나 비정상적으로 생장하여 결국 고사하였고, 신초를 0.1 mg/L BA가 첨가된 배지에 치상 4 주 후 2.4개의 신초를 획득하였다. 발근은 식물생장조절제(Plant Growth Regulators, PGRs)를 첨가하지 않은 환기처리 배지에 치상하였을 때 3개의 뿌리가 분화되었고, 0.1 mg/L NAA가 첨가된 환기처리 배지에 치상하였을 때 2 cm로 가장 높게 유도되었다. 기외이식 후 생존율은 기내에서 환기 전처리한 개체군이 70%로 가장 높게 나타났다.
For a probiotic yoghurt it is desirable to utilize lactic acid bacteria with a high survival rate and beneficial function to human beings. We have examined a variety of lactic acid bacteria to assess the acid and bile tolerance and antibiotic resistance. In addition, an in vitro culture experiment was performed to evaluate their ability to reduce cholesterol levels in the growth medium. Thirteen strains were selected from in vitro cholesterol assays and fed to Sprague-Dawley rats with a high-cholesterol diet. Among the 13 strains tested, 8 strains were shown to reduce serum cholesterol levels significantly after 24 days of administration in vivo. Rats were fed lyophilized yoghurt powder fermented with a combination of 3 selected strains: Bifidobacterium infantis AM-220, Lactobacillus AM-245, and Styeptococcus MA-1. The levels of total cholesterol and low density lipoprotein were significantly lower (p$\leq$0.05) in rats fed the yoghurt powder compared with control group. These studies suggest that yoghurt fermented with appropriately selected lactic acid bacteria may have a anticholesterolemic effect.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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