Polanski-Cordovano, Grace;Romano, Lea;Marotta, Lauren L.C.;Jacob, Serena;Hoo, Jennifer Soo;Tartaglia, Elena;Asokan, Deepa;Kar, Simkie;Demain, Arnold L.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.23
no.5
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pp.656-660
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2013
Pseudomonas fluorescens strain CL0145A was discovered at the New York State Museum Field Research Laboratory as an effective agent against the environmentally destructive zebra mussel, which has contaminated US waters. Dried cells of the microbe are being commercialized as an environmentally friendly solution to the problem. We found that antibiotic activity against the Gram-positive bacterium Bacillus subtilis is produced and excreted by this strain. We have carried out studies to optimize production of the antibiotic. Studies were begun in a complex corn meal medium. Activity was found in both cells and culture supernates and was maximal after one day of fermentation. Static fermentation conditions were found to be superior to shaken culture. Production of extracellular antibiotic in complex medium was found to be dependent on the content of sucrose and enzyme-hydrolyzed casein. Indeed, production was greater in sucrose plus enzyme-hydrolyzed casein than in the complex medium. Of a large number of carbon sources studied as improvements over sucrose, the best was glycerol. An examination of nitrogen sources showed that production was improved by replacement of enzyme-hydrolyzed casein with soy hydrolysates. Production in the simple glycerol-Hy-Soy medium was not improved by addition of an inorganic salt mixture or by complex nitrogen sources, with the exception of malt extract. In an attempt to keep the medium more defined, we studied the effect of amino acids and vitamins as replacements for malt extract. Of 21 amino acids and 7 vitamins, we found tryptophan, glutamine, biotin, and riboflavin to be stimulatory. The final medium contained glycerol, Hy-Soy, tryptophan, glutamine, biotin, and riboflavin.
This study was carried out to investigate the effects of activation agents on parthenogenetic activation of pig oocytes matured in vitro. The medium used for oocyte maturation was tissue culture medium (TCM) 199 supplemented with 26.19 mM sodium bicarbonate, 0.9 mM sodium pyruvate, 10 $\mu\textrm{g}$/ml insulin, 2 $\mu\textrm{g}$/ml vitamin $B_{l2}$, 25 mM Hepes, 10 $\mu\textrm{g}$/ml bovine apotransferrin, 150 $\mu$M cysteamine, 10 IU/ml PMSG, 10 IU/ml hCG, 10 ng/ml EGF, 0.4% BSA, 75 $\mu\textrm{g}$/ml sodium penicillin G, 50 $\mu\textrm{g}$/ml streptomycin sulfate and 10% pFF. After about 22 h of culture, oocytes were cultured without cysteamine and hormones for 22 h at 38.5$^{\circ}C$, 5% $CO_2$ in air. Cumulus-free oocytes involving first polar body were activated by exposure to various concentrations of ethanol and exposure time of ethanol in Hepes-buffered NCSU23 medium. Also, oocytes were activated by electric pulse alone or combination with ethanol. For electrical activation, oocytes were rinsed twice in 0.3 M mannitol solution supplemented with 0.1 mM CaC1$_2$, 0.2 mM MgC1$_2$, 0.5 mM Hopes and 0.01% BSA, and transferred to a chamber consisting of two electrodes 1 mm apart which was overlaid with the same activation solution. Oocytes were activated with a single DC pulse of 1.3 ㎸/cm for 30 $\mu$sec. After activation treatments, oocytes were washed three times with Hepes-buffered NCSU23 medium and were washed twice with NCSU23 culture medium containing 0.4% BSA, and then cultured in 500 ${mu}ell$ of the same medium for 20 h at 38.5$^{\circ}C$, 5% $CO_2$ in air. The activation rates of oocytes were higher in 6, 7 and 8% ethanol concentrations compared with 0, 5, 9 and 10% ethanol concentrations. Significantly more oocytes (29.3~33.7%) were activated in the exposure for 8, 10, 12 and 15 min than those in the exposure for 0 and 5 min, but there was no difference due to exposure to 8% ethanol for 8 to 15 min. Electric pulse treatment followed by exposure to ethanol significantly improved the rate of oocyte activation (61.9%) compared with that of other 3 treatments. In conclusion, the optimal activation treatment of ethanol exposure alone for the in-vitro matured pig oocytes was 8% ethanol for 8 to 15 min. Electric pulse treatment followed by ethanol exposure significantly improved the rate of activation.n.
The enzyme-catalyzed Henry reaction was realized using deep eutectic solvents (DESs) as a reaction medium. The lipase from Aspergillus niger (lipase AS) showed excellent catalytic activity toward the substrates aromatic aldehydes and nitromethane in choline chloride:glycerol at a molar ratio of 1:2. Addition of 30 vol% water to DES further improved the lipase activity and inhibited DES-catalyzed transformation. A final yield of 92.2% for the lipase AS-catalyzed Henry reaction was achieved under optimized reaction conditions in only 4 h. In addition, the lipase AS activity was improved by approximately 3-fold in a DES-water mixture compared with that in pure water, which produced a final yield of only 33.4%. Structural studies with fluorescence spectroscopy showed that the established strong hydrogen bonds between DES and water may be the main driving force that affects the spatial conformation of the enzyme, leading to a change in lipase activity. The methodology was also extended to the aza-Henry reaction, which easily occurred in contrast to that in pure water. The enantioselectivity of both Henry and aza-Henry reactions was not found. However, the results are still remarkable, as we report the first use of DES as a reaction medium in a lipase-catalyzed Henry reaction.
This study was conducted to develop an Agrobacterium-mediated genetic transformation protocol for the carnation cv. "Jinju" to counteract its ethylene sensitivity. The new protocol involves the use of an improved shoot regeneration medium, optimized minimal concentrations of the selective agent, a pre-culture period, and co-cultivation periods. Silver nanoparticles (NAg) added at a concentration of 2.0 μM to the Murashige and Skoog (MS) basal shoot regeneration medium supplemented with 0.1 mg/L indole-3-butyric-acid (IBA) and 0.2 mg/L thidiazuron (TDZ) improved the shoot regeneration efficiency, number of shoots per explant, and plant growth compared to the control without the addition of NAg. The phosphinothricin (PPT) concentration of 1.0 mg/L was determined to be the minimal and optimal concentration for the selection of putative transgenic plants. When the explants were infected with Agrobacterium cells harboring the acdS gene, the explants that were pre-cultured for three days induced more putative transgenic plants than those that were co-cultivated for four days. Therefore, we expect that the results of this study will benefit researchers who are developing genetic transformations of carnations.
This study was conducted to determine the effects of various growth substrates on the growth and flowering of hydroponically grown Freesia hybrid 'Gold Rich'. Perlite, peat moss and a perlite: peat moss mixture (1 : 1 ratio, v / v) were used as the growing media. The greatest plant height before flower bud differentiation was attained using mixed medium compared to the others. The type of medium used did not influence leaf number, mineral content or SPAD value in leaves. Flowering began at 137 days after planting in mixed medium, which was 13 days earlier than in perlite medium. The whole plant fresh weight was 21.3 g heavier in mixed medium than in perlite medium (40.9 g). A similar result was obtained for shoot length, with the highest value (96.6 cm) obtained in mixed medium, i.e., 20 cm higher than in perlite medium (76.6 cm). Floret number per plant was also the highest in mixed medium (14.4), i.e., 1.7 - times higher than in perlite medium. Therefore, among the substrates tested in this experiment, we recommend using mixed perlite: peat moss medium (1 : 1 ratio, v / v) for hydroponic culture of freesia, as the use of this medium improved the physical properties of the plants, producing the best results in terms of plant growth and cut-flower quality.
Cho, Ju Sung;Jang, Bo Kook;Park, Kyungtae;Lee, Ha Min;Lee, Cheol Hee
Korean Journal of Plant Resources
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v.32
no.6
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pp.735-742
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2019
This study investigated a suitable method that could be applied for Asian chain fern [Woodwardia japonica (L. f.) Sm.] to propagate gametophytes and promote sporophyte formation. The gametophytes used in all experiments were obtained from germinated spores in vitro and were subcultured at 8-week intervals. The most appropriate media for gametophyte propagation was identified by culturing 300 mg of gametophyte in Murashige and Skoog (MS) basal medium (1/8, 1/4, 1/2, 1, 2), and Knop medium for 8 weeks. As a result, fresh weight of the gametophyte was increased by 56.7-fold on MS medium. Moreover, antheridium formation as well as gametophyte growth was improved on MS medium, especially. To improve the sporophyte formation ex vitro, 1.0 g of gametophyte was ground with distilled water and spread on eight combinations onto four different culture mediums, such as bed soil, peat moss, perlite and decomposed granite. Then generation and growth of sporophytes were investigated after cultivation for 10 weeks. As a result of this experiment, peat moss had a promotive effect of sporophyte formation at single-use and mixed culture soils. In particular, a mixture of bed soil, peat moss and perlite in a 1:1:1 ratio (v/v/v) led to the accelerated formation (782.5 ea/pot) and the frond growth of sporophytes. This included increases in length and width of fronds. However, promotive effect of gametophyte growth and sporophyte formation was not found at single-use and treatment with high ratio of bed soil.
A Whey-based medium was formulated with Lactobacillus brevis to investigate whether any functional peptides could derive from whey protein. The optimal concentrations of the ingredients of the medium for the growth of Lactobacillus were determined as 2% whey protein concentrate and 1% glucose and 0.5% yeast extracts. The growth of Lb. brevis was improved with the supplementation of yeast extracts than glucose. The viable cells counts of Lb. brevis reached to 2.0 × 10$^8$CFU/mL in the whey-based medium. The whey protein hydrolysates recovered from the supernatant after centrifugation at 10,000 x g for 10min induced strong inhibitory activity against ACE. When the whey protein hydrolysate were partially purified by a membrane tubing below 8,000Da, the partially purified fraction remained 64.7 ${\pm}$ 3.6% of the ACE inhibition activity of the whey protein hydrolysates and IC$_{50}$ was 38.8 ${\pm}$ 2.2mg/mL. The whey-based medium was proved to be effective in producing ACE inhibitory peptides by lactic bacteria fermented whey protein.
Purpose: The purpose of this study examines the mediating effect of clan leadership in the relationship between hierarchy culture and organizational commitment. Most previous research focused on the relationship between organizational culture and organizational performance or organizational culture and job satisfaction. There are few empirical studies that focus on organizational commitment data because it is difficult to collect in many cases of export-driven small and medium sized enterprises. However, this research measures affective commitment, continuance commitment, and normative commitment differently than previous research, which is mostly focused on the hierarchy culture, clan leadership, and organizational commitment measurements. Research design, data, methodology: Conceptual research model is based on the studies of Cameron and Quinn (2011), and Gungor and Sahin (2018). The model is designed with three constructs such as hierarchy culture, organizational commitment, and clan leadership. The monitor culture and coordinator culture are as proxy for the hierarchy culture. The affective commitment, continuance commitment, and normative commitment are as proxy for the organizational commitment. And also the facilitator leadership and mentor leadership are as proxy for the clan leadership. Based on three hundred cases such as export-driven small and medium sized enterprises (SMEs), this study verify the hypothesis. Hypothesis was analyzed with the structural equation modeling. Results: In case of export-driven small and medium sized enterprises (SMEs), clan leadership acts as a mediator in the relationship between hierarchy culture and organizational commitment. In case of export-driven small and medium sized enterprises (SMEs) with high organizational commitment, clan leadership acts as a mediator in the relationship between hierarchy culture and organizational commitment. In case of export-driven small and medium sized enterprises (SMEs) with low organizational commitment, clan leadership did not act as a mediator in the relationship between hierarchy culture and organizational commitment. Conclusions: By controlling for the mediating effect of clan culture, this study have improved the academic contributions as well as policy and practical implications through empirical study of clan leadership that affect organizational commitment in the fields of hierarchy culture. In addition, this study means that the mediating effects on the variables of clan leadership were examined.
This study was conducted to investigate the efficient propagation method of Cyrtomium caryoptideum var. coreanum by sporophyte culture. The influence of origin of explant sources (rhizome, blade, or stipe) and homogenization of culture materials on shoot regeneration were investigated. As a result, only rhizome explant exhibited the organogenic capacity and the shoot regeneration was promoted by homogenization of culture material. Vigorous and excellent growth of multiple shoots was induced on the half-strength of inorganic salts containing MS medium. It was appeared that optimum nitrogen content of shoot regeneration was half-strength of nitrogen containing MS medium (30mM) and optimum sucrose concentration was 1%. Addition of $NaH_2PO_4$ to culture medium generally enhanced shoot multiplication and promoted growth of the regenerants. The organogenic capacity of homogenized rhizomes was especially promoted on medium supplemented with $5{\mu}M$ kinetin plus $5{\mu}M$ IBA. The incorporation of $0.1\sim0.2%$ activated charcoal on medium supplemented with growth regulators prevented the formation of multiple bud primordia - nodule-like bud clusters and improved the normal morphogenesis of sporophytes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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