• Animal cells and systems
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• 제4권3호
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• pp.299-304
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• 2000

In the present paper, the immunostimulatory effects of the extracellular products (ECP) from Mycobacterium spp. and various adjuvants on the non-specific immune responses of Nile tilapia, Oreochromis nilotica, were examined. Nile tilapia were immunized by injecting ECP of Mycobacterium spp. (strain TB40, TB267 or the type strain Mycobacterium marinum) into their swim bladders. A variety of adjuvants like as Freund s complete adjuvant (FCA), Freund's incomplete adjuvant (FIA) and Titremax were similarly injected into additional groups of tilapia. The number of nitroblue tetrazolium (NBT)-positive cells observed in the swim bladder of the immunized fish was signigicantly increased by the fourth day post-immunization. By day 8, the numbers of NBT-positive cells were fewer in fish immunized with ECP from mycobacteria strains TB40 or TB267 than those immunized with ECP from M. marinum or fish injected with FCA or FIA. The level of Iysozyme activity detected in the serum of fish 40 alter immunization with ECP from various Mycobacterium spp. was also significantly higher than that found in the serum of the control fish. Head kidney macrophages showed enhanced reduction of NBT when cultured in vitro with 1 $\mu$ g/ml of ECP. Concentrations greater than this (10 or 100 $\mu$g/ml) were found to suppress the reduction of NBT by the macrophages. ECP from Mycobacterium spp. and the various adjuvants used in the study all appear to be good activators of the non-specific immune responses of Nile tilapia.

• Molecules and Cells
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• 제20권2호
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• pp.288-296
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• 2005

Cytokines interleukin (IL) 12 and 23 play critical roles in linking innate and adaptive immune responses. They are members of heterodimeric cytokines, sharing a subunit p40. Although IL12/23 p40 is mainly induced in macrophages and dendritic cells (DCs) after stimulation with microbial Toll-like receptor ligands, methods to monitor the cells that produce IL12/23 p40 in vivo are limited. Recently, the mouse model to track p40-expressing cells with fluorescent reporter, yellow fluorescent protein, has been developed. Macrophages and DCs from these mice faithfully reported p40 induction using the fluorescent marker. Here we took advantage of these reporter mice to screen bio-compounds for p40-inducing activity. After screening hundreds of compounds, we found several extracts inducing IL12/23 p40 gene expression. Treatment of DCs with these extracts induced the expression of MHC class II and co-stimulatory molecules, which implies that these might be useful as adjuvants. Next, the in vivo target immune cells of candidate compounds were examined. The reporter system can be useful to identify cells producing IL12 or IL23 in vivo as well as in vitro. Thus, our cytokine reporter system proved to be a valuable reagent for screening for immunostimulatory molecules and identification of target cells in vivo.

• 한국식품위생안전성학회지
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• 제30권3호
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• pp.295-301
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• 2015

본 연구에서는 식물성 프로바이오틱스에 해조류인 미역을 첨가하여 프로바이오틱스의 체내 안정성 및 면역원성을 향상 시킬 수 있는 고농도 배양법을 개발하고자 하였다. 미역 첨가 배지를 생산 수준으로 유산균을 배양하였을 때 유산균수는 18시간째 $10^{22}$, 24시간째 $100^9$으로 고농도 배양이 가능하였다. 미역첨가배지로 배양된 유산균의 열 안정성, 위산 및 담즙 안정성의 효과도 기본배지와 비교 하여 유의적인 증가를 확인할 수 있었다. 미역첨가배지로 배양된 프로바이오틱스는 생균 및 사균 모두 면역증강효과를 나타내는 것을 알 수 있었다. 배양만으로 기능성이 향상된 프리바이오틱스를 개발함에 따라, 다양한 프로바이오틱스의 기능성 향상의 기반 기술로서 활용이 가능할 것으로 사료 된다.

• IMMUNE NETWORK
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• 제10권3호
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• pp.92-98
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• 2010

Background: Nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) are widely used to relieve pain, reduce fever and inhibit inflammation. NSAIDs function mainly through inhibition of cyclooxygenase (COX). Growing evidence suggests that NSAIDs also have immunomodulatory effects on T and B cells. Here we examined the effects of NSAIDs on the antigen presenting function of dendritic cells (DCs). Methods: DCs were cultured in the presence of aspirin or ibuprofen, and then allowed to phagocytose biodegradable microspheres containing ovalbumin (OVA). After washing and fixing, the efficacy of OVA peptide presentation by DCs was evaluated using OVA-specific CD8 and CD4 T cells. Results: Aspirin and ibuprofen at high concentrations inhibited both MHC class I and class II-restricted presentation of OVA in DCs. In addition, the DCs generated in the presence of low concentrations of the drugs exhibit a profoundly suppressed capability to present MHC-restricted antigens. Aspirin and ibuprofen did not inhibit the phagocytic activity of DCs, the expression level of total MHC molecules and co-stimulatory molecules on DCs. Ibuprofen rather increased the expression level of total MHC molecules and co-stimulatory molecules on DCs. Conclusion: These results demonstrate that aspirin and ibuprofen inhibit the intracellular processing event of the phagocytosed antigen, and further suggest that prolonged administration of NSAIDs in high doses may impair the capability of DCs to present antigens in asiociation with MHC molecules.

• 한국식품과학회지
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• 제48권3호
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• pp.268-274
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• 2016

백수오의 국내 재배활성화와 함께 농가소득을 높이기 위한 기능성 식품소재로서의 우수성을 산업적으로 응용하고자 백수오 추출물의 면역증진 활성을 평가하였다. 낮은 온도에서 액체상태의 추출물을 효과적으로 농축하고 정제하기 위하여 비열처리 공정인 한외거르기를 통해 분자량(MWCO)이 30 kDa인 여과막을 이용하여 고분자 분획물(CWUF>30) 및 저분자 분획물(CWUF<30)을 얻었으며 이를 큰포식세포 활성화를 통한 면역 증진 효과를 알아보기 위해 RAW 264.7 세포를 이용하여 면역활성의 지표가 되는 산화질소(II) 생성량 및 사이토카인인 TNF-${\alpha}$, 인터루킨-6의 생성량을 측정한 결과, 정상대조군(CON)에 비해 CWUF>30을 처리하였을 때 농도 의존적으로 유의하게 증가하였다. 세포실험을 통해 면역증강활성이 높은 CWUF>30은 정상동물모델에서 면역기관인 비장 및 흉선의 무게를 증가시켰고 비장세포 유래 림프구 증식도 유의하게 증가시켰다. 이는 CWUF>30의 투여가 비장세포를 증식시키는 mitogen 활성이 있음을 보여주며 외부의 항원에 노출 시 항원에 대한 면역반응을 유도하는 면역세포의 수를 증가시켜 항원에 대한 효과적인 방어에 도움을 줄 것으로 보여진다. 또한 CWUF>30을 투여한 마우스 비장세포(splenocyte)의 Yac-1 세포 살해 정도를 측정한 결과, 200 mg/kg BW의 농도로 CWUF>30을 투여한 마우스의 비장세포는 정상대조군(CON)에 비하여 effector 세포와 target 세포의 비율이 10:1에서 유의적으로 증가하였으며 이는 양성대조군(PC)과 유사한 높은 활성을 보이는 것을 확인 할 수 있었다. 이와 같은 결과를 통해 백수오 고분자 분획물(CWUF>30)이 강력한 면역활성 증진효능을 갖고 있으며 각종 바이러스 등 외부 항원들에 대응하여 초기 면역세포를 자극하고 면역매개물질을 생성함으로써 인체의 비특이적 면역반응을 증가시키는데 중요한 역할을 할 수 있을 것으로 기대된다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제35권10호
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• pp.1322-1328
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• 2006

특이적 면역반응을 유도하는 전문 항원제시세포인 수지상세포의 분화와 항원제시기능에 미치는 HemoHIM의 면역기능 증강 효과에 대해 알아보았다. HemoHIM은 수지상세포의 분화/증식 과정에 첨가하였을 경우에 공동자극 분자인 CD40, CD86 분자의 세포 표면 발현량을 증가시키는 것으로 나타났다. 이 수지상세포는 동종항원 반응 T세포를 활성화시켜 IL-2, $IFN-\gamma$ 분비량과 증식반응을 유의하게 증가시켰다. 그리고 HemoHIM을 처리한 수지상세포는 대조군에 비해 OVA항원을 T세포주에 충분히 전달하여 IL-2와 $IFN-\gamma$의 분비량을 유의하게 증가시켰을 뿐만 아니라 T세포주의 증식반응도 유의하게 증가시켰다. 따라서 HemoHIM은 생체 내의 특이적 면역반응을 유도하는 수지상세포의 기능을 강화하는 면역기능 조절제로서 사용이 가능할 것으로 생각된다.

• KSBB Journal
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• 제19권2호
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• pp.113-117
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• 2004

본 연구에서는 한국산 생약재인 마황과 복분자를 이용하여 추출과정 중 4$0^{\circ}C$, 6$0^{\circ}C$, 10$0^{\circ}C$로 온도를 달리 하여 기존의 열수 추출방법과 초음파를 병행한 추출을 통하여 면역활성 증진에 다르게 나타나는 효과를 비교 실험하였다. 추출시 모든 열수 추출물들에 비해 초음파 병행 추출물의 추출 수율이 높게 나타났고, 마황 4$0^{\circ}C$ 초음파 병행 추출물이 물 추출물에 비해 2.34배로 가장 높은 추출 수율이 나타냈으며, 10$0^{\circ}C$ 복분자 추출물은 물 추출물에 비해 초음파 병행 추출물이 1.27배 증가한 것으로 나타나 10$0^{\circ}C$ 복분자 추출물을 제외한 모든 추출물들에서 초음파 병행 추출물이 물 추출물에 비하여 1.6배 이상 증가한 것으로 나타났다. 이는 추출시 추출되지 않았던 여러 활성 물질이 초음파 처리에 의해 액체간의 상호 탈기 작용에 의해 추출 수율의 상승 효과를 가져온 것으로 사료된다. 또한, 면역세포의 생육활성 측정결과 모든 조건에서 초음파 병행 추출물이 열수 추출만을 가한 추출물에 비해 생육도가 20∼25% 가량 더 높게 관찰되었다. 더불어 인간 면역세포인 B, T cell을 이용한 cytokine 분비량 측정실험에서도 마찬가지로, 열수 추출물에 비해 초음파를 병행한 추출물에서 그 분비량이 1.5배 정도 더 높게 나타났다. 그 중에서도 복분자 6$0^{\circ}C$, 40 KHz 초음파 병행 추출물이 가장 높은 cytokine 분비량 증가 효과를 나타내었다. 이러한 결과를 비추어 보면, 앞으로 더 많은 실험을 통하여 초음파의 병행 효과와 이를 통한 기능성 소재 및 기능성 식품으로의 고부가가치 창출을 위해 더 많은 연구가 이루어져야 할 것으로 생각되어진다.

• 한국응용약물학회:학술대회논문집
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• 한국응용약물학회 1995년도 춘계학술대회
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• pp.82-82
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• 1995

4-lBB molecule is expressed on the surface of activated CD4$\^$+/ and CD8$\^$+/ T cells. We generated a panel of anti-4-1 B5 murine mAbs using a fusion protein consisting of the extracellular domain of human 4-1 BB fused to Glutathione S-transferase. The binding activity against cell surface 4-1 BB molecule was assessed by flow cytometry analysis. These studies showed that several anti-4-1 BB mAbs bound to 10-30% of CD4$\^$+/ and CD8$\^$+/T cells in PHA or Con A stimulated PBLs, although these mAbs interacted with only, l-2% of CD4$\^$+/ and CD8$\^$+/ T cells in normal PBLs, indicating the specificity of mAbs to the 4-l BB molecule on activated CD4$\^$+/ and CD8$\^$+/ T cells. Next, we examined the effect of an anti-4-l BB mAb (4B4-1-1) on allogeneic mixed lymphocyte reactions (MLRs). The data indicated that the antibody significantly inhibited the proliferative response at higher concentrations. When tested with several T cell mitogens, the antibody had no stimulatory or inhibitory effects on the mitogen-mediated T cell proliferation. These data suggest that 4-1 BB molecule may play a role in the regulation of antigen-mediated immune response.

• IMMUNE NETWORK
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• 제13권2호
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• pp.63-69
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• 2013

IL-12 is a secretory heterodimeric cytokine composed of p35 and p40 subunits. IL-12 p35 and p40 subunits are sometimes produced as monomers or homodimers. IL-12 is also produced as a membrane-bound form in some cases. In this study, we hypothesized that the membrane-bound form of IL-12 subunits may function as a costimulatory signal for selective activation of TAA-specific CTL through direct priming without involving antigen presenting cells and helper T cells. MethA fibrosarcoma cells were transfected with expression vectors of membrane-bound form of IL-12p35 (mbIL-12p35) or IL-12p40 subunit (mbIL-12p40) and were selected under G418-containing medium. The tumor cell clones were analyzed for the expression of mbIL-12p35 or p40 subunit and for their stimulatory effects on macrophages. The responsible T-cell subpopulation for antitumor activity of mbIL-12p35 expressing tumor clone was also analyzed in T cell subset-depleted mice. Expression of transfected membranebound form of IL-12 subunits was stable during more than 3 months of in vitro culture, and the chimeric molecules were not released into culture supernatants. Neither the mbIL-12p35-expressing tumor clones nor mbIL-12p40-expressing tumor clones activated macrophages to secrete TNF-${\alpha}$. Growth of mbIL-12p35-expressing tumor clones was more accelerated in the $CD8^+$ T cell-depleted mice than in $CD4^+$ T cell-depleted or normal mice. These results suggest that $CD8^+$ T cells could be responsible for the rejection of mbIL-12p35-expressing tumor clone, which may bypass activation of antigen presenting cells and $CD4^+$ helper T cells.

• 한국약용작물학회지
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• 제13권3호
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• pp.87-92
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• 2005

국내에서 자생하는 팔손이 나무의 각 부위를 이용하여 에탄올과 물 용매를 이용하여 각각 $65^{\circ}C$와 $65^{\circ}C$로 12시간 동안 2회 반복 추출하였으며 부위에 따른 항암 및 면역 활성의 변화를 측정하는 실험을 하였다. 실험결과 부위에 따른 항암 활성 증진 효과 실험 중 근피와 에탄올 용매 추출물이 가장 높게 나타나는 것을 확인 할 수 있었다. 면역세포의 생육활성 측정결과에서는 근피 부위가 높은 활성도를 나타내어 다른 부위에 비해 $40{\sim}60%$ 정도의 높은 활성을 나타내었다 이는 두릅나무과 수종들의 특징인 근피의 특이 활성을 나타내는 예인데 이에 반해 목부의 활성을 살펴보면 농도의 증가에 따라 활성도가 증가하기는 하지만 저농도의 시료에서는 100% 미만의 활성도를 나타냄으로서 면역 세포에 독성을 나타내는 것을 확인할 수 있었다. 면역세포의 활성과 관련하여 Cytokine의 분비량과의 상관관계를 확인 할 수 있었는데 면역세포의 생육활성이 가장 높은 때에 IL-6와 $TNF-{\alpha}$의 Cytokine의 분비량이 최대치인 $110{\sim}120$ $pg/m{\ell}$를 나타내었다. 이로서 앞선 결과들에 따라 팔손이 나무의 부위별 항암 및 면역 활성 실험에서 다른 두릅나무들과 수종들과 같이 근피의 높은 활성도를 확인할 수 있었으며 특히 가장 활성이 좋은 근피는 가장 낮은 활성을 나타내는 목부의 추출물과 비교하여 최대 40% 이상의 높은 활성도를 관찰할 수 있었다. 이로서 근피의 추출물이 다른 부위와 비교하여 높은 활성을 나타내는 것은 두릅나무과 수종들의 대표적인 특징 성분인 사포닌이 다른 부위에 비해 많이 함유되어 있는 것으로 사료되어지며 이는 후에 분획 및 물질 분석 실험을 통하여 확인되어져야 할 사항으로 사료되어진다.