Synthetic genes encoding the gag p24 and the part of the envelope protein gp41 of the human immunodeficiency virus (HIV-1) were cloned and overexpressed as fusion proteins in Escherichia coli, using an expression vector carrying T7 promoter and the poly-histidine leader, sequence. The overexpressed p24 fusion protein was purified by centrifugation, Ni-affinity chromatography and CM-sepharose chromatography. The overexpressed gp41 fusion protein was purified by centrifugation, $C_4$ chromatography and DEAE-sepharose chromatography. The purified fusion proteins showed a high level of purity and immunoreactivity in SDS-polyacrylamide gel electrophoresis and western blot analysis. These results suggest that this prokaryotic - expression purification method is suitable for obtaining a large amount of the viral antigen which may be useful for screening of antibodies to HIV-1 in human blood samples.
Intracellular expression of RNA decoys, such as TAR or RRE decoy, has been previously shown to protect immune cells from human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) replication by inhibiting the binding of the HIV-1 regulatory protein to the authentic HIV RNA sequence. However, HIV-1 challenge experiments of primary human T cells, which express the RNA decoy, demonstrated that the cells were only transiently protected, and hence, more improved protocols for HIV-1 inhibition with the RNA decoys need to be developed. In this report, in order to develop a more effective RNA decoy, we analyzed and compared the ability of a series of RNA decoy derivatives in inhibiting HIV-1 replication in CEM cells. Using an improved tRNA cassette to express high levels of RNA decoy transcripts in cells, we found that co-expression of both TAR and RRE decoys, in the form of an aligned sequence in a single transcription cassette, much more potently blocked cells from HIV-1 than the expression of only one kind of RNA decoy. This observation will have an important implication for experiments involving optimization of clinical applications in RNA decoy-based gene therapy against HIV-1.
Park, Jung-Chul;Choi, Seong-Ho;Kim, Yong-Tae;Kim, Sun-Jong;Kang, Hee-Jung;Lee, Jong-Ho;Shin, Seung-Chul;Cha, Young-Joo
Journal of Periodontal and Implant Science
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제41권1호
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pp.3-9
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2011
Purpose: Infection with human immunodeficiency virus (HIV) remains a major global threat, and although the prevalence is comparatively still very low, the number of HIV-positive Koreans is increasing. However, there are no official guidelines as to how to treat people living with HIV/acquired immunodeficiency syndrome (AIDS) (PLWHA) or how to screen for potentially infectious people. This study assessed the level of knowledge and attitudes of dentists in Korea toward PLWHA, and their attitudes to screening patients for HIV infections. Methods: A cross-sectional prospective survey targeting dentists working in Korea was conducted using a self-administered questionnaire. Results: A satisfactory level of knowledge about HIV/AIDS and a relatively positive attitude toward PLWHA was found. Most of the respondents preferred rapid HIV testing using oral fluid as a specimen. The general attitude of dentists toward HIV/AIDS is sufficiently positive to enable provision of the best treatment to the patients in need. Conclusions: Most of the dentists require HIV testing in dental clinics. In spite of their needs, there are several obstacles. It is hoped that financial considerations and official legal requirements related to HIV testing strategies will be considered.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제43권6호
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pp.388-394
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2017
Objectives: The objective of this study was to investigate the presence of oral lesions in human immunodeficiency virus/acquired immunodeficiency syndrome (HIV/AIDS) patients in a descriptive cross-sectional study, and to establish their presence according to levels of CD4+ cells (including the CD4+/CD8+ cell ratio). Materials and Methods: A total of 75 patients infected with HIV were included. Oral lesions were observed and classified using World Health Organization classification guidelines. Potential correlations between the presence and severity of oral lesions and CD4+ cells, including the CD4+/CD8+ cell ratio, were studied. Results: The most frequent oral lesion detected was oral pseudomembranous candidiasis (80.0%), followed by periodontal disease (40.0%), herpetic lesions (16.0%), hairy leukoplakia (16.0%), gingivitis (20.0%), oral ulceration (12.0%), Kaposi's sarcoma (8.0%), and non-Hodgkin's lymphoma (4.0%). The CD4+ count was <$200cells/mm^3$ in 45 cases (60.0%), between $200-500cells/mm^3$ in 18 cases (24.0%), and >$500cells/mm^3$ in 12 cases (16.0%). The mean CD4+ count was $182.18cells/mm^3$. The mean ratio of CD4+/CD8+ cells was 0.26. All patients showed at least one oral manifestation. Conclusion: There was no correlation between the CD4+/CD8+ cell ratio and the presence of oral lesions. The severity of the lesions was more pronounced when the CD4+ cell count was less than $200cells/mm^3$.
Sohn, Sungmin;Shi, Hye Jin;Wang, Sung Ho;Lee, Sang Ki;Park, So Yeon;Lee, Jin Seo;Eom, Joong Sik
Infection and chemotherapy
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제50권4호
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pp.350-356
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2018
In acquired immunodeficiency syndrome (AIDS) patients, immune reconstitution inflammatory syndrome (IRIS) due to Mycobacterium avium complex (MAC) infection is one of the most difficult IRIS types to manage. We report an unusual case of MAC-associated IRIS. At first the patient was diagnosed human immunodeficiency virus (HIV) infection after he was admitted with pneumocystis pneumonia. After starting antiretroviral therapy he presented unmasked IRIS with MAC infection. Next, he was hospitalized with continuous loose stools and new-onset fever. Investigation included computed tomography (CT), which showed homogeneous enhancement and enlargement of the lymph nodes (LN), elevation of ferritin (>1,650 ng/mL) and lactate dehydrogenase (306 IU/L) levels, and F- fluorodeoxyglucose positron emission tomography/computed tomography (FDG PET/CT) scan, which showed increased FDG uptake. These findings were highly indicative of lymphoma. We performed laparoscopic biopsy of the mesenteric LN, and the biopsy culture grew MAC. So we made a diagnosis of MAC-associated. Therefore, IRIS must be considered as a possible diagnosis when AIDS patients develop new symptoms or exhibit exacerbations of existing symptoms. Furthermore the biopsies should be conducted.
Background: Feline immunodeficiency virus (FIV) causes an acquired immunodeficiency-like syndrome in cats. FIV is latent. No effective treatment has been developed for treatment the infected cats. The first and second generations non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors (NNRTIs) for HIV treatment, nevirapine (NVP) and efavirenz (EFV), and rilpivirine (RPV), were used to investigate the potential of NNRTIs for treatment of FIV infection. Objective: This study aims to use experimental and in silico approaches to investigate the potential of NNRTIs, NVP, EFV, and RPV, for inhibition of FIV reverse transcriptase (FIV-RT). Methods: The FIV-RT and human immunodeficiency virus reverse transcriptase (HIV-RT) were expressed and purified using chromatography approaches. The purified proteins were used to determine the IC50 values with NVP, EFV, and RPV. Surface plasmon resonance (SPR) analysis was used to calculate the binding affinities of NNRTIs to HIV-RT and FIV-RT. The molecular docking and molecular dynamic simulations were used to demonstrate the mechanism of FIV-RT and HIV-RT with first and second generation NNRTI complexes. Results: The IC50 values of NNRTIs NVP, EFV, and RPV against FIV-RT were in comparable ranges to HIV-RT. The SPR analysis showed that NVP, EFV, and RPV could bind to both enzymes. Computational calculation also supports that these NNRTIs can bind with both FIV-RT and HIV-RT. Conclusions: Our results suggest the first and second generation NNRTIs (NVP, EFV, and RPV) could inhibit both FIV-RT and HIV-RT.
A bacterial expression vector for the human foamy virus (HFV) integrase was constructed and expressed in Escherichia coli. By two-step purification using a nickel-chelated column and a SP-sepharose chromatography; the HFV into-grase protein of 43 kDa was purified to near homogeneity, and used to investigate biochemical characteristics of the enzymatic activities, such as endonucleolytic and disintegration activities. Oligonucleotide substrates were specifically and efficiently cleaved by the purifed HFV integrase in the presence of Mn $^{+2}$, but not in the presence of Mg $^{+2}$, indicating that the HFV integrase is not able to use Mg $^{+2}$ as a cofactor Endonucleolytic reaction was almost completed in 60 min at 37 $^{\circ}C$. In addition, the maximum enzymatic activities were observed at 5 mM Mn $^{+2}$ in the buffer of which pH was from 7.0 to 9.0. The endonucleolytic activities were dose-dependently blocked in the addition of baicalein or chicolic acid which is a well-known inhibitor of human immunodeficiency virus integrase.
Human immunodeficiency virus (HIV) is the causative agent of acquired immune deficiency syndrome (AIDS). Anti-HIV agents targeting various steps in HIV life cycle have been developed; however, so far, no effective drugs have been found. We show here that a peptide isolated from Spirulina maxima (SM-peptide) inhibits HIV-1 infection in a human T cell line MT4. SM-peptide inhibited $HIV-1_{IIIB}$-induced cell lysis with a half-maximal inhibitory concentration ($IC_{50}$) of 0.691 mM, while its 50 % cytotoxic concentration ($CC_{50}$) was greater than 1.457 mM. Furthermore, the SM-peptide inhibited the HIV-1 reverse transcriptase activity and p24 antigen production. This suggests that SM-peptide is a novel candidate peptide, which may be developed as a therapeutic agent for acquired immunodeficiency syndrome patients.
AIDS, 즉 후천성면역결핍증은 인간면역결핍바이러스(Human Immunodeficiency Virus : HIV)라고 불리우는 바이러스에 의한 인간면역체계의 붕괴로 발생하는 질환이다. 1979년 최초로 새로운 임상적특징을 가진 증후군으로 의학학술지에 발표되어 의료계의 주목을 끌어오다가 1981년 봄 로스앤절레스에 있는 남성동성연애자에게 발생한 AIDS의 첫 예가 보고되어 본격적 연구가 시작되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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