자소엽(perilla frutescens)은 꿀풀과(Labiatae)에 속하며 널리 알려져 있는 약용 식물이다. 본 연구에서는 자소엽을 물, 열수, 초음파 추출 방법으로 추출하여 항산화 효과를 비교하고 가장 효과적인 추출방법을 제시하고자 한다. 물, 열수, 초음파 처리를 통해 각각의 자소엽 추출물을 제조 하였고, DPPH 라디칼 소거능 및 총 페놀 함량을 통해 항산화 효과를 검증하고, 인간 간세포인 HepG2에 대한 세포 독성효과와 hydrogen peroxide ($H_2O_2$)로 유도된 산화적 스트레스로부터 간세포 보호효과를 3-[4,5-dimethylthiazole-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay로 확인하였다. 자소엽 초음파 추출물은 $5000{\mu}g/mL$농도에서 69.07%의 DPPH 라디칼 소거능을 나타내며 물, 열수 추출물과 비교하여 우수한 항산화 효과를 나타내었다. 또한 총 페놀 함량 측정 결과 $51.60{\pm}1.06mg\;GAE/g$ extract 로서 물, 열수 추출물 보다 높은 총 페놀 함량을 확인하였다. 그러나 산화적 스트레스에 의한 세포 보호효과는 미비하였다. 본 연구를 통해 추출 방법에 따른 항산화 효과의 차이를 확인하였으며, 우수한 항산화 효과를 나타낸 자소엽 초음파 추출물을 이용하여 추가적인 연구가 필요 할 것으로 사료된다.
L. casei 균주를 이용하여 알로에를 발효한 결과 다당체의 분자량이 현저하게 저분자화 되었다. 사염화탄소로 유도된 흰쥐의 간과 혈청에서 간기능 활성, 항산화효소 활성 및 지질과산화에 미치는 발효알로에의 용량별 효과를 조사하였다. 14일 연속적으로 발효알로에(50, 100 mg/kg)을 경구투여 하였다. 알로에 투여군에서 SOD, CAT의 활성은 유의성있게 활성이 증가하였으며, AST, ALT, MDA 함량을 측정한 결과 용량 의존적으로 감소하였다. 이러한 결과로 미루어 볼때 발효알로에는 사염화탄소로 유발된 간독성에 대하여 항산화효소 활성을 증가시키며, 지질과산화를 억제하는 것으로 사료된다.
Objective : Citri Unshius Pericarpium is the dried peel of mature fruit of Citrus unshiu Markovich and has been used to treat indigestion, vomiting, and removal of phlegm. This study investigated the hepatoprotective and antioxidant effect of CEE (Ethanol extract of Citri Unshius Pericarpium) in cadmium (CdCl2)-treated HepG2 cells. Methods : Component analysis of Citri Unshius Pericarpium was analyzed by UPLC with C18 column. Cell viability was determined by MTT assay. The enzyme activity of superoxide dismutase (SOD) and the level of reactive oxygen species (ROS) and reduced glutathione (GSH) were analyzed using commercially available kits. Results : Cadmium caused severe HepG2 cell death. Cadmium also increased ROS production, consistent with depletion of GSH and inhibition of the SOD enzyme. However, CEE treatment reduced cell death and relieved oxidative stress caused by cadmium toxicity. CEE lowered ROS levels and improved depletion of GSH levels. CEE also enhanced the enzymatic activity of SOD. In component analysis, hesperidin was the most abundant of the five marker compounds (Narigenin, Narigin, Narirutin, Hesperidin and Hesperidin), which assumes that hesperidin partially contributed to the antioxidant activity of CEE. Conclusion : These results suggested that CEE could be a potential substance to solve heavy metal-related health problems. In particular, inhibition of oxidative stress by CEE can be a way to treat liver damage caused by cadmium.
The hepatoprotection by the methanol extract of Oenanthe javanica DC (water dropwort) (OJME) was investigated in Sprague Dawley rats with inducing liver damage by acetaminophen. After OJME administration for 1 week, the increase of hepatic lipid peroxide level by acetaminophen-induced hepatotoxicity was significantly reduced. In case of phase I microsomal enzyme systems including cytochrome P-450, aminopyrine N-demethylase and aniline hydroxylase, any significant differences between in control and in OJME-pretreated group was observed after acetaminophen treatment. However, the pretreatment of OJME maintained the hepatic glutathione level and the activity of liver cytosolic glutathione S-transferase, which was significantly decreased by the acetaminophen intoxication. Among the glutathione-generating system, glutathione reductase was more responsible for its biosynthesis rather than ${\gamma}-glutamylcystein$ synthetase. OJME itself showed the strong inhibition activity on DPPH radical generation. In conclusion, OJME administration maintains the liver glutathione pool and hepatic glutathione S-transferase activity, in addition with its high anti-oxidative capability, to show hepatoprotective effect from acetaminophen intoxication.
Parthasarathi, Shanmugam;Hong, Se Chul;Oh, Myeong Hwan;Park, Young Sik;Yoo, Ji Hyun;Seol, Su Yeon;Lee, Hwan;Park, Jong Dae;Pyo, Mi Kyung
Natural Product Sciences
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제21권3호
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pp.210-218
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2015
The antioxidant activity of white ginseng was not recorded in Korea Functional Food Code, while its activity of red ginsengs was recorded. The aim of this study was to evaluate the antioxidant and hepato protective effect of different ginsengs in H2O2-treated HepG2 cells. White and red ginseng were prepared from longitudinal section of the same fresh ginseng (4-year old). The whole parts of white and red ginsengs were separately extracted with 70% ethanol and distilled water respectively, at 70 ℃ to obtain therapeutic ginseng extracts namely, WDH (distilled water extract of white ginseng), WEH (70% ethanol extract of white ginseng), RDH (distilled water extract of red ginseng) and REH (70% ethanol extract of red ginseng). In this work, we have investigated the DPPH, hydroxyl radical, Fe2+-chelating activity, intracellular ROS scavenging capacity and lipid peroxidation of different ginsengs. All these extracts showed a dose dependent free-radical scavenging capacity and a ROS generation as well as lipid peroxidation was significantly reduced by treatment with bioactive extracts of white ginsengs (WDH) than red ginsengs. Additionally, white ginseng extracts (WDH) has dramatically increased intracellular antioxidant enzyme activities like superoxide dismutase and catalase in H2O2-treated HepG2 cells. All these results explain that administration of white ginseng is useful as herbal medicine than red ginseng for chemoprevention of liver damage.
Several parts of Lythrum salicaria were used for this study. Scavenging activities on radicals, inhibitory activity on linoleic acid peroxidation and total phenol contents of extracts from root, flower, and aerial part were evaluated. Flower and root selected from in vitro assay were subjected to in vivo assay on $CCL_4$-induced liver injury rat model for two weeks. Carbon tetrachloride intoxication on rats produced large amounts of hepatic lipid peroxidation product, thiobarbituric acid reactive substance (TBARS) compared with normal rats. Treatment with root extract of L. salicaria (LSR) showed effective inhibitory activity on lipid peroxidation product. Administration with LSR extract significantly alleviated $CCL_4$-induced increase in GPT activity which were more effective than silymarin. The results of this study suggest that root and flower of L. salicaria have antioxidant and liver protecting activities, and root part is the most effective candidate to develop a new functional material.
Sea-urchins (Anthocidaris crassispina) are widely distributed in the East Sea of Korea. The aim of this study was to evaluate the hepatoprotective effects of sea-urchin roe on bromobenzene (BB)-induced liver damage in rats. The antioxidative and detoxifying properties of sea-urchin roe in BB-poisoned rat liver was examined by chemical analysis of serum aminotransferase (AST, ALT), glutathione S-transferase (GST), $\gamma$-glutamylcystein synthetase, glutathione reductase, epoxide hydrolase, amino-N-demethylase (AD), aniline hydrolase (AH) enzyme activity, as well as lipid peroxide and glutathione contents. Sea-urchin roe inhibited the increase of serum AST, ALT enzyme activity. Increasing lipid peroxide contents and AD and AH activities were significantly decreased in ethanol extract of sea-urchin roe. GST, $\gamma$-glutamylcystein synthetase, glutathione reductase and epoxide hydrolase enzyme activities increased in sea-urchin roe-fed group, compared with the BB-treated group. These results suggest that sea-urchin roe facilitates recovery from liver damage by enhancing antioxidative defense mechanisms and hepatic detoxication metabolism.
일반적으로 보석란으로 알려진 금선련은 대만에서 폐나 간의 질병 및 발열이나 두통 치료를 위한 전통식물약제로 사용되어 왔다. 본 연구에서는 생물반응장치를 이용하여 조직배양된 금선련 식물체에 대하여 화장품 성분으로써 응용 가치를 평가하였다. 이미 몇몇 보고 된 논문에서 금선련은 항암활성, 면역 활성, 간 보호 활성 및 지질대사의 약리학적 활성 등에 대한 연구가 되고 있지만 화장품 성분으로 효능들에 대한 연구는 알려져 있지 않다. 따라서 본 연구에서는 생물반응장치를 이용하여 조직배양된 금선련 추출물에 대하여 미백 및 항비만 관련한 효능 효과를 평가하였다. 실험 결과 조직배양된 금선련 추출물은 tyrosinase 활성 및 멜라닌 합성 억제 효과뿐만 아니라 지방 전구 세포의 지방세포로의 분화를 억제시킴으로써 세포 내 지질 축적을 억제하였다. 이러한 결과들은 피부보호를 위한 화장품 성분으로서 응용 가능성을 제공 할 수 있을 것으로 사료된다.
Objectives : Native to East Asia, Japan, and Korea, Cinnamomum japonicum Siebold (CJ) is renowned for its aromatic leaves and bark. We previously assessed the antioxidant activity of fractionated CJ branches (CJB:70% EtOH extract), including hexane (CJB1), chloroform (CJB2), ethyl acetate (CJB3), butanol (CJB4), and water (CJB5). Our findings revealed that CJB3 exhibited the highest antioxidant activity. Here, we aimed to investigate whether CJB3 possesses cytoprotective effects and induces the activity of antioxidant enzymes in hepatocytes. Methods : As HepG2 cells were the first to exhibit the key characteristics of hepatocytes, we investigated the hepatoprotective effects of CJB3 on HepG2 cells. Results : Before conducting the cell experiment, we checked that CJB3, up to a concentration of 100 ㎍/mL, did not exhibit cytotoxicity toward HepG2 cells. ROS production increased because of t-BHP treatment decreased in a concentration-dependent manner upon CJB3 treatment. We confirmed that CJB3 inhibited t-BHP-induced cell death. CJB3 was found to reverse the expression of proteins associated with t-BHP-induced apoptosis. We also observed that CJB3 induced Nrf2 phosphorylation and the nuclear translocation of Nrf2. And, CJB3 treatment caused a time-dependent enhancement of GCL and NQO1 protein expression. We further confirmed that CJB3 increased the expression of Nrf2 target genes, and this effect was associated with the activation of JNK, p38, and AMPK. Conclusion : CJB3 prevents t-BHP-induced oxidative stress and apoptosis and enhances the expression of Nrf2 target genes via JNK, p38, and AMPK activation. These results suggest that CJB3 is a promising candidate for the treatment of liver diseases.
본 연구는 싸리나무 잎에서 분리한 flavonoid 화합물인 eriodictyol의 항산화 활성을 평가하기 위해 hydrogen peroxide로 산화적 스트레스를 유도한 HepG2 세포에서 eriodictyol 화합물의 처리가 SOD-1, SOD-2, CAT 및 GPx의 유전자 발현에 미치는 영향을 분석하였으며, 또한 간 기능 지표효소인 GOT, LDH 및 GGT 활성을 분석하였다. 그리고 세포 내 활성산소종 생성 억제 효능을 분석하기 위하여 DCFH-DA assay를 실시하여 eriodictyol 화합물의 기능성 소재로서의 가능성을 알아보고자 본 실험을 하였다. Eriodictyol 화합물의 세포독성을 확인하기 위하여 HepG2 세포주를 이용하여 실시한 결과 eriodictyol 화합물을 $10{\sim}50{\mu}g/mL$의 농도로 처리한 모든 실험군에서 약 98% 이상의 세포생존율을 나타내었다. 항산화 효소 유전자 발현량을 통한 산화스트레스 억제 효과를 분석하기 위하여 HepG2 세포주에 hydrogen peroxide를 처리하여 산화스트레스가 증가시킨 조건에서 eriodictyol 화합물을 처리하여 SOD-1, SOD-2, CAT 및 GPx 발현량을 분석한 결과 eriodictyol 화합물의 처리 농도가 증가할수록 hydrogen peroxide 처리에 의해 감소한 SOD-1, SOD-2, CAT 및 GPx 발현량이 유의적으로 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 간 기능 지표효소 활성을 측정하기 위해 GOT, LDH 및 GGT 활성을 분석한 결과 hydrogen peroxide로 단독 처리한 대조군과 eriodictyol 화합물을 처리한 군을 비교하였을 때 eriodictyol 화합물을 처리한 군에서 hydrogen peroxide 처리에 의해 증가한 GOT, LDH 및 GGT 활성이 유의적으로 감소하였다. HepG2 세포주에 eriodictyol 화합물을 처리하여 세포 내 활성산소종 생성에 미치는 영향을 DCFH-DA assay로 확인한 결과 eriodictyol 화합물의 농도가 증가함에 따라 세포내 활성산소종의 생성을 억제하는 것을 확인할 수 있었다. 따라서 본 실험을 통하여 eriodictyol 화합물은 산화적 스트레스로부터 항산화 효소 활성을 증가시키며, 활성산소종의 생성을 억제하는 효과를 확인할 수 있었다. 또한 간 기능 지표효소의 활성을 감소시켜 세포 보호 효과를 나타내어 항산화 활성 및 세포 보호 효과를 나타내는 기능성 소재로써 이용 가능성이 높을 것으로 판단되며, 후속연구를 통해 싸리나무 유래 eriodictyol 화합물의 세포 내 항산화 단백질 발현에 미치는 영향 및 동물실험을 통한 항산화 효과를 검증하는 것이 필요할 것으로 생각된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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