Park, Joon-Sang;Lee, Bum-Young;Chung, Soo-Il;Min, Mi-Kyung
The Journal of Korean Society of Virology
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v.27
no.1
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pp.9-17
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1997
Hepatitis C virus (HCV) E2 protein is known to be one of putative envelope proteins. To develop a sensitive detection method for HCV infected tissues and cells, monoclonal antibodys (MAbs) to the E2 protein of HCV were prepared from mice immunized with recombinant baculovirus-expressing E2 protein (Bac-E2). Several hybridoma clones secreting various levels of MAb were isolated and isotypes of these MAb were determined. One clone (L.2.3.3) was used for ascites production and the E2-MAb was purified and characterized. The L.2.3.3 reacted well with both Bac-E2 and E. coli expressed glutathione-S-transferase-E2 (GST-E2) fusion proteins. Using HCV patient sera, E2 envelope protein was found to be localized in the cell membrane boundary both in CHO cells and insect cells which express HCV E2 protein. Similar result was obtained when same cells were treated with the MAb L.2.3.3. These results demonstrated that Bac-E2 protein is capable of eliciting high titer antibody production in mice.
Hepatitis E virus (HEV) can infect not only human but also several animals. This study has been conducted to evaluate the comprehensive anti-HEV seroprevalence in zoo animals in Korea. Anti-HEV antibodies were identified in 14 of 64 zoo animal species. HEV antibodies were detected for the first time in Eurasian Lynx, Setland Pony, Fallow Deer, Ezo Sika, Formosa Deer, East Wapitis, Barasingha, Corriedale, American Bison, Guanacos, Reticulated Giraffe, and Saanen. These results indicate that the several zoo animal species were exposed to HEV.
Hepatitis C virus (HCV) non-structural protein 5A protein (NS5A), which consists of three functional domains, is involved in regulating viral replication, interferon resistance, and apoptosis. Recently, the three-dimensional structure of the domain 1 was determined. However, currently the molecular basis for the domains 2 and 3 of HCV NS5A is yet to be defined. Toward this end, we expressed, purified the domain 2 of the NS5A (NS5A-D2), and then performed biochemical and structural studies. The purified domain 2 was active and was able to bind NS5B and PKR, biological partners of NS5A. The results from gel filtration, CD analysis, 1D $^1H$ NMR and 2D $^1H-^{15}N$ heteronuclear single quantum correlation (HSQC) spectroscopy indicate that the domain 2 of NS5A appears to be flexible and disordered.
Kim, Tae Woo;Chung, Hesson;Kwon, Ick Chan;Sung, Ha Chin;Kang, Tae Heung;Han, Hee Dong;Jeong, Seo Young
Molecules and Cells
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v.22
no.2
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pp.175-181
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2006
Delivery of DNA vaccines to airway mucosa would be an ideal method for mucosal immunization. However, there have been few reports of a suitable gene delivery system. In this study we used a cationic emulsion to immunize mice via the intranasal route with pCMV-S coding for Hepatitis B virus surface antigen (HBsAg). Complexing pCMV-S with a cationic emulsion dramatically enhanced HBsAg expression in both nasal tissue and lung, and was associated with increases in the levels of HBs-specific Abs in serum and mucosal fluids, of cytotoxic T lymphocytes (CTL) in the spleen and cervical and iliac lymph nodes, and of delayed-type hypersensitivity (DTH) against HBsAg. In contrast, very weak humoral and cellular immunities were observed following immunization with naked DNA. In support of these observations, a higher proliferative response of spleenocytes was detected in the group immunized with the emulsion/pCMV-S complex than in the group immunized with naked pCMV-S. These findings may facilitate development of an emulsion-mediated gene vaccination technique for use against intracellular pathogens that invade mucosal surfaces.
A rapid and sensitive method has been developed to detect hepatitis B virus DNA (HBV) by nested polymerase chain reaction (PCR) technique with primers specific for the surface and core regions in capillary thermal cycler within 80 min. The lower limit for detection by present PCR method is $10^{-5}$ pg of recombinant HBV DNA which is equivalent to that determined by one round of PCR amplification and Southern blot hybridization analysis. When boiled HBV positive serum was serially diluted 10-fold, HBV DNA was successfully determined in $1{\mu}l-10^{-3}$ of serum. HBV DNA was detected by present method in 69 clinical samples including HBsAg positives and negatives by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). When serum samples were amplified by nested PCR using surface and core region primers, HBV DNAs were detected in 37 of 69 samples (53.6%) and 18 of 69 samples (26.1%), respectively. These results can inform the infectious state of HBsAg positive pateints. A simple and rapid nested PCR protocol by using boiled serum as DNA template has been described for the clinical utility to determine HBV DNA in human serum.
Reactivation of the hepatitis B virus (HBV) is a well-recognized complication in patients with chronic HBV infection who receive cytotoxic or other immunosuppressive therapy. In cases of patients treated by radiotherapy however, only a few of such reports exist and most of these include the patients previously treated by chemotherapy or transarterial chemoembolization. The results of this study point to a case of a patient with reactivation of HBV after radiotherapy alone. This study shows the possibility of HBV reactivation by partial hepatic irradiation alone hence, special attention should be paid to patients with HBV disease.
Park, Yu-Ri;Park, Ji-Young;Kang, Dae-Young;Han, Do-Hyun;Yoon, Hachung;Jeong, Wooseog;An, Dong-Jun;Yeo, Sang-Geon;Park, Choi-Kyu
Korean Journal of Veterinary Service
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v.39
no.4
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pp.267-270
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2016
We determined the nationwide seroprevalence of hepatitis E virus (HEV) infection in the wild boar population in Korea. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) results showed that 42% of the 528 wild boars that were hunted between 2013 and 2014 were anti-HEV antibody positive. Furthermore, all Korean provinces showed an HEV seroprevalence between 9.8% and 51.1%, suggesting that wild boar HEV infection occurs throughout the country. Importantly, infected wild boar could act as a potential reservoir for HEV and could aid transmission to other animals and humans.
Than, Van Thai;Baek, In-Hyuk;Lee, Hee-Young;Kim, Jong-Bum;Shon, Dong-Hwa;Chung, In-Sik;Kim, Won-Yong
Biomolecules & Therapeutics
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v.20
no.3
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pp.320-325
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2012
Rotavirus and hepatitis A virus (HAV) spread by the fecal-oral route and infections are important in public health, especially in developing countries. Here, two antigenic epitopes of the HAV polyprotein, domain 2 (D2) and domain 3 (D3), were recombined with rotavirus VP7, generating D2/VP7 and D3/VP7, cloned in a baculovirus expression system, and expressed in Spodoptera frugiperda 9 (Sf9) insect cells. All were highly expressed, with peak expression 2 days post-infection. Western blotting and ELISA revealed that two chimeric proteins were antigenic, but only D2/VP7 was immunogenic and elicited neutralizing antibody responses against rotavirus and HAV by neutralization assay, implicating D2/VP7 as a multivalent subunit-vaccine Candidate for preventing both rotavirus and HAV infections.
Although studies on Hepatitis A virus (HAV) were crucial in the establishment of the HAV infection prevention programs, no systematic investigation into HAV has been conducted since 1999. We retrospectively analyzed the data between January 2010 to December 2018 from all the patients who underwent HAV antibody tests at the Dankook University Hospital Health Care Center. Data were collected from 56,204 individuals. Overall, 34,834 (62.0%) individuals from this cohort were positive for HAV antibodies and the annual rate of anti-HAV antibody positivity was highest in 2010 (68.5%) and lowest in 2013 (54.8%). The average decline in the antibody positivity rate was 0.62% per year, showing a statistically significant difference (p < 0.001). In the over 40s age group, anti-HAV antibody positivity rates decreased from 89% in 2010 to 64% in 2018 (p < 0.001), with an annual decrease of 3.1%. In the over 30s age group, it decreased from 48.2% in 2010 to 34.7% in 2018 (p < 0.001), with an annual decrease of 1.82%. This study shows that the antibody positivity rate is decreasing across age groups but given that HAV infection poses more significant risks in older patients it is important to expand the evaluations of the current and future antibody positivity rates for HAV in various age groups.
Hepatitis C virus (HCV) has been known to be an enveloped virus with a positive strand RNA genome and the major agent of the vast majority of transfusion associated cases of hepatitis. For viral replication, HCV structural proteins are first processed by host cell signal peptidases and NS2/NS3 site of the nonstructural protein is cleaved by a zinc-dependent protease NS2 with N-terminal NS3. The four remaining junctions are cleaved by a separate NS3 protease. The solution conformations of NS4B/5A, NS5A/5B substrates and NS5A/5B inhibitor have been determined by two-dimensional nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy. NMR data suggested that the both NS5A/5B substrate and inhibitor appeared to have a folded tum-like conformation not only between P1 and P6 position but also C-terminal region, whereas the NS4B/5A substrate exhibited mostly extended conformation. In addition, we have found that the conformation of the NS5A/5B inhibitor slightly differs from that of NS5A/5B substrate peptide, suggesting different binding mode for NS3 protease. These findings will be of importance for designing efficient inhibitor to suppress HCV processing.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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