Vitamin E와 selenium의 급여가 거세한우육의 진열저장중 (5$^{\circ}C$, 1,200 lux) 육색안정성에 미치는 영향을 조사하였다. 실험처리구는 대조구(Vit E 27 IU/head/day, Se 0.09 mg/head/day), Vitamin E 급여구(2,500 IU/head/day), Selenium 급여구(20 mg/head/day), Vitamin E와 Selenium 복합 급여구 (Vit E 2,500 IU/head/day, Se 20 mg/head/day)로 나누어 실험하였다. CIE a*값, chroma값, oxymyoglobin함량(%) 및 R630-R580간은 모든 처리구에서 저장기간이 길어질수록 유의적으로 감소하는 경향을 나타내었으며(p<0.05), 특히 대조구가 저장기간이 길어질수록 현저한 감소현상을 보였다. Metmyoglobin(%)의 함량은 저장 전(0일)에는 처리구간에 유의적인 차이를 나타내지 않았으나(p>0.05) 저장기간이 경과 함으로써 대조구의 metmyoglobin 형성율이 현저하게 증가하여 다른 처리구에 비해 변색이 가속화됨을 알 수 있었다. 지질의 산패 정도를 나타내는 TBARS는 Se구와 Vit E+Se구가 대조구와 Vit E구보다 유의적으로 낮은 값을 나타내었다. 환원력은 저장 전에는 대조구가 유의적으로 낮게 나타났으며 3일 저장시 대조구가 다른 처리구에 비해 현저히 낮아짐을 알 수 있었다. 결과적으로 selenium 급여구들(Se구, Vit E+Se 구)의 경우 대조구와 vitamin E급여구에 비해 지질산화에 대해 안정성을 가졌으며, 육색이나 육색소에 있어서는 Vit E구, Se구, Vit E+Se구가 대조구보다 저장안정성을 보였으나 이 3가지 처리구간에는 유의적인 차이가 나타나지 않았다.
In this study, a Korean native cattle strain (Hanwoo) evidencing high performance in terms of both meat quality and quantity was employed in the generation of 150,000 BAC clones with an average insert size of 140 kb, and corresponding to about a 6X coverage of bovine chromosomal DNA. The BAC clones were pooled in a mini-scale via three rounds of a pooling protocol, and the efficiency of this pooling protocol was evaluated by testing the accuracy of accessibility to the positive clones, via a PCR-based screening method. Two sets of primers designed from each of two known genes were tested, and each yielded 2 or 3 positive clones for each gene, thereby indicating that the BAC library pooling system was appropriate with regard to the accession of the target BAC clones. Analyses of $3.3{\times}10^6$ base pairs obtained from the 7,090 BAC end sequence (BES) showed that 34.88% of the DNA sequence harbored the repetition sequence. Analysis of the 7,090 BES to the $1^{st}$ and $2^{nd}$ generation radiation hybrid map of the cattle genome, using the COMPASS program designed for the construction of a cattle-human comparative mapping, resulted in the localization of a total of 1,374 clones proximal to 339 $1^{st}$ generation markers, and 1,721 clones proximal to 664 $2^{nd}$ generation markers. Collectively, the BAC library and pooling system of the BAC clones from the Korean cattle, coupled with the chromosome-localized BAC clones, will provide us with novel tools for the excavation of desired clones for genome mapping and sequencing, and will also furnish us with additional information regarding breed differences in cattle.
This study was performed in order to simplify the operation and minimize stress of donor and be readily available in the field with low cost and high quality embryos using the Direct Embryo Collection (DEC). Donors, at random stages of the estrous cycle, received a CIDR. 7 days later, 200 mg FSH was treated with 40, 30, 20, 10 mg FSH levels in declining doses twice daily by intramuscular injection for 4 days. On the 3rd day administration of FSH, 25 mg $PGF_2{\alpha}$ was administered and CIDR was withdrawn. After FSH injections were complete, donors were artificially inseminated twice at 12 hr intervals. The donor cattle received 250 ${\mu}g$ GnRH at time of 1 st insemination and embryos were recovered 8 days after the 1st insemination. Embryo collection from superovulated donors was performed to flushing by non-surgical methods of 3-way, 2-way and DEC (l-way). The average number of recovered embryos were 11.25${\pm}$0.63, 12.5${\pm}$0.65 and 11.75${\pm}$0.48 from operations of 3-way, 2-way and DEC methods, respectively. There were no significant differences among the embryo collection methods. Also, The average number of transferable embryos were 6.25${\pm}$0.48, 7.25${\pm}$0.48 and 7.25${\pm}$0.63 from each embryo collection procedures. The number of transferable embryos was no differences among the 3-way, 2-way and DEC methods, respectively. Meanwhile, the ratio of transferable embryos for all recovered embryos from DEC methods was higher as 61.7 % than 55.6 %, 58 % from methods of 3-way, 2-way. And the flushing solution required for recovering embryos by DEC method was significantly lower as 0.28${\pm}$0.32 1 than 1.8${\pm}$0.12 1, 1.75${\pm}$0.10 1 from 3-way, 2-way methods (p<0.05). Also, the time required for recovering embryos by DEC methods was significantly lower as 27${\pm}$2 min than 51${\pm}$3, 45${\pm}$2 min, respectively (p<0.05). In conclusion, these results suggest that DEC method for embryo collection may be effectively used for production of in vivo embryos using less flushing solution and, it might be effectively available in the field compared to conventional embryo recovery methods using 3-way or 2-way balloon catheter.
This study was performed to identify and analyze the specifically expressed plasma proteins during early pregnancy in both pregnant and non-pregnant Hanwoo. Blood samples were collected at 0 (the day of AI), 2, 3, 4, 7, and 11 weeks after AI from pregnant (n=3) and non-pregnant (n=4) Hanwoo, respectively. The hematological parameters were measured. After 2-dimensional electrophoresis using serum, normalized protein spots were selected for the significant expression variation deviated over two fold in its expression level between two groups. Among 17 spots selected, 15 were identified as albumin, IgG1 heavy chain constant region, haptoglobin, ferrochelatase, fibrinogen, hemopexin. 5 spots were expressed only in non-pregnant specific. The spot identification of 1105 and 6106 was decreased after 3 weeks from AI. However, 2/17 spots were still unidentified. Further studies are needed to analyze the function of the proteins associated with early pregnancy.
Park, Joung-Jun;Yoo, Han-Jun;Choi, Hye-Won;Cheong, Ki-Soo;Kim, Ji-Tae;Park, Choon-Keun;Yang, Boh-Suk
한국수정란이식학회지
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제27권4호
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pp.253-258
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2012
This study was carried out to effects of ethylene glycol concentration, sucrose and culture day of in vitro production embryo on slow-down freezing in Hanwoo. 6, 7, 8 and 9 day embryos produced in vitro were frozen using 1.8M EG+0.1M sucrose, 1.8M EG+0.5% BSA and 1.5M EG+0.1M sucrose media. Survivability was confirmed after frozen-thawed 24 and 48h and ICM, TE cell number were counted by Hoechst 33342 and PI staining after frozen-thawed 24h. As a result, 1.8M EG+0.1M sucrose group was most significantly (p<0.05) higher compared with the other treatment groups on survivability, TE and total cell number after frozen-thawed 24h ($94.2{\pm}2.6%$, $94.67{\pm}3.4$ and $129.67{\pm}5.5$). ICM number did not found significant (p<0.05) differences between the three treatment groups. in 6, 7, 8 and 9 day of embryos using three types of freezing media, frozen-thawed, 1.8M EG+0.1M sucrose groups with embryos cultured 8 day was significantly (p<0.05) highest survivability to $98.3{\pm}1.7%$ after frozen-thawed 24h. 1.5M EG+0.1 sucrose group with embryos cultured 9 day was significantly higher survivability than group of embryos cultured 8 day after frozen-thawed 24 and 48h. In conclusion, 1.8M EG+0.1M sucrose media is considered to be effective to cryopreservation of embryos cultured 8 and 9 day.
Recently, several approaches have been used to measure the oxygen consumption rates of individual embryos, but relationship between oxygen consumption and pregnancy rates of Hanwoo following embryo transfer has not yet been reported. In this study, we investigated the correlation between oxygen consumption rate and pregnancy rates of Hanwoo embryo using a SECM. In addition to, the expression of apoptosis-related genes was determined using real-time PCR by extracting RNA according to the oxygen consumption of in vivo embryo. First, we found that the oxygen consumption significantly increased in blastocyst-stage embryos (blastocyst) compared to early blastocyst stage embryos, indicating that oxygen consumption reflects the embryo quality (Grade I). The oxygen consumption or GI blastocysts were significantly higher than those of GII blastocysts ($10.2{\times}10^{14}/mol\;s^{-1}$ versus $6.4{\times}10^{14}/mol\;s^{-1}$, p<0.05). Pregnant rate in recipient cow was 0, 60 and 80% in the transplantation of embryo with the oxygen consumption of below 10.0, 10.0~12.0 and over $12.0{\times}10^{14}/mol\;s^{-1}$, respectively. Apoptosis regulatory genes, Hsp-70.1 were significantly increased in over-10.0 group than below 10.0 group but in Caspase-3, Bax and P53 gene, there was no significant difference. In conclusion, These results suggest that measurement of oxygen consumption maybe help increase the pregnant rate of Hanwoo embryos.
This study was conducted to investigate the optimal artificial insemination (AI) time with diagnostic kit at ovulation time. We already applied the patent about the protein in the cow heat mucose in external reproductive tract. And we would examine the accuracy for detection of cow heat by the kit produced with the protein. Evaluation of optimal heat detection was tried two time at 12 hrs and 24 hrs after the heat. And then, AI service also performed two times with no relation to the results of heat diagnosis by heat detection kit and pregnancy rates were checked with rectal palpation on $60^{th}$ day after AI. Heat diagnostic results by kit in natural heat after 12 hrs in Hanwoo cows were showed 31.3~75.0% on positive in first heat detection and 33.3~100.0% on positve in second heat detection. In the $1^{st}$ positive results were significant different (p<0.05), but $2^{nd}$ positive were not. The results of heat detection showed different result on regional influence and individual cow effects. The pregnancy rates of first trial of heat detection were showed 34.4~78.7% on positive and 21.3~68.8% on negative after the diagnosis by heat detection kit. And the pregnancy rates of next trial of heat detection were showed 33.3~85.7% on positive and 14.3~66.6% on negative after the heat diagnosis. Both positive results of first trial and next trial also were showed significant different (p<0.05), but negative results were not. In positive result, first trial of total pregnancy rates was higher than the next trial of pregnancy, but there showed opposite results on negative results. In conclusion, the optimal heat detection kit is suitable to ordinary Hanwoo cows and it suggested that we have to improve the kit's accuracy by detecting the materials like proteins related optimal AI time.
The frequency and distribution of lymphoma caused by bovine leukemia virus (BLV) infection in various organs were investigated. Lymphoma samples were obtained from slaughtered cattle or from cattle submitted to the National Veterinary Research and Quarantine Service, Korea. Thirty female Holstein-Friesian dairy cattle aged over three years with the BLV-associated lymphoma were studied. None of the Korean native cattle (Hanwoo) had lymphoma in this study however. Lymphoma tissues were gray to pink in color, soft in consistency, and bulged from the cut surface. In advanced lymphoma tissues, there was great variety in the appearance of involved structures due to hemorrhage, necrosis, and/or calcification. Neoplastic tissues were observed in lymph nodes in all lymphoma cases. Intestine (96.4%), heart (88.9%), stomach (73.1%), and diaphragm (62.5%) were frequently involved with lymphoma. However, there was no lymphoma detected in liver. Large neoplastic masses, sometimes reaching the size of over 20 cm, were found in the abdominal cavities. It is suggested that metastasis of lymphomas occurs mainly via lymph based on gross observations; neoplasia may have been initiated in the serosal surface of the lung, heart, peritoneum, and numerous hollow organs in the abdominal cavity. Also many organs in the abdominal and thoracic cavity were affected by neoplastic tissues simultaneously. Characteristics observed in this study could be used as criteria to differentiate BLV-associated lymphoma from other nodular lesions in the slaughterhouse and as fundamental data to make clear the mechanism of metastasis or pathogenesis of EBL.
Objective: This study examines the genetic factors influencing the phenotypes (four economic traits:oleic acid [C18:1], monounsaturated fatty acids, carcass weight, and marbling score) of Hanwoo. Methods: To enhance the accuracy of the genetic analysis, the study proposes a new statistical model that excludes environmental factors. A statistically adjusted, analysis of covariance model of environmental and genetic factors was developed, and estimated environmental effects (covariate effects of age and effects of calving farms) were excluded from the model. Results: The accuracy was compared before and after adjustment. The accuracy of the best single nucleotide polymorphism (SNP) in C18:1 increased from 60.16% to 74.26%, and that of the two-factor interaction increased from 58.69% to 87.19%. Also, superior SNPs and SNP interactions were identified using the multifactor dimensionality reduction method in Table 1 to 4. Finally, high- and low-risk genotypes were compared based on their mean scores for each trait. Conclusion: The proposed method significantly improved the analysis accuracy and identified superior gene-gene interactions and genotypes for each of the four economic traits of Hanwoo.
Cherl-Joon Lee;Wonseok Shin;Minsik Song;Seung-Shick Shin;Yujun Park;Kornsorn Srikulnath;Dong Hee Kim;Kyudong Han
Genomics & Informatics
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제21권2호
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pp.24.1-24.7
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2023
Assays of clinical diagnosis and species identification using molecular markers are performed according to a quantitative method in consideration of sensitivity, cost, speed, convenience, and specificity. However, typical polymerase chain reaction (PCR) assay is difficult to quantify and have various limitations. In addition, to perform quantitative analysis with the quantitative real-time PCR (qRT-PCR) equipment, a standard curve or normalization using reference genes is essential. Within the last a decade, previous studies have reported that the digital PCR (dPCR) assay, a third-generation PCR, can be applied in various fields by overcoming the shortcomings of typical PCR and qRT-PCR assays. We selected Stilla Naica System (Stilla Technologies), Droplet Digital PCR Technology (Bio-Rad), and Lab on an Array Digital Real-Time PCR analyzer system (OPTOLANE) for comparative analysis among the various droplet digital PCR platforms currently in use commercially. Our previous study discovered a molecular marker that can distinguish Hanwoo species (Korean native cattle) using Hanwoo-specific genomic structural variation. Here, we report the pros and cons of the operation of each dPCR platform from various perspectives using this species identification marker. In conclusion, we hope that this study will help researchers to select suitable dPCR platforms according to their purpose and resources.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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