Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.29
no.4
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pp.555-560
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2000
Anthocyanin pigments of purple-fleshed sweet potato (Ipomoea batatas) were extracted with methanol containing 1% HCL and purified with Amberlite IRC-50 cation exchange resin column chromatography. ndividual pigments were isolated by paper chromatography. Among the four bands obtained by paper chromatography, three major bands were identified to be pure pigments by HPLC system. Two pigments were identified through the analysis of acyl moiety, sugar moiety, alkaline degradation products of aglycone, Rf value of paper chromatogram and retention time of HPLC. The anthocyanin pigments of purple-fleshed weet potato seemed to be composed of peonidin-3-diglucoside-5-glucoside acylated with caffeic or ferulic acids.
The content of lysophosphatidyl choline (LPC) in wheat starch lipids from six cultivar representing three classes of wheat was determined by a high performance liquid chromatography using UV-detection (HPLC-UV). The HPLC-UV assay had a sensitivity of LPC concentrations above $5{\mu}g/50{\mu}l$ and required 80 minutes per chromatogram.
We describe here the conditions of thin layer chromatography (TLC) and high pressures liquid chromatography (HPLC) to improve the analytical method of phosphotyrosine (p-Tyr) in biological sample. TLC was performed on silica plate with the mixture of propanol and water (2.1 : 1 v/v) as a mobile phase and $R_1$ values were 0.42, 0.39 and 0.33 for phosphotyrosine, phosphothreonine and phosphoserine, respectively. HPLC was performed on $NH_2$ column with a mobile phase of potassium biphosphate solution by UV deterction at 192 nm. The optimum condition of HPLC was obtained at 0.01 M, pH 4.5 with a clear separation within 12 min. These procedures have been applied to the analysis of phosphotyrosine obtained from tyrosine-phosphorylated enolase. Both TLC and HPLC methods were suitable to analyze tyrosine-phosphorylated protein without being affected by contaminants from hydrolysates.
In order to examine the presence of brassinosteroid substance in sea mustard(Undaria pinnatifida), leaves of sea mustard were extracted with MeOH. The extract was purified by slovent fractionation, counter current distribution, silica gel adsorption chromatography, charcoal adsorption chromatography, Bondesil chromatography, and reverse phase HPLC, successively. The activity was monitored by the rice inclination test and its prescence could be confirmed in each purification step. Although sea mustard contained a less amount of the active substance than the vegetative tissue of higher plants, brassinosteroid was clearly present endogenously in sea mustard. We acknowledge that our work is probably the first publication reporting the presence of brassinosteroid in marine algae plants.
Complex, ill-defined mixtures of natural origin are often used as nutrients in the production of biological products through microbial fermentation. Product yields are affected by variation in these natural products. Yeast extract is a typical example of these natural products. Since it is a mixture of amino acids, peptides and nucleic acids, its composition is not well characterized. In this study, we investigated the properties of thiamine hydrochloride, riboflavin and pyridoxine hydrochlride in yeast extract by using a gel filtration chromatography, ion exchange chromatography and high performance liquid chromatography. Yeast extract solution was fractionated by gel filtration chromatography and ion exchange chromatography, and then, each fraction was analyzed by using a high performance liquid chromatography.
Kil, Hyun Woo;Rho, Taewoong;Seo, Young Ju;Yu, Aram;Yoon, Kee Dong
Natural Product Sciences
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v.26
no.3
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pp.236-243
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2020
Salvia plebeia R. Br. is a plant which has been used as an edible crop and traditional medicine in Asian countries. In this study, HPLC-PDA analysis and countercurrent chromatography (CCC) coupled with reversed-phase (RP) HPLC method were applied to isolate ten isolates from 3.3 g of n-butanol soluble extract from hot-water extract of S. plebeia. The use of CCC enabled us to efficiently fractionate the starting material with less sample loss and facilitate the isolation of compounds from S. plebeia extract using RP-HPLC. The isolates were determined to be caffeic acid (1), 6-hydroxyluteolin 7-O-β-D-glucoside (2), eudebeiolide B (3), (R)-rosmarinic acid (4), homoplantaginin (5), eudebeiolide D (6), plebeiolide C (7), salpleflavone (8), eupafolin (9) and hispidulin (10) based on the spectroscopic evidence.
High-performance countercurrent chromatography (HPCCC) coupled with reversed-phase highperformance liquid chromatography (RP-HPLC) method was developed to isolate dihydrophaseic acid 3'-O-${\beta}$-D-glucopyranoside (DHPAG) from the extract of Nelumbo nucifera seeds. Enriched DHPAG sample (2.3 g) was separated by HPCCC using ethyl acetate/n-butanol/water system (6:4:10, v/v/v, normal-phase mode, flow rate: 4.0 mL/min) to give 23.1 mg of DHPAG with purity of 88.7%. Further preparative RP-HPLC experiment gave pure DHPAG (16.3 mg, purity > 98%). The current study demonstrates that utilization of CCC method maximizes the isolation efficiency compared with that of solid-based conventional column chromatography.
Free phenolic acids (FPA), soluble phenolic acid esters (SPA) and insoluble-bound phenolic acids (IPA) were extracted from defatted Perillae semen flour and the antioxidative components in FPA extract was separated by column chromatography and HPLC. Total phenolic content of defatted Perillae semen flour was 0.38% as chlorogenic acid and each percent ratio of the content of FPA, SPA and IPA to total phenolic content was 71.1%, 15.8% and 13.1%, respectively. The antioxidative activity was compared by measuring of electron donating ability (EDA) and thiobarbituric acid value (linoleic acid substrates). The FPA extract was showed the highest antioxidative activity among the three kinds of phenolic extracts. The FPA extract showing the highest antioxidative activity was separated by silica gel column chromatography and then the separated fractions were compared in terms of antioxidative activity. The fractions of acetone : methanol (8 : 2) showing the highest antioxidative activity was further separated by HPLC. Five fractions (F-I, F-II, F-III, F-IV and F-V) were observed on the HPLC chromatogram and F-I fraction showed the highest antioxidative activity.
Relatively large quantity of the major components of saponin, $ginsenoside-Rb_1,\;-Rb_2,\;-Rc,\;-Rd,\;-Re\;and\;-Rg_1$ from Panax ginseng C.A. Meyer were isolated using preparative and semipreparative high performance liquid chromatography, and analyzed by analytical HPLC. The application of HPLC for isolation of ginsenosides was not only very effective for rapid analysis but also reduced the isolation time. The isolation capacity of pure ginsenosides was $30{\sim}50mg/hr$.
In order to explore the brassinosteroid-active component in Cassia tora, methanol extract of immature seeds was purified by sequences of solvent fractionation, silica gel adsorption chromatography, Sephadex LH-20 chromatography, charcoal adsorption chromatography and Bondesil chromatography. The activity of brassinosteroid was monitored by the rice inclination test and its presence could be confirmed in each purification step. The purified active components were separated by silica gel adsorption chromatography. Brassinosteroid substances in separated active fractions were identified as teasterone, castasterone, brassinolide by TLC and HPLC. Our work is probably the first report of endogenous brassinosteroid in Cassia tora. The content of brassinosteroid in Cassia tora as converted into brassinolide was $3.5{\sim}5.5\;ng/g$ fresh weight. The order of brassinosteroid contents was toward to be teasterone, castasterone, brassinolide.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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