Nef is a lentiviral protein involved in pathogenesis of AIDS, but its molecular mechanism of action remains incompletely understood. Here we report the isolation of the interacting protein with the HIV-1 Nef, using the yeast two hybrid system for expression cloning. One of the positive colonies was selected as the final candidate for the interacting protein gene. The nucleotide sequencing revealed that this interacting protein is Human Ikaros/LyF-1. This protein interacted with the C-terminal region of Nef specifically in yeast system, not with the N-terminal region. This interaction was also confirmed by in vitro binding assay.
Kim, Ha-Won;Shim, Mi-Ja;Choi, Eung-Chil;Kim, Byoung-Kak
Archives of Pharmacal Research
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제20권5호
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pp.425-431
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1997
To examine components of Ganoderma lucidum for anti-human immunodeficiency virus (HIV) activity, the aqueous extracts of its basidiocarps were separated into high-molecular-weight (HMF) and low-molecular-weight (LMF) fractions. These fractions were used in XTT [2,3-bis (2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-5-[(phenylamino) carbonyl]-2H-tetrazolium hydroxide] antiviral assay which can quantitatively measure cytopathic effects of HIV-1 on CEM, human T lymphoblastoid cell line. The CEM cell line added with serial diluted HMF or LMF was cultured in the absence or presence of HIV-1. The results showed that the LMF of the aqueous extract strongly inhibited cytopathic effect of the target cell induced by HIV-1. When two-fold serially diluted LMF ranging from $40.97{\mu}g/ml$4 to 125.00 .mu.g/ml was added to the virus-free culture system, no toxicity on the target cells was detected in all the concentrations tested. However, when it was added to the HIV-infected culture system, the viabilities of the target cell reached a plateau recovering its viabilities to 71.7% and 82.5% in experiment-1 and -2 at 15.60 .mu.g/ml, respectively. The cell viabilities were then gradually decreased but maintained at more than 50% above 31.20 .mu.g/ml concentration. On the contrary, HMF did not prevent any HIV-induced cytopathic effect at any concentrations tested on this cell line. From these results, negligible toxicities were observed by both HMF and LMF of G. luciolum, and recovery of cell viability in HIV infected target cell was induced only by LMF of the carpophores.
Kim, Hwa Sun;Nam, Ho-Woo;Ahn, Hye-Jin;Lee, Sang Haak;Kim, Yeong Hoon
Parasites, Hosts and Diseases
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제60권5호
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pp.327-338
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2022
This study determined the recent status and trend of Pneumocystis jirovecii pneumonia (PcP) in the non-human immunodeficiency virus (HIV) (non-HIV-PcP) and HIV (HIV-PcP) infected populations using data from the Health Insurance Review & Assessment Service (HIRA) and the Korea Disease Control and Prevention Agency (KDCA). SaTScan and Join-point were used for statistical analyses. Non-HIV-PcP cases showed an upward trend during the study period from 2010 to 2021, with the largest number in 2021 (551 cases). The upward trend was similar until 2020 after adjusting for the population. Seoul had the highest number of cases (1,597) in the non-HIV-PcP group, which was the same after adjusting for the population (162 cases/1,000,000). It was followed by Jeju-do (89 cases/1,000,000). The most likely cluster (MLC) for the non-HIV-PCP group was Seoul (Relative Risk (RR)=4.59, Log Likelihood Ratio (LLR)=825.531), followed by Jeju-do (RR=1.59, LLR=5.431). An upward trend was observed among the non-HIV-PcP group in the Jeju-do/Jeollanam-do/Jeollabuk-do/Gyeongsangnam-do/Busan/Daejeon/Daegu/Ulsan joint cluster (29.02%, LLR=11.638, P<0.001) located in the southern part of Korea. Both women and men in the non-HIV groups showed an overall upward trend of PcP during the study period. Men in the 60-69 age group had the highest annual percentage change (APC 41.8) during 2014-2019. In contrast, the HIV groups showed a falling trend of PcP recently. Men in the 60-69 age group had the most decrease (APC -17.6) during 2018-2021. This study provides an analytic basis for health measures and a nationwide epidemiological surveillance system for the management of PcP.
HIV-1 protcase 를 이용한 in vitro assay system을 개발하기 위하여HIV-1 protease유전자를 Ecoli 발현 벡터를 이용하여 발현시켰다. 가능성있는 Protease유전자의 생간 및 분래를 용이하게 하기위하여 maltose binding protein 의 fusion protein을 이용하였으며 protease 의 autoprocessing을 maltose binding protein 의 polyclonal 항체로 확인하였다, 발현된 protease는 일련의 chromatography 방법 (DEAE, SE cellulose, Superose 12, Mono S) 으로 순수하게 분리되었다. 정제된 protease 는 SDS-PAGE분석으로 단일밴드를 보여주었고, 합성된 undecapeptide를 기질로 하였을때 Km 이 9.8$\mu$M 이었다. 효소 assay 를 위해 기질이 protease 에 의해 절단된 생성물을 HPLC를 사용하여 분석하였다. Protease의 억제제 탐색을 위해 유기합성한 몇개의 기질유사체와 HIV-1 증식을 억제하는 것으로 알려진 천연물의 억제정도를 조사하여 보았다. 이들 test 에 사용한 물질들은 높은 농도에서 protease 의 활성을 저해하는 것으로 보아 좋은 억제제는 아닌것으로 시료되나 본 연구를 통하여 확립된 in vitro assay system 은 추후에도 억제제 탐색을 위하여 계속 활용될 수 있을 것이다.
Exploring the epidemiological trend of HIV/AIDS is required for making the national AIDS policy. In this study, the trend of HIV/AIDS incidence, rout of transmission and some characteristics of AIDS for the past 11 years in Korea using the reported cases from the national STD screening scheme were reviewed. Based on the results, the trend of main route of transmission according to the year was established by stage and the HIV/AIDS cases in this year was estimated and that to the year 2000 was projected by 'Epimodel' programme. The results were as follows : 1. Of the total infected persons, 76% were in their twenties and thirties, socioeconomically and sexually active age groups. While the transmission by sexual contact overseas was decreasing, the infection through domestic heterosexual and homosexual contact was increasing. 2. In the middle of the 1980's, the infected persons were mainly prostitutes infected through heterosexual contact with the HIV positive foreigner in this county(stage 1). And in the late of the 1980's the main source of infection was the sexual contact overseas and the domestic heterosexual contact(stage 2). Since the early of the 1990's, the infection through the heterosexual contact with non-regular sexual partner in this country has increased rapidly(stage 3), which was the evidence of the possibility of HIV epidemics. After that, it was expected that the infection through the homosexual contacts, the heterosexual contacts with commercial sex workers outside and the non-regular sexual contact inside of this country would increase continuously. In the result, the occurrence of neonatal infection by vertical transmission was expected(stage4). 3. The number of HIV/AIDS was estimated at 572 to 2,313 and the projected number of HIV/AIDS to the you 2000 was around 5,800 including 627 AIDS patients. For the further study on the estimation and projection of HIV/AIDS, it was suggested that the sampling survey on the HIV infection rate in the high risk groups and the sentinel hospital surveillance system should be conducted.
We consider a model of HIV infection with various compartments, including target cells, infected cells, viral loads and immune effector cells, to describe HIV type 1 infection. We show that the proposed model has one uninfected steady state and several infected steady states and investigate their local stability by using a Jacobian matrix method. We obtain equations for adjoint variables and characterize an optimal control by applying Pontryagin's Maximum Principle in a linear control problem. In addition, we apply techniques and ideas from linear optimal control theory in conjunction with a direct search approach to derive on-off HIV therapy strategies. The results of numerical simulations indicate that hybrid on-off therapy protocols can move the model system to a "healthy" steady state in which the immune response is dominant in controlling HIV after the discontinuation of the therapy.
In Korea, all domestic made test systems for detecting antibodies in HIV-1 contain the antigens from human immunodeficiency type 1 (HIV-1) subtype B. However, because HIV-1 subtype O is significantly different in amino acid sequences from all other subtypes of HIV-1, there has been a need for developing a test for detecting antibodies in subtype O. For this purpose, the entire nucleotide sequence corresponding to the extracellular domain of the transmembrane glycoprotein of HIV-1 subtype O was synthesized with consideration of Escherichia coli condon usage. Various regions of the extracellular domain were cloned into E. coli expression vectors and tested for levels of protein production. The nucleotide sequence, named ECTM, that can encode a 129 amino acid-long peptide, was found to be expressed at a high level in E. coli. The protein of approximately 17 kDa specifically reacted with sera from individuals infected with HIV-1 subtype O. The ECTM protein was purified to near homogeneity by the CM-T gel chromatography, using concentrated, denatured inclusion bodies. In Western blot analysis, the purified viral antigen reacted with sera from individuals infected with subtype O more efficiently than subtype B. The enzyme linked immunoabsorbent assay (ELISA) system was developed using the subtype O viral protein and compared with the commercially available kit lacking the antigens from subtype O. The ELISA kit containing the subtype O antigen ECTM alone efficiently reacted with sera from individuals infected with subtype O. The subtype O antigen-containing kit produced a positive absorbence even when sera were diluted 512-fold, suggesting a high sensitivity. The commercially available kit also reacted with subtype O sera, but produced a negative result at a dilution of 8-fold. Our results suggest that the currently available kit may not be able to efficiently detect subtype O sera and that the viral protein developed in this study may be added to the current system to maximize the detection of sera from individuals infected with subtype O.
This study investigates the population model of the spread of HIV/AIDS which the infection is generated by an infectious individual in a population of susceptible. A mathematical model is presented for the transmission dynamics of HIV infection within the communities of homosexual males. The pattern on the epidemic character of HIV, the causative agent of AIDS, was analysed by the mathematical model of AIDS system which is derived according to the ecological relationship between five epidemilogic states of individuals. The computer simulation was performed using real data and the following conclusions are drawn on the basis of the simulations. 1. The model structure and the algorithm described n the thesis is good. 2. In proportion to increase Ro, the population of AIDS patient increases and the time of its widespread reaches earlier. 3. The AIDS patients will be maximum between 7 and 21 years after an attack of AIDS and widespread between 10 and 20 years. 4. Considering the properties of the incubation periods, the maximum number of infected person is increased, and the attack rate is decreased.
Kim, Gwang Suk;Chu, Sang Hui;Park, Yunhee;Choi, Jun Yong;Lee, Jeong In;Park, Chang Gi;McCreary, Linda L.
대한간호학회지
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제45권3호
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pp.439-448
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2015
Purpose: The purpose of this study was to examine validity and reliability of Webel and colleagues'HIV Self-Management Scale when used with a Korean sample. Methods: The original 20-item HIV Self-Management Scale was translated into Korean using translation and back-translation. Nine HIV nurse experts tested content validity. Principal component analysis (PCA) and confirmatory factor analysis (CFA) of data from 203 patients was used to test construct validity. Concurrent validity was evaluated using correlation with patients'self-rating as a "mart patient"measured using a visual analogue scale. Internal consistency was tested by Cronbach' alpha coefficients. Results: All items were rated as having satisfactory content validity. Based on PCA and consideration of conceptual meaning, a three-factor solution was selected, explaining 48.76% of the variance. CFA demonstrated the adequacy of the three-domain structure of the construct HIV self-management: daily self-management health practices, social support and HIV self-management, and chronic nature of HIV self-management. Goodness-of-fit indices showed an acceptable fit overall with the full model (${\chi}^2/df_{(164)}=1.66$, RMSEA=0.06, SRMR=0.05, TLI=0.91, and CFI=0.92). The Korean version of the HIV Self-Management Scale (KHSMS) was significantly correlated with patients'self-rated smart patient (r=.41). The subscale Cronbach' alpha coefficients ranged from .78 to .81; alpha for the total scale was .89. Conclusion: The KHSMS provides a valid and reliable measure of self-management in Korean patients with HIV. Continued psychometric testing is recommended to provide further evidence of validity with this population.
The microculture XTT antiviral assay method is used to quantitate HIV-1 induced cytopathic effects as modulated by test substances. This relatively simple assay facilitated the safe and rapid determination of in vitro antiviral activity of selected chemicals as well as direct cytotoxicity. This experiment also confirmed that this system measures infection and subsequent viral replication in target cells and XTT formazan formations correlated with the accumulation of extracellular virions, as measured by quantitative HIV-1 induced syncytium foramtion. The present results with Glycyrrhizin using this in vitro culture system demonstrated that effective dose, EC50(the concentration at which increases XTT formazan production in infected cultures to 50% of that in untreated, uninfected controls) was 250ml. As comparison, AZT was included in this experiment and demonstrated that EC50 AZT of was 0.05g/ml, approximately 5,000 times more potent than Glycyrrhizin based on EC50 ratio's alone. However, this potency is limited by severe cytotoxicity of AZT, while Glycyrrhizin is approximately 16 times less toxic(IC50 of Glycyrrhizin 800 and AZT 51 g/ml). While AZT's anti-HIV-1 viral activity is mediated by inhibition of reverse transcriptase of the virus, Glycyrrhizin faild to demonstrate any inhibitory activity against reverse transcriptase. Further study is necessary in order to understand the precise mechanisms of Glycyrrhizin action against HIV-1 viruses. Althouth Glycyrrhizin is less effective antiviral agent than AZT, much less toxicity of Glycyrrhizin is desirable in terms of chronic treatment. Combination treatment of AZT and Glycyrrhizin may be therapeutically beneficial. Clinical effectiveness of two drug combination therapy for AIDS patient is unknown at this time. However, this experimental investigation presents the scientific rational basis for such therapeutic approach.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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