Cho, Jin Hwa;Lee, Phil Young;Son, Woo-Chan;Chi, Seung-Wook;Park, Byoung Chul;Kim, Jeong-Hoon;Park, Sung Goo
BMB Reports
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제46권12호
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pp.588-593
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2013
Apoptosis, programmed cell death, is a process involved in the development and maintenance of cell homeostasis in multicellular organisms. It is typically accompanied by the activation of a class of cysteine proteases called caspases. Apoptotic caspases are classified into the initiator caspases and the executioner caspases, according to the stage of their action in apoptotic processes. Although caspase-3, a typical executioner caspase, has been studied for its mechanism and substrates, little is known of caspase-6, one of the executioner caspases. To understand the biological functions of caspase-6, we performed proteomics analyses, to seek for novel caspase-6 substrates, using recombinant caspase-6 and HepG2 extract. Consequently, 34 different candidate proteins were identified, through 2-dimensional electrophoresis/MALDI-TOF analyses. Of these identified proteins, 8 proteins were validated with in vitro and in vivo cleavage assay. Herein, we report that HAUSP, Kinesin5B, GEP100, SDCCAG3 and PARD3 are novel substrates for caspase-6 during apoptosis.
To clarifiy the effects of Scolopendrae corpus(S-C) on turmor promotion in two-stage carcinogenesis in mice was investigated. In vivo system, S-C were seen to gave an inhibitory activity on TPA-induced mouse ear edema. In addition, the S-C were proved to have antitumor-promoting activity in two-stage mouse skin carcinogenesis induced by DMBA and two-stage mouse lung carcinogenesis induced by 4-NQO as a initiator plus TPA and glycerol as a promoter. Moreover, S-C significantly exhibited an cytolytic effect in $HepG_2$ cells and showed significant antitumor activity against Sarcoma-180 bearing mice by oral administration. These results suggest that S-C could be effective in adjuvant chemotherapy for human cancer.
Since sequencing of randomly selected cDNA clones has been known to be a powerful approach to obtain information on gene expression pattern in specific cells or tissues, we have analyzed a 3'-directed cDNA library of vegetative mycelia of A. nidulans by single-pass sequencing of hundreds of randomly selected clones. Sequencing of 292 cDNA clones yielded 209 gene signatures (GSs) probably representing highly or lesser expressed genes in the vegetative mycelia. Among the 209 GSs, 25 (79 cDNA clones) appeared more than once and 184 only once. One GS appeared at a highest frequency of 6 times, 2 GSs5 times, 4 GSs 4 times, a GSs 3 times and 16 GSs twice. About 6.6% GSs comprizing of 13 GSs showed alternative polyadenylation. Among 23 redundant GSs, three were common in both mycelia and sexual organs, and 22 were probably mycelia-specific. Out of 209 GSs, 36 were identified in GenBank showing of 70% or greater similaritis. Only six GSs were for A. nidulans genes, and 13 GSs were of DNA or genes encoding cytoplasmic or organellar proteins. This pattern is similar to those in the human HepG2 cell line and in human colonic mucosa, although very few genes for nuclear proteins and for protein synthesis were in A. nidulans.
한국 남부지방의 매화노루발(Chimaphila japonica Miq.)의 유전적 다양성 및 집단구조를 조사하기 위해 전기영동을 실시하였다. 집단내 다형현상을 나타내는 대립유전자는 48.7%였다. 종 및 집단 수준에서 유전적 다양도는 각각 0.278, 0.222로 나타났고, 집단간 분화 정도는 비교적 낮았다( $G_{ST}$ =0.079). 조사한 일곱 집단내 자가 수분계수는 0.355였다. $G_{ST}$ 로부터 간접적으로 구한 세대당 집단간 이동개체수는 약간 높게 나타나므로 한반도 남부 지방의 집단간 유전자 이동이 보편적으로 이루어 지고 있음을 시사한다 (Nm=2.61). 고정지수 분석에 의하면 이형접합자의 부족이 여러 집단 및 대립유전자좌위에서 나타났다. 이 종에서 유전적 다양도가 고양된 주된 이유는 광범위한 분포, 다년생, 영양번식, 곤충에 의한 타가수분, 그리고 바람에 의한 화분분산이 빈번하게 이루어진 것으로 사료된다.
To enhance therapeutic effects of insulin-sensitizing adipokine, ADN gene and potent agonists, rosiglitazone for the $PPAR{\gamma}$, cationic liposomes as non-viral vectors were formulated. The particle size and zeta potential of drug loaded and unloaded cationic liposomes were investigated. The complex formation between cationic liposomes and negatively charged plasmid DNA was confirmed and the protection from DNase was observed. In vitro transfection was investigated in HepG2, HeLa, and HEK293 cells by mRNA expression of ADN. Encapsulation efficacy of rosiglitazone-loaded liposomes was determined by UV detection. Particle sizes of cationic liposomes were in the range of 110-170 nm and those of rosiglitazone-loaded cationic liposomes were in the range of 130-180 nm, respectively. Gel retardation of complexes indicated that the complex was formed at weight ratios of cationic lipid to plasmid DNA higher than 20:1. Both complexes protected plasmid DNA from DNase either drug free or drug loading. Encapsulation efficiency of rosiglitazone-loaded emulsion was increased by drug dose. The mRNA expression levels of ADN were dose-dependently increased in cells transfected with plasmid DNA. Therefore, cationic liposomes could be potential co-delivery system for drug and gene.
A key input for the assessment of Human Error Probabilities (HEPs) with Human Reliability Analysis (HRA) methods is the evaluation of the factors influencing the human performance (often referred to as Performance Shaping Factors, PSFs). In general, the definition of these factors and the supporting guidance are such that their evaluation involves significant subjectivity. This affects the repeatability of HRA results as well as the collection of HRA data for model construction and verification. In this context, the present paper considers the TAsk COMplexity (TACOM) measure, developed by one of the authors to quantify the complexity of procedure-guided tasks (by the operating crew of nuclear power plants in emergency situations), and evaluates its use to represent (objectively and quantitatively) task complexity issues relevant to HRA methods. In particular, TACOM scores are calculated for five Human Failure Events (HFEs) for which empirical evidence on the HEPs (albeit with large uncertainty) and influencing factors are available - from the International HRA Empirical Study. The empirical evaluation has shown promising results. The TACOM score increases as the empirical HEP of the selected HFEs increases. Except for one case, TACOM scores are well distinguished if related to different difficulty categories (e.g., "easy" vs. "somewhat difficult"), while values corresponding to tasks within the same category are very close. Despite some important limitations related to the small number of HFEs investigated and the large uncertainty in their HEPs, this paper presents one of few attempts to empirically study the effect of a performance shaping factor on the human error probability. This type of study is important to enhance the empirical basis of HRA methods, to make sure that 1) the definitions of the PSFs cover the influences important for HRA (i.e., influencing the error probability), and 2) the quantitative relationships among PSFs and error probability are adequately represented.
본 논문은 새로운 항암소재를 검색하기 위하여 식품으로부터 곰팡이를 분리하고 그 대사산물을 이용하여 수종의 암세포주의 생육을 대한 억제 물질을 탐색하고자 하며, 이를 바탕으로 새로운 항생물질 연구의 기초자료를 확보하고 결과물의 응용도를 모색하고자 실험을 수행하였다. 식품으로부터 총 72종의 곰팡이를 분리 하였고, 전면 및 후면의 색, 모양. 성장속도에 따라 4가지 group로 나누어 실험에 사용하였다. 그리고 그 대사산물(배양무, 균체)을 ethly acetate로 추출하여, 총 6종의 암세포주에 대하여 MTT assay을 실험하였다. 그 ruf과 A, B, C, D group 중 D group에서 가장 높은 증식 억제를 확인 하였으며, D4의 증식억제 효과가 가장 높음을 확인하였다. 위암 세포주인 KATO III, AGS, SUN-668에 대한 증식억제 효과는 30-98%로 나타났으며, 간암 세포주인 Hepa1c1c7, HepG2에는 10-98%, 유방암 세포주인 MDA-MB-231에 대해서는 25-90%의 증식억제 효과를 확인하였다. 배양물과 균체의 항암성은 개체에 따라 약간의 차이는 있으나, 배양물이 대부분 우수한 것으로 확인되었다.
The Strain TFM-7, Which has an antitumor effect, was isolated from Kefir and identified based on analysis using the API 50 CHL kit and 265 rDNA sequencing. Strain TFM-7 was confirmed to belong to the genus Kluyveromyces. Analysis of the 265 rDNA nucleotide sequences found strain TFM-7 to be related to Kluyveromyces marxianus. NRRL Y-828IT. K. marxianus. TFM-7 was cultured with potato dektrose broth medium at $27^{\circ}C$ for 72 hr, and its inhibition effects on the proliferation of seven tumor cell lines and a normal cell line were assessed using the MTT assay. The antitumor effects and growth characteristics of K. marxianus TFM-7 were investigated during a culture period of 7 days. By the $3^{rd}\;day$, K. marxianus TFM-7 showed a dry cell weight 2.39 g/L, a pH of 4.39, an ethanol content of 0.89%, and an inhibition effect on the proliferation of seven tumor cell lines above 50%, except for A-549 tumor cell line. K. marxianus TFM-7 was the most effective at inhibiting the growth of Hep-2 cell line among all tumor cell lines tested. Growth inhibition of a normal cell line, NIH/3T3, was less than 35%, suggesting a decreased level of cytotoxicity toward normal cells. These results indicate that K. marxianus TFM-7 may have used as a yeast strain with antitumor activity.
High Electromagnetic Field (EMF) with an intensity of 1 mT (Tesla) inhibited the growth of both human normal lung and immune T cell down to $20-30\%$, compared to that of an unexposed case. The human T-cells, Jurkat, were more severely affected by EMF than the human lung cells, which showed a relatively slow cell growth and substantial releas of $Ca^+2$ (3.5 times higher than the human T-cells). However, the growth of hepatoma carcinoma, Hep3B, was enhanced by twice that of an unexposed case. The EMF intensity and exposure time did not affect the growth of the cancer cells very much, while it significantly affected the growth of normal cells. Accordingly, it is possible that EMFs may play a role in the initiation of cancer. The EMFs disturbed the signal transduction and membrane systems, such that a five times higher amount of PKC-${\alpha}$ was released from the cell membrane than in the control. Extended exposure to EMFs, for more than 48 hours, also led to 1 $90\%$ necrotic death pattern from apoptotic cell death. Finally, EMF at an intensity of 1mT with a 24-T exposure promoted the differentiation of HL-60 cells to monocytes/macrophages, possibly causing potential acute leukemia.
The antioxidant and anticancer activities of Phellinus linteus, Inonotus obliquus, and Pleurotus ostreatus according to extraction methods were measured. The contents of polyphenolic compounds were higher in fermented extracts than those in water extracts. The contents were 192.4mg/100 $m{\ell}$ for Inonotus obliquus vinegar, 186.9 mg/100 $m{\ell}$ for Phellinus linteus vinegar, and 156.5 mg/100 $m{\ell}$ for Pleurotus ostreatus vinegar, respectively. EDA(electron donating ability) in Phellinus linteus that was highest among mushrooms was 83.9% in the water extract and 96.8% in the fermented extract. The growth of stomach cancer cells, SNU-719 was inhibited 62.4%, 65.5%, and 53.0% by Phellinus linteus vinegar, Inonotus obliquus vinegar, and Pleurotus ostreatus vinegar, respectively and also the growth of liver cancer cells, Hep3B was inhibited 67.1%, 68.3%, and 57.6% by Phellinus linteus vinegar, Inonotus obliquus vinegar, and Pleurotus ostreatus vinegar, while the growth of normal cell, DC2.4 was not affected. Even though Phellinus linteus and Inonotus obliquus showed higher inhibition in cancer cell growth, Pleurotus ostreatus can be efficiently used for antioxidant and anticancer activities due to their cheap price in the market.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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