• 제목/요약/키워드: H-Chelate

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Immobilized Metal Ion Affinity Chromatography of Genetically Engineered Hirudin Variants

  • Chung, Bong-Hyun;Chu, Chang-Woong;Chang, Yong-Keun;Sohn, Jung-Hoon;Rhee, Sang-Ki
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제3권3호
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    • pp.161-167
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    • 1993
  • Immobilized metal ion affinity chromatography (IMAC) was used to separate various types of recombinant hirudins from the culture broth. The wild type hirudin exhibited a retention in Cu(II)-chelated affinity chromatgoraphy since it contained a single exposed histidine at position 51. To obtain a stronger retention on an IDA-Cu(II) column, the hirudin variants were genetically engineered to contain one or two histidine (s) more than the wild type. While the affinity of the variants for IDA-Cu(II) ligand increased in comparison to that of the wild type, the antithrombin activities reduced to a certain degree. Cu(II), Ni(II) and Zn(II) ions were applied separately to the metal chelate column to investigate ligand specificity with respect to protein retention. As a result, the Cu(II) chelated chromatography gave the best resolution for all the hirudins tested and appeared to be the only IMAC that could be used generally for the purification of hirudins with a decreasing pH gradient.

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$Cu^{2+}$-Anthraquinone Complexes : Formation, Interaction with DNA, and Biological Activity

  • Ko, Thong-Sung;Maeng, Hack-Young;Park, Mi-Kyeong;Park, Il-Hyun;Park, In-Sang;Kim, Byoung-Sun
    • Bulletin of the Korean Chemical Society
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    • 제15권5호
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    • pp.364-368
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    • 1994
  • Growth inhibition potency of the anthraquinones, anthraquinone-1,5-disulfonic acid and carminic acid, for Sarcoma 180 and L1210 leukemia cells in vivo and in vitro, was induced by the divalent transition metal ion, $Cu^{2+}$. On the other hand spectroscopic titration data show that the anthraquinone drugs form $Cu2^+$ chelate complexes (carminic acid : $Cu^{2+}$ = 1 : 6; anthraquinone-1,5-disulfonic acid : $Cu^{2+}$ = 1 : 3). Furthermore the $Cu^{2+}$-drug complexes associate with DNA to form the $Cu^{2+}$-anthraquinone-DNA ternary complexes. The formation of the complexes was further supported by the $H_2O_2-dependent$ DNA degradation, which can be inhibited by ethidium bromide, caused by the $Cu^{2+}$-drug complexes. It is likely that the $Cu^{2+}$-mediated cytotoxicity of the anthraquinone drugs is related with the $Cu^{2+}-mediated$ binding of the anthraquinone drugs to DNA and DNA degradation.

Carbon Particle-Doped Polymer Layers on Metals as Chemically and Mechanically Resistant Composite Electrodes for Hot Electron Electrochemistry

  • Habiba, Nur-E;Uddin, Rokon;Salminen, Kalle;Sariola, Veikko;Kulmala, Sakari
    • Journal of Electrochemical Science and Technology
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    • 제13권1호
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    • pp.100-111
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    • 2022
  • This paper presents a simple and inexpensive method to fabricate chemically and mechanically resistant hot electron-emitting composite electrodes on reusable substrates. In this study, the hot electron emitting composite electrodes were manufactured by doping a polymer, nylon 6,6, with few different brands of carbon particles (graphite, carbon black) and by coating metal substrates with the aforementioned composite ink layers with different carbon-polymer mass fractions. The optimal mass fractions in these composite layers allowed to fabricate composite electrodes that can inject hot electrons into aqueous electrolyte solutions and clearly generate hot electron- induced electrochemiluminescence (HECL). An aromatic terbium (III) chelate was used as a probe that is known not to be excited on the basis of traditional electrochemistry but to be efficiently electrically excited in the presence of hydrated electrons and during injection of hot electrons into aqueous solution. Thus, the presence of hot, pre-hydrated or hydrated electrons at the close vicinity of the composite electrode surface were monitored by HECL. The study shows that the extreme pH conditions could not damage the present composite electrodes. These low-cost, simplified and robust composite electrodes thus demonstrate that they can be used in HECL bioaffinity assays and other applications of hot electron electrochemistry.

역상 액체 크로마토그래피에 의한 Pd(II) - Isonitrosoethylacetoacetate Imine 유도체 킬레이트들의 용리 거동 (Elution Behavior of Pd(II) - Isonitrosoethylacetoacetate Imine Chelates by Reversed Phase High Performance liquid Chromatography)

  • 김인환;신한철;이만호;윤태건;강창희;이원
    • 분석과학
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    • 제5권4호
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    • pp.389-399
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    • 1992
  • 역상 액체 크로마토그래피에 의하여 $Pd(IEAA-NR)_2$ (R=H, $CH_3$, $C_2H_5$, $n-C_3H_7$, $C_6H_5-CH_2$, $n-C_4H_9$) 킬레이트의 용리 거동을 Micropak MCH-5 분리관을 사용하여 연구하고, 아울러 동시 분리분석에 미치는 흐름속도, 이동상의 세기, 분리관의 온도 등 여러 가지 인자들의 영향을 조사 검토하였다. 용리액으로 methanol/water의 이성분 용매를 사용하였으며, 모든 금속 킬레이트의 용매 세기 인자는 $0{\leq}log\;k^{\prime}{\leq}1$의 범위임을 확인하였고, 각 금속 킬레이트의 log k'과 이성분용매 중의 물의 부피분율을 도시한 결과 직선 관계가 성립하였다. 또한 뱃치법으로 측정한 분포비 ($D_c$)값과 k'값을 도시하여 본 결과 직선관계가 성립됨으로써 금속 킬레이트의 용리 메카니즘이 주로 소용매성 효과, 즉 소수성효과에 기인함을 확인하였다. 또한 금속 킬레이트의 머무름에 미치는 용량 인자와 온도와의 관계를 알아본 결과 좋은 직선성을 나타내고 있으며, 직선의 기울기로부터 엔탈피 (${\Delta}H$)와 엔트로피 (${\Delta}S$)를 구하고, 엔탈피와 용량 인자와의 관계로부터 금속 킬레이트의 머무름이 반드시 엔탈피와 관련되어 있다고 할 수 없으며 구조적 성질과도 관계가 있는 것으로 여겨진다.

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고성능 액체크로마토그래피(HPLC)를 이용한 3가, 6가 크롬의 동시정량에 관한 연구 (Simultaneous Determination of Chromium (III) and Chromium(VI) by High Performance Liquid Chromatography(HPLC))

  • 노재훈;김치년;김춘성;김규상
    • 한국산업보건학회지
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    • 제4권2호
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    • pp.189-197
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    • 1994
  • Analytic methods for Cr(VI) level in industrial hygienic field were suggested by the National Institute for Occupational Safety and Health(NIOSH method 7600, 7604). There were growing needs for measurement of Cr(III) and Cr(VI) levels simultaneously. Two analytical methods were suggested to determine Cr(III) and Cr(VI) levels simultaneously. The one is method by using reversed phase high peformance liquid chromatography(HPLC) and the other is by using ion exchange HPLC. The purpose of this work was to evaluate the usefulness of these two analytic methods. For the difference of ionic charges of Cr(III)-ethylendiamine tetraacetic acid(EDTA) chelate and $CrO_4{^-2}$, we could detect them simultaneously by ion exchange HPLC. Also, we attempted to determine the levels of Cr(III) and Cr(VI) chelated with sodium diethyldithiocarbamate(NaDDTC) by using reversed phase HPLC. The confirmation of Cr(III) and Cr(VI) were checked by fraction collector and nameless atomic absorption spectrometer. The optimal conditions for the formation of Cr(III)-EDTA chelate were two hours incubation period with pH 5. Cr(III)-EDTA and Cr(VI) in EDTA solution were successfully separated by anion exchange column using $Na_2CO_3/NaOH$ mixture as mobile phase. Peaks of Cr(III)-EDTA and Cr(VI) in EDTA were identified at 5 minutes and 7 minutes of retention time respectively by the ion exchange HPLC. The formation of Cr(III)-NaDDTC and Cr(VI)-NaDDTC chelates were twelve hours incubation period. Cr(III)-NaDDTC and Cr(VI)-NaDDTC chelates were separated by reversed phase column using methanol and water mixture as mobile phase. Peaks of Cr(VI)NaDDTC and Cr(III)-NaDDTC chelates were identified at 13 minutes and 26 minutes of retention time respectively by the reversed phase HPLC. Due to reduction of Cr(VI) to Cr(III), it seems to be not suitable for simultaneous determination of Cr(III)-NaDDTC and Cr(VI)-NaDDTC chelates by reversed phase HPLS. Simultaneos determination of Cr(III) and Cr(VI) by ion exchange HPLC was more accurate and simple method.

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토마토 품종별 철 결핍 유도후 Fe-DTPA 처리에 의한 영양장애 회복 소요시간과 철 결핍 유발물질 동정 (Analysis of Fe-Deficient Inducing Enzyme and Required Time for Recovery of Nutritional Disorder by Fe-DTPA Treatment in the Fe-Deficient Induced Tomato Cultivars)

  • 이성태;김민근;이영한;김영식;김영봉
    • 한국토양비료학회지
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    • 제44권5호
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    • pp.767-772
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    • 2011
  • 토마토 수경재배시 양액의 pH가 높은 조건에서도 철이 불용화 되지 않고 pH에 안정적인 킬레이트 철의 선택, 3종의 토마토 묘종 (라피토, 레드요요, 수퍼선로드)에서 엽의 철 결핍 증상시 Fe-DTPA 철 공급에 의한 철 결핍 회복 소요시간과 철 결핍 유발물질 유전자를 구조 분석한 결과는 다음과 같다. 양액의 pH가 6.0, 7.0 및 8.0 수준에서 양액 중 철의 농도가 $2.0mg\;L^{-1}$로 되게 각각 3종류 (Fe-EDTA, Fe-DTPA, Fe-EDDHA)의 킬레이트 철을 처리한 결과 Fe-DTPA와 Fe-EDDHA 형태의 철은 불용화가 거의 없었지만 Fe-EDTA 는 양액의 pH가 7.0 일 때 철 함량은 $1.72mg\;L^{-1}$, 8.0일 때 철 함량은 $1.51mg\;L^{-1}$로 25% 정도 불용화가 일어났다. 철 결핍이 발생된 3종의 토마토 묘종에 Fe-DTPA 킬레이트 철 $2.0mg\;L^{-1}$ 농도의 양액을 공급하였을 때 토마토 엽의 엽록소와 철 함량이 정상으로 회복되는데 소요시간은 라피토 품종은 7일, 레드요요와 수퍼선로드 품종은 5일 소요되었다. 유전적 수준에서 철의 생합성에 관여하는 heme oxigenase의 발현은 Fe-DTPA $2.0mg\;L^{-1}$ 처리 24시간 이내에 라피토와 레드요요는 정상적인 수준으로 회복되었으나 수퍼선로드는 처리시간의 경과에 따라서 현저한 차이가 없었다.

형판 합성된 $PbTiO_{3}$ 나노-구조의 상전이 (Phase Transitions of Template Synthesized $PbTiO_{3}$ Nano-structures)

  • ;부상돈
    • 한국결정학회지
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    • 제16권2호
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    • pp.128-137
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    • 2005
  • 졸-겔 형판 합성법으로 제조된 페롭스카이트 나노구조의 입자크기에 따른 상전이를 연구하였다. 타탄산납, $PbTiO_{3}$, 화합물의 나노구조는 출발물질인 티타늄 테트라부톡사이드($Ti(OBu)_{4}$)와 아세트산 납($Pb(OAc)_{2}-3H_{2}O$)을 선택된 용매에 녹이고, 산화 알루미늄 형판($AlO_{x}\;template$)을 이용한 졸-겔 합성과정으로 거쳐서 제조하였다. 이 때, 200-nm 직경의 세공을 가진 막($Whatman^{\circledr}\;anodisc\;membranes$)이 형판으로 이용되었다. 선구물질이 코팅된 형판을 공기 중에서 말린 후, $650^{\circ}C$에서 소결하고, 6M-NaOH 용액에서 형판을 제거하였다. $PbTiO_{3}$ 나노구조의 상전이는 DSC, DTA, 비선형 광학적 특성 등을 이용하여 조사하였다.

역상 액체크로마토그래피에서 Co(II)-Dithiocarbamate 킬레이트의 머무름 거동에 관한 연구 (A Study on the Retention Behavior of Co(II)-Dithiocarbamate Chelates in Reversed Phase-High Performance Liquid Chromatography)

  • 이원;김은경;안혜숙;이정한
    • 분석과학
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    • 제12권5호
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    • pp.387-396
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    • 1999
  • 역상 액체크로마토그래피에서 몇가지 Co(II)-dithiocarbamate(DTC)의 머무름 거동을 고찰하였다. 얻어진 머무름 자료들을 van't Hoff plot하여 킬레이트가 이동상으로부터 정지상으로 전이하는 엔탈피와 엔트로로피를 각각 계산하였다. 엔탈피값에 대한 In k'의 의존성을 조사한 결과 이동상중 유기 용매의 비가 증가할수록 감소하였다. 그리고 $-{\Delta}H^0$와 In k를 도시한 직선의 기울기로부터 구한 보정 온도(${\beta}$)는 765.3-888.5 K 범위이었다. 따라서 DTC 킬레이트들의 머무름 거동은 온도변화에 무관하게 일정하며, 주로 소용매성 효과에 영향을 받는다는 사실을 확인하였다. 아울러 머무름 실험식 $log\;k^{\prime}=log\;{k_w}^{\prime}-S_{\varphi}$으로부터 얻어진 S 지수와 log k'과의 선형관계로부터, S 지수는 주로 DTC 킬레이트와 이동상의 상호작용에 영향을 받는다는 것을 알 수 있었다.

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피리딘을 포함하는 여섯자리 $N_6$ 리간드와 전이금속 이온 착물의 안정도상수 (Stability Constants for Transition Metal ions of Hexadentate $N_6$ Ligands Containing Two Pyridyl Groups)

  • 김선덕;김준광;박윤열
    • 분석과학
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    • 제12권5호
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    • pp.397-402
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    • 1999
  • 두 개의 피리딘기를 포함하는 열린고리 형태의 여섯자리 질소계 리간드 1,15-bis(2-pyridyl)-2,6,10,14-tetraazapentadecane tetrahydroehloride (bpyped 4HCl)을 합성하고 원소분석, 적외선 분광법, 핵자기 공명법 및 질량 스펙트럼으로 분석하였다. 합성된 리간드의 산 해리상수($logK{^n}_H$)와 Cu(II), Ni(II), Co(II) 및 Zn(II) 에 대한 안정도 상수값을 수용액에서 전위차 적정법으로 구하였고, 이때 온도는 $25^{\circ}C$ 및 이온강도 0.10 M($KNO_3$)으로 고정시켰다. 지방족 아민의 질소 원자들 사이에 한 개 또는 두 개의 프로필기를 포함하는 bpyped와 유사한 리간드들의 지방족 아민 고리 길이 효과에 따른 산 해리 상수 및 전이금속(II)에 대한 안정도 상수 영향을 알아보았다.

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PT, PZ와 PZT나노튜브의 졸-겔 형판합성과 특성 (Sol-Gel Template Synthesis and Characterization of PT, PZ and PZT Nanotubes)

  • 장기석
    • 대한화학회지
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    • 제46권3호
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    • pp.242-251
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    • 2002
  • 졸-겔 형판 합성법을 이용하여 페로브스카이트 구조를 갖는 나노튜브를 합성하고 그 특성을 조사하였다. PbTiO3(PT), PbZrO3(PZ)와 PbZrO3-PbTiO3(PZT)고용체 나노튜부는 반응물, Ti(OPri)4, Zr(OBu)3와 Pb(OAc)2-3H2O 들의 킬레이트 졸-겔 합성법에 의해서 합성하였다. 산화 알루미늄 형판은 200nm의 직경을 갖는 훠트만 아노디스크가 사용되었다. 6.0M-NaOH 용액에서 형판을 제거한 다음, 주사현미경 분석에 의해서 50m 길이와 200nm 외곽 직경의 생성물 나노튜브를 확인할 수 있었다. 투과현미경 분석과 전자회절 분석에 의하여 나노튜브가 다결정임을 확인하였다. DSC 분석에 의하여 PT 나노튜브의 상전이 온도는 특이하게도 234.4$^{\circ}C$ 임이 확인되었으며, 이때의 입자크기는 X-선 분석의 하나인 Scherrer 식에 의해서 15.4nm 임이 계산되었다.