The effect of microwave treatment on Korean ginseng was studied by measuring the changes in moisture, crude lipid, crude ash, crude protein, total dietary fiber and saponin contents, as well as changes in density, color and microstructure. Korean ginseng was treated with 100 or 200 watts of microwaves for 1 or 3 hrs, respectively, followed by drying using an oven at $60^{\circ}C$ for 96 hrs. The moisture contents decreased to 13.12~10.77% from an initial 76.26%. The amounts of lipid and ash were reduced in proportion to the time of microwave treatment and level of microwave power. The amount of protein in ginseng after microwave treatment did not significantly change. The amount of total dietary fiber increased after microwave treatment and the color of dried ginseng became dark. The amounts of ginsenoside-$Rb_1$, $Rb_2+Rb_3$, Rc, Rd, Re, Rf, $Rg_1$, $Rg_2+Rh_1$ and $Rg_3$ were reduced after treatment with 100 watts of microwave radiation for 1 and 3. The amounts of ginsenoside-$Rb_1$, Rd, Re, Rf, $Rg_1$, $Rg_2+Rh_1$ and $Rg_3$ after treatment with 200 watts of microwave radiation for 1 and 3 hr also reduced. On the other hand, the amounts of ginsenoside-$Rb_2+Rb_3$ and Rc after treatment of ginseng with 200 watts of microwave radiation for 1 and 3 hrs were increased.
In order to distinguish the cultivation area of Panax ginseng, principal component analysis (PCA) using quantitative and qualitative data acquired from HPLC was carried out. A new HPLC method coupled with evaporative light scattering detection (HPLC-ELSD) was developed for the simultaneous quantification of ten major ginsenosides, namely $Rh_1$, $Rg_2$, $Rg_3$, $Rg_1$, Rf, Re, Rd, $Rb_2$, Rc, and $Rb_1$ in the root of P. ginseng C. A. Meyer. Simultaneous separations of these ten ginsenosides were achieved on a carbohydrate analytical column. The mobile phase consisted of acetonitrile-water-isopropanol, and acetonitrile-water-isopropanol using a gradient elution. Distinct differences in qualitative and quantitative characteristics for ginsenosides were found between the ginseng roots produced in two different Korean cultivation areas, Ganghwa and Punggi. The ginsenoside profiles obtained via HPLC analysis were subjected to PCA. PCA score plots using two principal components (PCs) showed good separation for the ginseng roots cultivated in Ganghwa and Punggi. PC1 influenced the separation, capturing 43.6% of the variance, while PC2 affected differentiation, explaining 18.0% of the variance. The highest contribution components were ginsenoside $Rg_3$ for PC1 and ginsenoside Rf for PC2. Particularly, the PCA score plot for the small ginseng roots of six-year old, each of which was light than 147 g fresh weight, showed more distinct discrimination. PC1 influenced the separation between different sample sets, capturing 51.8% of the variance, while PC2 affected differentiation, also explaining 28.0% of the variance. The highest contribution component was ginsenoside Rf for PC1 and ginsenoside $Rg_2$ for PC2. In conclusion, the HPLC-ELSD method using a carbohydrate column allowed for the simultaneous quantification of ten major ginsenosides, and PCA analysis of the ginsenoside peaks shown on the HPLC chromatogram would be a very acceptable strategy for discrimination of the cultivation area of ginseng roots.
The fresh ginseng roots were extracted in aqueous methanol (MeOH), and the obtained extracts were partitioned using ethyl acetate (EtOA), n-butanol (n-BuOH), and water, successively. The repeated silica gel column chromatography for n-BuOH fraction afforded a purified ginsenoside $Rg_1$. The physico-chemical, spectroscopic and chromatographic data of ginsenoside $Rg_1$, such as crystallization characteristics, melting point, specific rotation, infrared spectrometry (IR) data, fast atom bombardment/mass spectrometry (FAB/MS) data, nuclear magnetic resonance (NMR) data, retention factor (Rf) in thin layer chromatography (TLC) experiment, and retention time (r.t.) in HPLC analysis, were measured and compared with those reported in literatures. Especially, the previous literatures reported different data for ginsenoside $Rg_1$ in the $^{1}H-$ and $^{13}C$-NMR experiments. This paper gives the exactly assigned NMR data through 2D-NMR experiments, such as $^{1}H-^{1}H$ correlation spectroscopy (COSY), hetero nuclear single quantum correlation (HSQC), and hetero nuclear multiple bond connectivity (HMBC).
Seasonal ginsenoside flux in the leaves of 5-year-old Panax ginseng was analyzed from the field-grown ginseng, for the first time, to study possible biosynthesis and translocation of ginsenosides. The concentrations of nine major ginsenosides, Rg1, Re, Rh1, Rg2, R-Rh1, Rb1, Rc, Rb2, and Rd, were determined by UHPLC during the growth in between April and November. It was confirmed total ginsenoside content in the dried ginseng leaves was much higher than the roots by several folds whereas the composition of ginsenosides was different from the roots. The ginsenoside flux was affected by ginseng growth. It quickly increased to 10.99±0.15 (dry wt%) in April and dropped to 6.41±0.14% in May. Then, it slowly increased to 9.71±0.14% in August and maintained until October. Ginsenoside Re was most abundant in the leaf of P. ginseng, followed by Rd and Rg1. Ginsenosides Rf and Ro were not detected from the leaf. When compared to the previously reported root data, ginsenosides in the leaf appeared to be translocated to the root, especially in the early vegetative stage even though the metabolite translocated cannot be specified. The flux of ginsenoside R-Rh1 was similar to the other (20S)-PPT ginsenosides. When the compositional changes of each ginsenoside in the leaf was analyzed, complementary relationship was observed from ginsenoside Rg1 and Re, as well as from ginsenoside Rd and Rb1+Rc. Accordingly, ginsenoside Re in the leaf was proposed to be synthesized from ginsenoside Rg1. Similarly, ginsenosides Rb1 and Rc were proposed to be synthesized from Rd.
Kim, Do-Wan;Kim, Yu-Jin;Lee, Yun-Jin;Min, Jin-Woo;Kim, Se-Young;Yang, Deok-Chun
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.22
no.6
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pp.1557-1561
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2008
Red ginseng possibly has new ingredients converted during steaming and dry process from fresh ginseng. Kujeungkupo method which means 9 repetitive steamings and dryings process was used for the production of red ginseng from 6-year old ginseng roots. Saponin was extracted from each red ginseng produced at the 1st, 3rd, 5th, 7th, and 9th during the steaming and drying treatment, and we analyzed saponin content with TLC. Minor saponins, such as ginsenoside-Rg3, -Rh2, compound K, and F2, increased as the process time of steaming and drying, but major saponins (ginsenoside-Rb1, -Rb2, -Rc, -Rd, -Re, -Rf, -Rg1) were decreased. Major saponins were yet observed almost at the 1st process, then degraded as the increasing time of steaming and drying process. Especially, ginsenoside-Re and -Rg were observed as considerable amount after the 1st treatment, but there were no trace of them after the 9th treatment. Ginsenoside-Rg1, -Rb2, and -Rb1 were also reduced remarkedly by 96.6%, 96%, and 92.3%, respectively. Minor saponins were increased significantly, especially for ginsenoside-Rg3 and ginsenoside-F2. These results suggest that Kujeungkupo method is the very useful method for the production of minor ginsenoside-Rg3 and -Rh2.
This work was carried out to establish adventitious root culture system in three Panax species (wild-grown P. ginseng, P. quinquefolium, and P. japonicum) to analyze their ginsenoside productivity. Adventitious roots were induced directly from segments of seedlings after cultured on MS(Murashige andSkoog 1962) solid medium containing 3.0 mg/l IBA. Omission of $NH_4NO_3$ from the medium greatly enhanced both the frequency of adventitious root formation and number of roots per explants in all the three Panax species. However, elongation of post-induced adventitious roots was enhanced on medium with $NH_4NO_3$. Two-step culture protocol: $NH_4NO_3$-free medium for first two weeks of culture, followed by $NH_4NO_3$ containing medium for further 4 weeks, greatly enhanced the fresh weight increase of adventitious roots in all the three ginseng species. The fresh weight of adventitious roots was high in P. quinquefolium and low in P. ginseng, followed by P. japonioum regardless of the composition of medium. Pattern and content of ginsenosides in adventitious roots differed among the three Panax species. Total ginsenoside content of adventitious roots in P. quinquefolium, P. ginseng, and p. japonicum was 8.03, 15.7 and 1.2 mg/g dry weight, respectively. Among the three speices, adventitious roots in P. quinquefolium produced hig-hamount of ginsenosides. The pattern of ginsenoside fractions between P. ginseng and P. quinquefolium was similar but the amount of ginsenoside differed between the two, While, in P japonicum, total ginsenoside content was very low and some ginsenosides such as ginsenoside Rb2 and Rf were not detected. Conclusively, we demonstrate that same culture condition was required for induction and elongation of adventitious roots of three ginseng species but growth of adventitious roots and their ginsenoside production were different among them.
This study compared the contents of ginsenoside according to the extract conditions of red ginseng to provide basic information for developing functional food using red ginseng. According to the result, the content of crude saponin was highest in 72 hours of extraction at $82^{\circ}C$ (RG-823). The content of prosapogenin (ginsenoside $Rh_1,\;Rh_2,\;Rg_2,\;Rg_3$) was highest in 48 hours of extraction, and followed by 72 and 24 hours at $82^{\circ}C$. And at $93^{\circ}C$ the prosapogenin contents were highest in the order of 48 hours, and next in 24 and 72 hours. In addition, ginsenoside $Rb_1,\;Rb_2$ Rc and Re were not detected in 72 hours of extraction at $93^{\circ}C$ (RG-933) presumedly due to hydrolysis, but ginsenoside Rd, Rf and $Rg_1$ were detected as long as 72 hours of extraction. These results show that protopanaxatriol group is relatively more resistant to heat than protopanaxadiol group.
From crude drug preparation(Soshiho-Tang) ginseng sapogenins were identified by TLC and $ginsenoside-Rb_1$ was determined quantitatively by HPLC. Panaxadiol, pandaxatriol, acid-hydrolysates of ginseng saponin, were identified by TLC with benzene/acetone(4 : 1, v/v). Rf values of which were measured as 0.26 and 0.14, respectively. The content of $ginsenoside-Rb_1$ was determined by HPLC on $Lichrosorb-NH_2$ column with $CH_3CN/H_2O/n-BuOH$(80 : 20 : 10, v/v). Its recovery rate in the extract granules, was as relatively low as $19.8{\pm}1.4%$ compared to the content in raw red ginseng.
Ginseng, a traditional herbal drug, has been used in Eastern Asia for more than 2000 years. Various ginsenosides, which are the major bioactive components of ginseng products, have been shown to exert numerous beneficial effects on the human body when co-administered with drugs. However, this may give rise to ginsenoside-drug interactions, which is an important research consideration. In this study, acassette assay was performed the inhibitory effects of 12 ginsenosides on seven cytochrome P450 (CYP) isoforms in human liver microsomes (HLMs) using LC-MS/MS to predict the herb-drug interaction. After incubation of the 12 ginsenosides with seven cocktail CYP probes, the generated specific metabolites were quantified by LC-MS/MS to determine their activities. Ginsenoside Rb1 and F2 showed strong selective inhibitory effect on CYP2C9-catalyzed diclofenac 4'-hydroxylation and CYP2B6-catalyzed bupropion hydroxylation, respectively. Ginsenosides Rd showed weak inhibitory effect on the activities of CYP2B6, 2C9, 2C19, 2D6, 3A4, and compound K, while ginsenoside Rg3 showed weak inhibitory effects on CYP2B6. Other ginsenosides, Rc, Rf, Rg1, Rh1, Rf, and Re did not show significant inhibitory effects on the activities of the seven CYPs in HLM. Owing to the poor absorption of ginsenosides after oral administration in vivo, ginsenosides may not have significant side effects caused by interaction with other drugs.
In previous studies we have demonstrated that several individual ginsenosides such as Rc, Rd, Re and Ri relieves formalin-induced pain following systemic treatment. But it is unknown where these single ginsenosides induce antinociception. We investigated the antinoiceptive effect of four individual ginsenosides on formalin-induced pain after intrathecal (i.t.), intracereventricular (i.c.v.), or subcutaneous (s.c.) administration using mice. We found that ginsenoside Rc, Rd, and Re except Rf attenuated both acute and tonic phase of pain. Ginsenoside Rf attenuated only tonic phase of pain after i.t. administration. The ED$\_$50/ was 1.0 (0.55∼l.75 mg/kg) for Rc, 1.15 (0.6∼2.25 mg/kg) for Rd, and 8.9 (3.9∼20.5 mg/kg) for Re in acute phase of pain. The ED$\_$50/ was 0.3 (0.1∼0.85 mg/kg) for Rc, 0.6 (0.35∼l.1 mg/kg) for Rd, 2.45 (1.25∼4.65 mg/kg) for Re, and 1.9 (1.5∼4.25 mg/kg) for Rf in tonic phase of pain. We also found that ginsenoside Rc, Rd, Re, and Rf after i.c.v. administration attenuated both acute and tonic phase of pain. The ED5o for acute phase of pain was 0.9 (0.55∼l.4mg/kg) for Rc, 0.9 (0.45∼1.7 mg/kg) for Rd, 0.93 (0.5∼l .75 mg/kg) for Re, and 1.85 (0.95∼3.5 mg/kg) for Rf. The ED$\_$50/ for tonic phase of pain was 0.7 (0.45∼1.05 mg/kg) for Rc,1.25 (0.7∼2.2 mg/kg) for Rd, 0.85 (0.45∼1.6 mg/kg) for Re, and 0.8 (0.4∼1.45 mg/kg) for Rf. Thus, the order of the analgesic potency was Rc$\geq$Rd>Re>Rf in both i.t. and i.c.v. administration routes. However, s.c. pretreatment of four ginsenosides did not reduce formalin-induced pain. These results suggest that analgesic effect of ginsenosides is achieved through spinal or supraspinal site(s) in formalin test.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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