한방에서 염증, 종양 억제 등에 사용되는 감초와 흑소두, 감초와 흑대두를 정량으로 배합하여 조제한 약침액을 이용하여 암 억제효과를 살펴 보았다. 발암물질을 무독화 시키는 QR 생성 유도를 생쥐의 간암세포인 Hepa1c1c7과 rat의 간세포 Ac2F에서 측정하였으며, 그 결과 감두약침액, 열수추출액을 처리한 Hepa1c1c7 세포에서 감두약침액과 열수 추출액에 의한 GSH 생성이 증가하였고, GST활성측정에 의하면 Hepac1c7 세포에서 감두약침액에 의한 GST 생성이 증가하였다, 농도별 감두약침액과 역수추출액에 의한 A. castellanii 증식을 살펴 본 결과, 약침수액과 열수추출액이 A. castellanii 증식을 농도 의존적으로 저해하는 효과가 있었다.
Angelicae gigantis Radix aqua-acupuncture solution (AGRAS) and Angelicae gigantis Radix water-extracted solution (AGRWS) were prepared and tested for their organ toxicities and chemopreventive potentials. The organ-toxicity of AGRAS to male ICR mice was studied by the measurements of glutamic oxaloacetic transaminase (GOT), glutamic pyruvate transaminase (GPT), lactate dehydrogenase (LDH) and alkaline phosphatase (ALP-s) activities after injection of AGRAS for 7 days. The activities of GOT GPT and LDH were decreased, but the activity of ALP-s was not changed with AGRAS. When AGRAS was administered once daily for 10 days before the tumor implantation, AGRAS exerted antitumor activity by inhibiting the growth of Ehrich ascites tumor cells (EATC) in viva. The inductions of quinone reductase (QR), glutathione (GSH) and glutathione S-transferase (GST) and inhibition of polyamine metabolism were tested for the chemopreventive potentials of AGRAS and AGRWS. AGRAS was potent inducer of QR activity in murine hepatoma Hepalclc7 cells. In cultured rat Ac2F cells, AGRAS was also significantly induced QR activity GSH levels were increased about 1.3 fold with AGRAS. In addition the activity of GST was increased about 2.5 fold with AGRAS at the concentration of $0.1{\;}{\times}{\;}$. The effects of AGRAS and AGRWS were tested on the growth of Acanthamoeba castellanii. Proliferation of Acanthamoeba castellanii in a broth medium was inhibited by AGRAS and AGRWS at the concentration of $1{\;}{\times}{\;}and{\;}5{\;}{\times}{\;}$, respectively: These results suggest that AGRAS has chemopreventive potential by inducing QR activity increasing GSH and GST levels and inhibition of polyamine metabolism.
본 연구에서는 수온변화에 따른 비소 (As) 노출의 영향을 틸라피아 Oreochromis niloticus의 간과 아가미에서 항산화 방어기작 (antioxidant defense system)을 통해 알아보고자 한다. 틸라피아를 수온이 각각, 20, 25 및 $30^{\circ}C$ 일때, 비소 농도 0, 200 및 $400{\mu}g/L$에서 10일간 노출시킨 후, glutathione (GSH) levels, glutathione reductase (GR), glutathione peroxidase (GPx) and glutathione S-treansferase (GST) 효소 활성을 측정하였다. 비소 노출 이후, 틸라피아의 간과 아가미에서 이들 항산화 효소는 수온 변화에 따라 유의하게 변화하였다. 특히, 다른 온도구간에 비하여 수온이 $30^{\circ}C$ 일 때, 비소에 노출된 틸라피아의 간에서 이들 효소의 변동폭은 가장 유의하게 증가하였다. 즉, 본 연구는 틸라피아의 간과 아가미에서 GSH 및 항산화 효소인 GR, GPx 및 GST에 미치는 비소의 영향은 수온 상승이 동반되었을 때, 어류의 산화 스트레스에 대한 방어 기작의 감소를 촉진시켰음을 보여준다.
애엽으로 약침액을 조제하여 암예방 효과를 살펴 본 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 애엽 약침액으로 10일간 전투여한 후 Ehrlich ascites tumor cell을 이식하여 복수암이 유발된 생쥐의 EATC 성장을 살펴 본 결과 약침액을 투여한 생쥐의 EATC의 성장이 크게 억제되었으며, 복수암이 유발된 생쥐의 비장 무게가 대조군에 비해 증가하였다. 또한 장기간의 관찰에 의해서도 복수암 세포의 성장 저해에 의해 생쥐의 체중변화율은 대조군에 비해 크게 억제되었으며 수명 연장 효과가 나타났다. 이와같은 생체에서의 암예방 효과를 in vitro 상에서 그 기전을 살펴본 결과 애엽 약침액은 phase II detoxification 효소인 QR의 생성을 유도하고 GSH 함량을 증가시켜서 암예방 효과를 나타내었다.
Ethanol extract from Thesium chinense Tunczaninov (TCTE) was tested for breast cancer chemopreventive activity by measuring 7,12-dimethylbenz[a]anthracene (DMBA) - induced cytochrome P450 1A1 activity, induction of quinone reductase and glutathione S-transferase, and glutathione level. TCTE significantly inhibited cytochrome P45O 1A1 activity at the concentration of 90 and 150 mg/ml. TCTE induced quinone reductase activity in a dose-dependent manner in a concentration range of 3-150 mg/ml. In addition glutathione S-transferase activity and glutathione level were increased with TCTE in cultured murine hepatoma Hepa1c1c7 cells. These results suggest that TCTE has breast cancer chemopreventive potential by inhibiting cytochrome P45O 1A1 activity, inducing quinone reductase and glutathione S-transferase activities, and increasing GSH level.
본 연구에서는 버들송이(Agrocybe cylindracea)와 말똥진흙버섯(Phellinus igniarius)을 배양한 대두 추출물의 암예방 효과를 검토하기 위하여 in vitro상에서 암발생 억제물질 연구에 널리 이용되고 있는 기작 즉, Quinone reductase(QR), glutathione S-transerase(GST)의 활성 유도, glutathione(GSH)의 생성 촉진 그리고, polyamine 합성대사의 억제능을 측정하였다. 그 결과, 버들송이와 말똥진흙버섯를 배양한 대두 추출물이 마우스 hepatoma Hepa1c1c7 cell 배양에서 QR과 GST 유도활성이 있음이 확인되었다. 또한 GSH 생성량은 버들송이를 배양한 대두 추출물에서 20%, 말똥진흙버섯를 배양한 대두 추출물에서 40%로 증가하였다. 한편, 버들송이와 말똥진흙버섯을 배양한 대두 추출물의 polyamine 합성대사의 억제효과를 검토하기 위해 Acanthamoeba castellanii의 증식을 측정하였다. 그 결과, 버들송이와 말똥진흙버섯을 배양한 대두 추출물 20mg/3ml와 40mg/3ml를 처리할 경우 A. castellanii의 증식을 억제하는 것으로 나타났다. 이러한 결과 담자균을 배양한 대두 추출물은 in vitro상에서 나타난 암과 관련된 각종 활성으로부터 암예방 효과가 있는 것으로 나타나 기능성 식품으로서의 가능성을 보여주었다.
Dithiocarbamate and mixed disulfide containing allyl functions were designed and synthesized as putative chemopreventive agents, i.e. N,N-diallyldithiocarbamate (DATC) and S-(N,N-diallyldithiocarbamoyl)-N-acetylcysteine (AC-DATC). DATC and AC-DATC were administered and the activities of cytosolic glutathione S-transferase (GST), glutathione reductase (GR) and microsomal N-nitrosodiethylamine (NDEA) deethylase were assayed in order to test the effects of these organosulfur com-pounds on the detoxification and metabolic activation system of NDEA. The amounts of hepatic glutathione (GSH and GSSG) was also determined. The administration of DATC to rats led to an increase in the activity of GR and to an inhibition of CYP2E1-mediated NDEA deethylation. AC-DATC induced the activity of GR and GST, increased the hepatic GSH content and inhibited the rate of NDEA deethylation. The level of GSSG was decreased as a consequence of the increased activity of GR. These effects may contribute to possible antimutagenic and anticarcinogenic action of the dithiocarbamates investigated.
Objectives: This study was designed to evaluate lipid-lowering and antioxidant effects of Artemisia capillaris(A. capillaris) using a model of hyperlipidemic rats induced by poloxamer-407. Methods: Rats were previously treated by A. capillaris water extract, and intraperitoneally injected by poloxamer-407 to induce hyperlipidemia. Parameters of serum lipid and oxidative stress biomarkers were determined. Results: 1. A. capillaris ameliorated the elevation of serum total cholesterol, triglyceride, LDL-cholesterol and MDA level. 2. A. capillaris ameliorated the reduction of serum TAC and SOD activities. 3. A. capillaris ameliorated the reduction of serum GSH and GSH-reductase level. Conclusions: According to these results, A. capillaris can be used to treat hyperlipidemia or as basis for making new drugs for treating hyperlipidemia in the future.
Background: Oxidative stress-induced cardiomyocytes apoptosis is a key pathological process in ischemic heart disease. Glutathione reductase (GR) reduces glutathione disulfide to glutathione (GSH) to alleviate oxidative stress. Ginsenoside Rb1 (GRb1) prevents the apoptosis of cardiomyocytes; however, the role of GR in this process is unclear. Therefore, the effects of GRb1 on GR were investigated in this study. Methods: The antiapoptotic effects of GRb1 were evaluated in H9C2 cells by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide, annexin V/propidium iodide staining, and Western blotting. The antioxidative effects were measured by a reactive oxygen species assay, and GSH levels and GR activity were examined in the presence and absence of the GR inhibitor 1,3-bis-(2-chloroethyl)-1-nitrosourea. Molecular docking and molecular dynamics simulations were used to investigate the binding of GRb1 to GR. The direct influence of GRb1 on GR was confirmed by recombinant human GR protein. Results: GRb1 pretreatment caused dose-dependent inhibition of tert-butyl hydroperoxide-induced cell apoptosis, at a level comparable to that of the positive control N-acetyl-L-cysteine. The binding energy between GRb1 and GR was positive (-6.426 kcal/mol), and the binding was stable. GRb1 significantl reduced reactive oxygen species production and increased GSH level and GR activity without altering GR protein expression in H9C2 cells. Moreover, GRb1 enhanced the recombinant human GR protein activity in vitro, with a half-maximal effective concentration of ≈2.317 μM. Conversely, 1,3-bis-(2-chloroethyl)-1-nitrosourea co-treatment significantly abolished the GRb1's apoptotic and antioxidative effects of GRb1 in H9C2 cells. Conclusion: GRb1 is a potential natural GR agonist that protects against oxidative stress-induced apoptosis of H9C2 cells.
This study was conducted to investigate the anti-adipogenic activity of esculetin (ECT) which is reported to be attributable to the modulation of antioxidant enzymes during adipogenesis. After six days of ECT treatment of 3T3-L1 cells, lipid accumulation was determined by Oil red O staining. The levels of glutathione (GSH) and reactive oxygen species (ROS), and the activities of antioxidant enzymes including glutathione reductase, glutathione peroxidase (GPx), and catalase were examined. In addition, the protein expression of glutamate-cysteine ligase catalytic subunit (GCLC) and heme oxygenase-1 (HO-1) was measured by Western blot. ECT significantly inhibited lipid accumulation by approximately 80% and ROS production in a concentration-dependent manner. GSH level and GPx activity were increased by ECT by approximately 1.3-fold and 1.7-fold compared to the control group, respectively. GCLC and HO-1 expression were elevated by ECT. These results showed that ECT treatments strongly inhibit adipogenesis, increase GSH level, and upregulate the expression of GCLC and HO-1, possibly by decreasing ROS production in 3T3-L1 cells during adipogenesis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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