Several studies have investigated the various effects of dexamethasone (Dex) on the proliferation and differentiation of mesenchymal stem cells (MSCs). Previously, we reported that co-treatment with L-ascorbic acid 2-phosphate and fibroblast growth factor (FGF)-2 maintained differentiation potential in MSCs through expression of hepatocyte growth factor (HGF). In this study, we investigated the effects of co-treatment with FGF-2 and Dex on the proliferation and differentiation potential of MSCs during a 2-month culture period. Co-treatment with FGF-2 and Dex increased approximately a 4.7-fold higher accumulation rate of MSC numbers than that by FGF-2 single treatment during a 2-month culture period. Interestingly, co-treatment with FGF-2 and Dex increased expression of HGF and maintained adipogenic differentiation potential during this culture period. These results suggest that co-treatment with FGF-2 and Dex preserves the proliferation and differentiation potential during long-term culture.
Purpose: The aim of this study is to compare the effects of bone marrow stromal cells(BSCs) and fibroblasts on wound healing activity in vivo, especially on epithelization. Methods: The fibroblasts and BSCs were harvested from patients and cultured. Ten Spague-Dawley white rats were used. A 5 mm punches were made to excise skin and subcutaneous tissue in a round fashion at six sites on the back area of each rat. Four hundred thousand cells suspended in 0.05 ml fibrinogen were applied to the created wounds. The cells in group I, II, and III were no cells, fibroblasts and BSCs. The lengths of epithelial gap at the widest wound site were compared with autopsy specimens obtained on the 6th day after cell therapy under light microscope. Statistical comparisons were performed using the Mann-Whitney U-test, and the p value < 0.05 was considered statistically significant. Results: The best epithelization was also seen in the BSC group, followed by fibroblast and no cell groups.Conclusion: These results demonstrate that BSC has superior effect on stimulating wound healing than fibroblast, which is currently used for wound healing.
Tumor microenvironment serves an important role in tumor growth and metastasis. Cancer cells can promote growth and malignancy by altering the surrounding stroma. Cancer-associated fibroblast (CAF) are an abundant cell type present within the tumor microenvironment and provide tumorigenic features by secreting cytokines. In the current study, the CAF-mediated invasion of oral squamous cell carcinoma (OSCC) was investigated and the associated mechanisms were elucidated. Cancer invasion was estimated using a Matrigel-coated Transwell chamber and FITC-gelatin matrix. To verify the effect of the tumor microenvironment, conditioned media (CM) from normal fibroblast (NF) and CAFs were prepared. An ELISA was performed to estimate the level of IL-1β. A proteome profiler human protease array was performed to verify the proteases affected by stimulation with CM, from CAF. Recombinant IL-1β protein increased the invasion of OSCC cells. IL-1β expression was higher in CAF than NF. CM from CAF (CM-CAF) increased cancer invasion and FITC-gelatin matrix degradation. The invasive capacity provided by CAF was abrogated by an IL-1 receptor (IL-1R) antagonist. Additionally, CM-CAF increased the secretion of ADAM 9 and Kallikrein 11 from OSCC cells. The invasion activity by CM-CAF was partially abrogated by the neutralization of ADAM 9 or Kallikrein 11. In conclusion, by providing stromal factor, CAFs were a critical inducer of OSCC invasion, and CAF secretes the required amount of IL-1β to increase cancer invasion activity. The invasive capacity of CAF was identified to be IL-1R-dependent. ADAM 9 and Kallikrein 11 were influencing factors involved in the increase of CAF-mediated cancer invasion.
Blueberry was enzymatically hydrolyzed using selected commercial food grade carbohydrases (AMG, Celluclast, Termamyl, Ultraflo and Viscozyme) and proteases (Alcalase, Flavourzyme, Kojizyme, Neutrase and Protamex) to obtain water soluble compounds, and their protective effect was investigated against $H_2O_2$-induced damage in Chinese hamster lung fibroblast cell line (V79-4) via various published methods. Both AMG and Alcalase hydrolysates showed higher total phenolic content as well as higher cell viability and ROS scavenging activities, and hence, selected for further antioxidant assays. Both AMG and Alcalase hydrolysates also showed higher protective effects against lipid peroxidation, DNA damage and apoptotic body formation in a dose-dependent fashion. Thus, the results indicated that water soluble compounds obtained by enzymatic hydrolysis of blueberry possess good antioxidant activity against $H_2O_2$-induced cell damage in vitro.
This study was performed to investigate the biocompatibility of several dental casting alloys (Gold, Dong Myung A-45, Dong Myung AP-35, Verabond, Rexillium, NPG) employing tissue culture. Fibroblast-like cells derived from the subcutaneous tissue of Sprague-Dawley rat were cultivated in DME medium with the addition of those alloys. Results were assessed by calculating the cell multiplication rate and relative growth rate and by observing the morphology of cells in the presence of the specimens. Gold was indicated to be most biocompatible with fibroblast-like cell. Dong Myung A-45 and Dong Myung AP-35 showed very similar effects on the cells as did Gold. Also there was a decrease in cytotoxicity of the alloys as the concentration of gold increased. Verabond and Rexillium showed a decreased in cell mutiplication rate as compared to low gold alloys. NPG exhibited the most severe cell toxicity among the tested alloys.
To know the in vitro and the in vivo cytotoicity of resin solution, resin solution was applied to cultured fibroblast and was injected into the mouse. The cytotoxic effect of resin solution was measured by MIT assay and in vivo cytotoxicity was examined after Hematoxylin and Eosin staining. The cell activity of resin solution in the concentration of 50% was significantly decreased compared to control group and 5 % group. In histopathologic study of resin solution, there were severe inflammatory cell infiltration, mild interstitial edema, trace hemorrhage, and moderate or severe muscle destruction in resin injected group. These results suggested that there might be some differences between the cell viability of fibroblast and in vivo cell cytotoxicity. Further study is needed to clarify the cytotoxicity by direct implanting of resin mass.
Porphyromonas endodontalis(P. endodontalis) is one of the important causative bacteria of pulpal and periapical disease. P. endodontalis has lipopolysaccharide(LPS) and it plays a major role in stimulating the synthesis and release of cytokines from immune cells and prostaglandin $E_2$ from host cells. The purpose of this study is to prepare LPS from P. endodontalis and to evaluate the effect of LPS on membrane permeability of fibroblast. P. endodontalis ATCC 35406 was cultured in anaerobic condition, and LPS was extracted. LPS was confirmed by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis. Human periodontal ligament cell, colon fibroblast(CCD-18Co, KCLB 21459) and skin fibroblast(Detroit 551, KCLB 10110) were perfused with 0.01% P. endodontalis LPS solution, high concentration of $K^+$ solution and $Ca^{2+}$-free solution, $Ca^{2+}$ concentration ratio was measured by microfluorometry. 1. Intracellular $Ca^{2+}$ concentration was not changed in human periodontal fibroblast and skin fibroblast(Detroit 551) stimulated by P. endodontalis LPS. 2. Intracellular $Ca^{2+}$ concentration was increased in colon fibroblast(CCD-18Co) stimulated by P. endodontalis LPS. 3. Colon fibroblast(CCD-18Co) has voltage dependent $Ca^{2+}$ channel activated by high concentration of $K^+$ solution. 4. P. endodontalis LPS has no effect on the increase of intracellular $Ca^{2+}$ concentration during perfusion of $Ca^{2+}$-free solution.
Objectives: Cancer lethality is usually the result of local invasion and metastasis of neoplastic cell from the primary tumor. Because of their ability to degrade extracellular matrix components, matrix metalloproteinases (MMPs) and basic fibroblast growth factor (bFGF) have been implicated in the breakdown of basement membrane and underlying stroma, thereby facilitating tumor growth and invasion. It has been well established that MMPs and bFGF expression correlate with cervical lymph node metastasis, but studies on expression in the metastatic cervical lymph node itself are not enough. We have analyzed matrix metalloproteinases (MMPs) and basic fibroblast growth factor (bFGF) in squamous cell carcinoma of the head and neck and metastatic cervical lymph node, and evaluated their relationship and clinicophathologic significance. Material and Methods: 20 cases of squamous cell carcinoma of the head and neck were entered on the study of immunohistochemical stains for MMP-9 and bFGF in the obtained tissue from primary tumor and metastatic cervical lymph node. We analyzed the relationship between MMP-9, bFGF expression of the primary tumor and metastatic node with age, sex, T-stage, N-stage, histologic grade, pathologic stage and disease free survival. Results: Expression of MMP-9 and bFGF in cancer cell and metastatic lymph node was higher than that in normal cell and lymph node. According to histologic differentiation, expression of MMP-9 of the metastatic cervical lymph node was higher than primary tumor. Considering to other clinicopathologic factor, no statistical significance was seen in MMP-9 and bFGF. Conclusion: We found that expression of MMP-9 is higher in the metastatic lymph node than primary tumor in the poorly differentiated squamous cell carcinoma. But we don't find out the statistical significance in relation between bFGF and clinical factors. So we guess that some different mechanism of MMP-9 and bFGF in Head & Neck squamous cell carcinoma exist. Further studies will be necessary to establish their pathogenesis in the Head and Neck cancer.
Purpose: Current common method of cytotoxicity evaluation for elastomeric impression materials use animal based cell lines, which the clinical relevance has been often questioned. Hence, the purpose of this study was to examine the difference in results with both human based and animal based fibroblast cell line. Materials and Methods: Three types of fibroblast cells were used in this study; conventional mouse fibroblasts of L929, human gingival fibroblasts (HGF-1), and immortalized human oral fibrobalsts (hTERT-hNOF). Test on extract and test by direct contact using different commercially available elastomeric impression materials were carried out according to the international standards. Result: There was significant difference in cell viability between types of fibroblasts cell used, where HGF-1 showed highest cell viability and L929 the lowest. Conclusion: Within the limitation of this study, careful consideration must be given when selecting the cells and interpreting the results for cytotoxicity evaluation of elastomeric impression materials, where use of human based cell lines such as hTERT-hNOF would be appropriate for both ease of cytotoxicity test and clinical relevance.
Purpose: Standards of alloy for porcelain fused to metal crown be classified by metallic factor and biological factor. Metallic factors consist of stability of alloy composition and mechanical strength and surface characteristics for chemical bond. Biological factors be considered properties of metallic elements and problems originated by toxicity and hypersensitive reaction. Alloys considered such controversial points are the most suitable alloy for dental instrument. Method: Alloys added Be and Nb using Ni-Cr alloy which has been widely used for dental instrument be selected and classified experimental group. Non-addition Be and Nb to Ni-Cr alloy classify control group and addition Be alloy is Be-experimental group, addition Nb alloy is Nb-experimental group. Specimens for cytotoxicity analysis gave effect to washing and sterilization. and then made an experiment on elution with cell medium after disinfection. It conducted specimens within cell medium with 24hours, 48hours, 72hours, respectively. It cultured human dermal fibroblast(HDF) using cell medium for cytotoxicity test and then investigated elution rate through spectroscopic analysis by MTT-assay. Result: As results of cytotoxicity test by MTT-assay, cultured cell rate of VII measured more low numerical value within elution medium for 24hours focused on control group. Also, cultured cell rate of K3 alloys observed low value for 48hours, 72hours than value of control group. Conclusion: According to final result that synthesize above results, Ni-Cr alloy added Be and Ni has little difference in Cytotoxicity by MTT-assay.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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