섬유아세포 표면의 미세구조적 특성과 세포표면에 존재하는 당 단백질 말단 GlcNAc(N-acetylglucosamine)와 NeuNAc(N-acetylneuraminic acid)는 섬유세포의 이동과 세포의 인식에 중요한 역할을 하는 것으로 알려졌다. 따라서 섬유세포의 미세구조적 특성을 전자현미경을 사용하여 관찰하였으며, 당 단백질 말단 GlcNAc와 NeuNAc의 분포를 확인하기 위하여 WGA 황금입자 복합체를 반응시켜 전자현미경으로 관찰하였다. 그 결과 배양섬유세포의 표면에 미세구조적 특성은 세포의 분화 정도와 세포의 부위에 따라 다양한 형태를 형성하며, 세포의 배양시간에 따라 정도의 차이는 있으나 일반적인 미세융모의 분포와 세포질 돌기의 분화는 세포의 주위 환경에 따라 다양한 형태로 분화하는 특성이 있는 것으로 확인되었다. 섬유세포의 세포표면에 분포하는 당 단백질 말단의 일종으로 섬유세포의 이동과 세포인식에 관여하는 lectin WGA 수용체 인 sialic acid (GlcNAc; N-acetylgalactosamine, NeuNAc; N-acetyl neuraminic acid)는 세포질의 조면소포체에서 생성되어 액포상태로 이동되어 섬유세포의 외로 분비되고 분비된 sialic acid는 세포의 표면과 돌기의 표면에 당 단백질 말단으로 분화하여 섬유세포의 이동과 세포인식 등의 섬유세포 기능에 관여하는 것으로 규명되었다.
In order to investigate whether or not CCD-980sk cell line can be affected by Korean Citrus junos and medicinal herbs, we examined the MTT assay when we treated Korean Citrus junos and medicinal herbs in CCD-986sk human fibroblast cell line. The samples that added complex of grinded extracts of Korean Citrus junos and boiling-water extracts from Korean medicinal herbs were tested toy cell proliferation activity by means of a modification of the MTT assay. Among mixture of Citron 3 (Citron 3, less mellowed citron which was ripened for three months) and boiling-water extracts, the group Citron 3+Phellinus linteus showed significantly strong cell proliferation activity. And among mixture of Citron 4 (Citron 4, completely mellowed citron which was ripened for four months) and boiling-water extracts, the group Citron 4+Cordyceps militaris and Citron 4+Phellinus linteus showed significantly strong cell proliferation activity, respectively. These results suggest that complex of Korean Citrus junos and medicinal herbs could be an excellent candidate toy protection of human skin aging.
Fetal bovine serum (FBS), which contains various nutrients, comprises 20% of the growth medium for cell-cultivated meat. However, ethical, cost, and scientific issues, necesitates identification of alternatives. In this study, we investigated commercially manufactured serum-free media capable of culturing Hanwoo satellite cells (HWSCs) to identify constituent proliferation enhancing factors. Six different serum-free media were selected, and the HWSC proliferation rates in these serum-free media were compared with that of control medium supplemented with 20% FBS. Among the six media, cell proliferation rates were higher only in StemFlexTM Medium (SF) and Mesenchymal Stem Cell Growth Medium DXF (MS) than in the control medium. SF and MS contain high fibroblast growth factor 2 (FGF2) concentrations, and we found upregulated FGF2 protein expression in cells cultured in SF or MS. Activation of the fibroblast growth factor receptor 1 (FGFR1)-mediated signaling pathway and stimulation of muscle satellite cell proliferation-related factors were confirmed by the presence of related biomarkers (FGFR1, FRS2, Raf1, ERK, p38, Pax7, and MyoD) as indicated by quantitative polymerase chain reaction, western blotting, and immunocytochemistry. Moreover, PD173074, an FGFR1 inhibitor suppressed cell proliferation in SF and MS and downregulated related biomarkers (FGFR1, FRS2, Raf1, and ERK). The promotion of cell proliferation in SF and MS was therefore attributed to FGF2, which indicates that FGFR1 activation in muscle satellite cells may be a target for improving the efficiency of cell-cultivated meat production.
The Debao pony ear marginal tissue fibroblast cell line (NDPEM 2/2) was uccessfully established using either primary explant technique or collagenase technique. The characterizations of the cell line were identified as following: the cells were adherent and of density limitation; population doubling time (PDT) of cells made with the two techniques were 35.9 h and 48 h, respectively; chromosome analysis showed that the frequency of cell chromosome number to be 2n=64 was 91.3%-92.8%. Confirmed by isoenzyme analysis, this cell line had no cross- contamination. Tests for microbial contamination from bacteria, fungi, virus or mycoplasma were negative. This newly established cell line meets all the standard quality controls of ATCC. It will provide a precious genetic resource for the conservation of the Debao pony breed, as well as effective experimental material for genetic studies on Debao ponies.
This study was performed to investigate the effects of infrared and visible light laser irradiation on cell viability of human gingival fibroblast. For the present study, the author used cultured fibroblast originated from sound gingiva which were fifth of sixth passage. Laser machine utilized here were stomalaser which irradiate infrared (GaAs diode) and red (HeNe) laser in turn with pulse wave pattern or continuous wave pattern, and the machine had several frequency mode presented by regeneration, relaxation and analgesic modalities. Cultured fibroblast samples were divided by this modalities of cell counts and laser exposure time which were 7-seconds of 150 seconds, respectively. 1 day after laser irradiation, each cell-well was treated with MTT and measured optical density with ELISA. The obtained results were as follows : 1. There was a tendency of increasing optical density in proportion to irradiation time in groups of $1\times10^4$ cell per well but in groups of $5\times10^3$ cell per well, reverse phenomena were observed. 2. The difference of optical density according to frequency modalities were not showed significantly except several cases in groups of $5\times10^3$ cell per well. 3. In general, cell viability of cultured human gingival fibroblast wer not showed consistent feature by low level laser irradiation.
Park, Sang-Hyun;Park, Sang-Wook;Yun, Ji-Yung;Jun, Soon-Hong;Kim, Nam-Hyung
한국동물번식학회:학술대회논문집
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한국동물번식학회 2002년도 춘계학술발표대회 발표논문초록집
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pp.11-11
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2002
Interspecies nuclear transfer has been interested to determine ability of oocyte cytoplasm to support reprogramming of somatic cell nuclei of different species. In this study, we investigated developmental ability and mRNA expression patterns of developmentally important genes in bovine reconstructed embryos using a mouse fibroblast cell nucleus. While 20% nuclear transferred embryos with bovine fibroblast developed to morulae/blastocysts, a few(2-5%) nuclear transferred bovine embryos with mouse fibroblast developed to morula. (omitted)
Chlorhexidine and Listerine are widely used in dentistry due to its effectiveness on plaque control and bactericidal action. The effects of these agent on chronic gingivitis and wound healing following surgical periodontal therapy in human has been favorable. Understanding the effects of chlorhexidine and Listerine on human gingival fibroblast will provide the rationale for its use during the healing process of periodontal surgery. The purpose of this study was to compare the effects of chlorhexidine and Listerine on human gingival fibroblast. Human gingival fibroblasts were cultured from the healthy gingiva on the extracted premolar of orthodontic patients. Human gingival fibroblast were trypsinized and cultured in growth medium added range of 0.0012-0.12% chlorhexidine and 1-100% Listerine mouth wash solution. The cell used in this study were between fifth to eighth passage number. The cell morphology were examined by inverted microscope and the cell activity were measured by MIT assay. The Morphology of gingival fibroblast added Chlorhexidine and Listerine at the concentration of all range were became globular and lost their cytoplasmic process. Our results indicate that a 0.0012 concentration of chlorhexidine and 1% concentration of Listerine were shows minimal cytotoxicity, but above these concentraion, there was a significant difference between the cell activity in the experimental group and control group(p
Objective: This study aimed to determine the protective efficacy of Buddha's Temple (BT) extract against tert-butyl hydroperoxide (t-BHP)-induced oxidative stress in Gallus gallus chicken embryo fibroblast cell line (DF-1) and its effects on the cell lipid metabolism. Methods: In this experimental study, Gallus gallus DF-1 fibroblast cells were pretreated with BT 10-7 for 24 hours, followed by their six-hour exposure to t-BHP (100 μM). Water-soluble tetrazolium salt-8 (WST-8) assays were performed, and the growth curve was computed. The intracellular gene expression changes caused by BT extract were confirmed through quantitative polymerase chain reaction (qPCR). Flow cytometry, oil red O staining experiment, and thin-layer chromatography were performed for the detection of intracellular metabolic mechanism changes. Results: The WST-8 assay results showed that the BT pretreatment of Gallus gallus DF-1 fibroblast cell increased their cell survival rate by 1.08%±0.04%, decreased the reactive oxygen species (ROS) level by 0.93%±0.12% even after exposure to oxidants, and stabilized mitochondrial activity by 1.37%±0.36%. In addition, qPCR results confirmed that the gene expression levels of tumor necrosis factor α (TNFα), TIR domain-containing adapter inducing IFN-beta (TICAM1), and glucose-regulated protein 78 (GRP78) were regulated, which contributed to cell stabilization. Thin-layer chromatography and oil red O analyses showed a clear decrease in the contents of lipid metabolites such as triacylglycerol and free fatty acids. Conclusion: In this study, we confirmed that the examined BT extract exerted selective protective effects on Gallus gallus DF-1 fibroblast cells against cell damage caused by t-BHP, which is a strong oxidative inducer. Furthermore, we established that this extract significantly reduced the intracellular ROS accumulation due to oxidative stress, which contributes to an increase in poultry production and higher incomes.
The success of embryo cloning depends on numerous factors; interaction between recipient ooplasm and donor nucleus, nuclear reprogramming, oocyte activation, and donor cell cycle and type. In this study, the cell cycle and apoptosis of bovine fetal fibroblast as a donor cell for embryo cloning were evaluated following different activation treatments. (omitted)
Purpose: The biocompatibility and bio-adhesive property of a dental implant abutment are important for proper soft tissue healing and maintenance of osseointegration of implant. However, studies of soft tissue healing and mucosal attachment of various materials of implant abutment other than titanium are still needed. In this study, cell attachment, proliferation, cytotoxicity of human gingival fibroblast for ceramic, gold alloy, Ni-Cr alloy and, commercially available pure titanium as a control were evaluated, using MTS and scanning electron microscopy. Materials and Methods: Specimen was designed to disc, 4mm diameter and 1mm thickness, made of ceramic, gold alloy, Ni-Cr alloy and commercially available pure titanium. Primary culture of human gingival fibroblasts were grown in Dulbecco's modified Eagle's medium with 10% fetal bovine serum and 1% antibiotics. Cells were inoculated in the multiwell plates placed the specimen disc. Cell Titer 96 AQucous One Solution Cell Proliferation Assay were done after 1hour 3hours, 24hours, 3days, 5days of incubation. The discs were processed for scanning electron micrography to evaluate cell attachment and morphologic change. Results: The results were obtained as fellows. 1. The ceramic showed high cell attachment and proliferation and low cytotoxicity, which is as much bioadhesive and biocompatible as titanium. 2. The gold alloy represented limited proliferation of human gingival fibroblast and the highest cytotoxicity among tested materials (p<0.05). 3. The Ni-Cr alloy limited the proliferaion of the human gingival fibroblast compared to titanium(p<0.05) but cytotoxicity on the bottom of well was not so considerable, compared to titanium. 4. On the scanning electron micrographs , the ceramic showed good attachment and proliferation of human gingival fibroblast, which was similar to titanium. But gold alloy and Ni-Cr alloy showed the shrinkage of gingival fibroblast both after 24 hours and 3 days. On 5th day, small amount of the human gingival fibroblast proliferation was observed on the Ni-Cr alloy, while the shrinkage of gingival fibroblast was still observed on the gold alloy. Conclusions: These results suggest that the ceramic abutment is as biocompatible as titanium to make proper mucosal seal. The gold alloy has a high cytotoxicity to limit proliferation of gingival fibroblast, which suggest limited use on the anterior tooth where soft tissue healing is recommeded.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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