인삼의 약리활성 성분인 사포닌 성분의 추출분획 중 ginsenoside 함량을 높이거나 화학적 성분 변화를 줄이거나 또는 추출과정을 간편화하기 위한 새로운 추출 분획 방법을 정립하고 기존의 방법과 화학적 조성을 비교하였다. 인삼사포닌의 분획분리 방법으로서 일반적인 고온 MeOH/n-BuOH추출법(BuOH법) 및 고온 MeOH/Diaion HP-20법(HP-20법) 이외에도 새로운 3가지 방법, 즉 고온 MeOH 추출/cation AG 50W 흡착/$H_2O$ 용출/n-BuOH 추출법(AG 50W법), 상온 MeOH/Diaion HP-20법(상온추출법), EtOAc/n-BuOH 직접추출법으로 조사포닌을 분리하였다. AG 50W법에 의한 조사포닌 중 총 ginsenoside 함량은 61.5%로 가장 높았으며 반대로 단백질과 유리 아미노산 함량은 각각 0.93과 0.19%로 다른 방법에 비해 현저히 낮게 나타났다. 단백질의 함량은 HP-20법에 의한 분리가 14.18%로 가장 높았고, 유리당은 BuOH법이 13.5%로서 HP-20법 및 AG 50W법에 비해 $20{\sim}40$배 높은 것으로 나타나 유리당이 BuOH법에 의한 조사포닌 중 순수사포닌 함유 비율을 낮추는 한 요인임을 알 수 있다. 한편, 본 연구에서 새로이 정립한 AG 50W법의 경우 prosapogenin의 생성이 많았다. 그 밖에, 사포닌 분석시료의 신속한 조제를 위하여 추출과정을 단축하여 EtOAc/n-BuOH 혼합용매로 직접 환류추출할 경우, ginsenoside $Rg_1$과 Re의 조성이 높게 나타났다. 본 연구 결과는 조사포닌의 조제 방법에 따라 ginsenoside, 유리당 및 조단백질 등 화학성분의 조성이 현저히 다르며 실험목적에 따라 적절한 방법이 이용될 수 있음을 시사한다.
가압형 마이크로웨이브 추출장치를 이용하여 추출조건(에탄올농도, 추출온도 및 추출시간)에 따른 인삼 ginsenosid서 추출특성을 반응표면분석에 의해 모니터링하고, 마이크로파 추출법의 추출효율을 확인하였다. 조건별 추출물의 ginsenoside함량에 대한 회귀식의 $R^2$는 대부분 0.830이상으로 $10\%$이내의 수준에서 유의성이 인정되었다. $Ginsenoside-Rb_2$ -Rc, -Re 및 $-Rg_1$은 추출온도가 높을수록 증가하여 $140^{\circ}C$에서 가장 높게 나타났으며, 에탄을 농도가 $50\~75\%$에서 가장 높은 추출율을 보였다. Ginsenoside의 HPLC 패턴은 MAP 추출온도 $120^{\circ}C$에서 unknown peak가 확인되었으며, $150^{\circ}C$추출에서는 unhown peak가 증가되었다. $Ginsenoside-Rb_2$와 -Re 함량에 미지화합물(unknown peak)을 포함하였을 때 는 최대의 추출온도가 $129^{\circ}C$에서 $147^{\circ}C$로 증가하였고, 동시에 추출시간과 $R^2$가 증가하였다. MAP 추출에서 unknown화합물의 함량이 최소가 되는 조건은 에탄올 농도 $67.33\%$, 추출온도 $99.34^{\circ}C$, 추출시간 3.65분이었다. 추출효율의 확인시험에서 8분간의 MAP추출법은 현행 추출법(40시간) 매우 유사한 수준의 ginsenoside 추출효율을 나타내었다.
In this study, we prepared CheonJeongKiBo-Dan(7 oriental medicinal plants, 7OMP: Astragalus Membranaceus root, Panax Ginseng root, Glycyrrhiza Glabra (licorice) root, Schizandra Chinensis fruit, Polygonatum Odoratum, Rehmannia Glutinosa root, Paeonia Albiflora root) by extracting them in one reactor and studied its efficacies on skin. UV irradiation has been suggested as a major cause of photoaging in skin. In order to investigate protective effects against UV-B induced cellular damage, 7OMP was extracted with 70% ethanol and dissolved in DMSO. The protective effect was detected by MTT assay, reactive oxygen species (ROS) generation, phosphorylation of ATR and p53 in human dermal fibroblast cell system after UV-B irradiation. 7OMP reduced UV-B-induced cellular damage in HDFs cells, and inhibited ROS generation. UV-B-induced toxicity accompanying ROS production and the resultant DNA damage are responsible for activation of ATR, p53 and Bad. In this study, 7OMP hampered phosphorylations of ATR and p53 in human dermal fibroblasts. Therefore, 7OMP may be protective against UV-induced skin photoaging.
본 연구는 홍삼, 인진쑥, 형개, 회향으로부터 기능성 성분을 분리 및 검출하는 것을 목적으로 하였다. 홍삼의 열수 추출물에 함유된 maltol과 adenosine을 HPLC를 이용하여 분리할 수 있었다. 그 중 maltol은 그 분획을 얻어 UV-visible 흡광도의 측정과 MS를 이용한 분자량 측정을 통하여 maltol 임을 재확인하였다. 그리고 인진쑥, 형개, 회향을 여러 가지 용매로 추출하여 그 추출물을 GC-MS로 분석한 결과, 인진쑥에는 limonene, menthone, anethole 등의 성분이 미량 검출되었고 회향에는 limonene 외의 성분은 거의 검출이 이루어지지 않았다. 본 실험 중 형개 추출물의 추출 효율이 가장 우수했는데 목적 성분 중 limonene, menthone, pulegone을 고농도로 얻을 수 있었다. 본 연구 결과로서 천연 약용 식물에서 기능 성분의 분리, 정제 시 각 성분에 대한 화학적 안전성을 확보할 수 있었으며, 한방 약초로부터의 기능성 화학성분의 정량분석을 HPLC, GC-MS 등의 분석방법으로 수행하였다. 본 실험의 결과는 향후 목적하는 phytochemicals을 함유한 복합체 기능성 연구에 사용하고자 한다. 약용식물 유래의 유용화합물과 안정성이 확보된 고분자 형성물질에 의해 만들어진 복합체는 새로운 기능을 나타낼 수 있으며, 식품, 화장품, 의약품 등에 다양한 이용가능성이 예상된다.
본 연구에서는 해양미세조류 A. carterae의 기능성 평가를 위해 에탄올 추출을 하였고, 기존의 건강기능성식품인 클로렐라를 에탄올 추출하여 기능성을 비교하였다. 클로렐라 에탄올 추출물(CE)과 A. carterae 에탄올 추출물(AE)의 총페놀성 화합물은 각각 47.39 mg/g과 8.88 mg/g 으로 CE가 5.33배 높았으나, DPPH 라디컬소거능은 22.42%와 20.16%로 비슷한 수준이었다. 반면에 CE와 AE의 ABTS 라디컬 소거능은 각각 28.58%와 17.69%로 CE가 높아 CE의 항산화능은 페놀성 화합물의 효과로 판단된다. AE(10 mg/mL)의 항균활성은 그람음성균 6종과 그람양성균 10종에서 확인하였다. 그리고 CE(10 mg/mL)의 항균활성은 그람음성균 3종과 그람양성균 3종에서 확인되었다. ${\alpha}$-glucosidase의 억제활성은 AE($500{\mu}g/mL$)에서 82.07%이었고, CE는 효소활성을 촉진하는 것으로 나타났다. 암세포 생장억제활성은 $125{\mu}g/mL$ 농도의 AE를 첨가했을 때, HepG2와 HT-29의 생존율이 각각 38%와 11.27%이었다. $31.25-125{\mu}g/mL$의 농도범위에서 CE 첨가가 HepG2와 HT-29의 생장을 촉진하는 것으로 확인되었다. 이와 같은 결과를 종합하면, A. carterae 에탄올 추출물은 페놀성 화합물 이외의 항산화 물질을 보유하고, 항균활성, 항당뇨효과와 암세포 억제활성이 우수한 기능성 물질을 함유하고 있는 것으로 판단되어 기능성 소재로써의 활용가치가 높을 것으로 판단된다.
Objective : The water extract of Bojungikgi-tang (BTE) composed with Ginseng Radix, Astragali Radix, Angelicae gigantis Radix, Atractylodes Rhizoma alba, Aurantii nobilis Pericarpium, Glycyrrhizae Radix, Cimicifuga Rhizoma, and Bupleuri Radix and it has been traditionally used for chronic diseases or weakness after illness in oriental countries. However, little is known about the effects of aqueous extract of BTE on trimellitic anhydride (TMA)-induced contact hypersensitivity (CHS). Therefore, the aim of this study was to investigate the effects of BTE on TMA-induced CHS in BALB/c mice.Methods : In this study, the extract of BTE was prepared by extracting with distilled water at 100℃ for 2.5 h. The extract was freeze-dried following filtration through 0.45 μm filter. Mice were orally administrated with or without BTE extract of different doses (25-200 ㎎/㎏/day) for 28 days. During the challenge period, mice were externally applied with different doses of BTE extract one time per day 30 min before TMA treatment. I examined the effects of BTE on the serum levels of IgE, IgG1, IgG2a, and IgG2b, nitric oxide (NO) and prostaglandin E2 (PGE2) production in isolated peritoneal macrophages, Th2 cytokine production in isolated spleen cells, ear swelling responses, and the leukocyte infiltration induced by TMA.Results : The orally and externally administration of BTE dose-dependently reduced the serum levels of hapten-specific immunoglobulin E (IgE), IgG1 titer, and PGE2 production as well as ear swelling responses and leukocyte infiltration in TMA-induced BALB/c mice. The levels of NO and PGE2 production from peritoneal macrophages stimulated with TMA-BSA were markedly suppressed by pretreatment with BTE in a concentration dependent manner. Furthermore, the levels of Th2 cytokines (IL-4, IL-5, IL-13) production from spleen cells stimulated with ConA were markedly suppressed by BTE treatment in a concentration dependent manner.Conclusions : These results suggest that BTE treatment suppresses chronic contact hypersensitivity, and it can be assumed that the suppression of ear swelling, serum IgE, NO and PGE2 levels, leukocyte infiltration, and Th2 cytokines in an animal model. Therefore, these properties may contribute to the strong anti-CHS response effect of BTE.
Objectives : This study was to evaluate the anti-inflammatory and anti-pruritic effects of WSY-1075 composited with Corni Fructus, Angelica gigantis Radix, Lycii Fructus, Ginseng Radix, Cervi parvum Cornu and Cinnamomi Cortex in rat peritoneal mast cells (RPMCs) and scratching mouse model. Methods : WSY-1075 was prepared by extracting with 30% ethanol. In the present study, we investigated the effect of WSY-1075 on the production of tumor necrosis factor-${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$), interleukin-$1{\beta}$ (IL-$1{\beta}$) and histamine in rat peritoneal mast cells (RPMCs) activated with phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) plus calcium ionophore A23187, and on the scratching behavior in mice treated with pruriogens. Results : WSY-1075 was not cytotoxic effect in used all concentration. PMA plus A23187 treatment significantly increased TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$ and IL-6 production compared with media control in RPMCs. However, TNF-${\alpha}$, $IL1{\beta}$ and IL-6 production increased by PMA plus A23187 treatment were significantly inhibited by WSY-1075 (200 ${\mu}g/mL$ and 400 ${\mu}g/mL$). WSY-1075 also inhibited the histamine release from RPMCs stimulated by compound 48/80, which promotes histamine release. Moreover, WSY-1075 administration had an inhibitory effects on the scratching behavior induced by pruritogen (compound 48/80, histamine, serotonin and substence P) in ICR mice. Conclusion : These results suggest that WSY-1075 administration (200 mg/kg or 400 mg/kg) has the anti-inflammatory and anti-pruritic effects on the activated rat peritoneal mast cell and mouse pruritus. WSY-1075 has a potential use as a composition of medicinal plants for treatment against inflammation- and pruritus-related disease.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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