This study was undertaken to obtain basic data on the histological changes in the tracheal cartilage of the embryos and fetuses of the Korean native cattle. Twenty-two embryos and fetuses of the Korean native cattle, ranging from 30mm(peesumptive fetal age 44 days) to 440mm(presumptive fetal age 168 days) in crown-nump(C-R) length, were used for present study. The results were summerized an follows; 1. Mesenchymal cells differentiated as chondroblasts were condensed into tracheal cartilage in the CRL 30mm of the Korean native cattle embryo, and the chondrocytes begun to appear in the tracheal cartilage in the CRL 40mm fetus. 2. The tracheal cartilage in the CRL 70mm fetus was composed of the large number of chondrocytes. The histochemi8cal reactions for glycosaminoglycans showed strong positive reaction in the CRL 380mm, and for collagen substance showed mildly in the 6th experimental group.
모체 출산 연령이 늦어짐에 따라 태아의 염색체 이상 빈도는 증가하는 것으로 알려져 있는데, 이는 난자의 노화에 따른 염색체의 비분리 현상의 증가 등이 주된 원인이다. 염색체 양 말단에 존재하는 텔로미어는 염색체의 안정성에 관여하고 세포분열이 진행됨으로써 이의 길이가 짧아져 노화의 지표로 활용되고 있다. 따라서 본 연구는 모체의 노화가 생산 배아에 미치는 영향을 알아보기 위하여 닭의 산란 연령별 배아의 염색체 이상 빈도와 이들의 텔로미어 함량을 분석하였다. 시험 분석은 20주령에서부터 70주령까지의 화이트 레그혼 종을 공시하고 10주 간격으로 생산된 수정란의 초기 배아에 대한 핵형 분석과 양적형광보인법(Q-FISH)을 이용한 모계 및 생산 배아의 텔로미어 함량을 분석하였다. 분석 결과, 초기 배아의 염색체 이상 빈도는 산란 연령에 따른 유의적인 차이가 있었는데, 산란 초기에 상대적으로 높은 염색체 이상 빈도를 보이다가 산란 중기에서 안정된 빈도를 유지하고, 후기부터 다시 이상 빈도가 증가하는 양상을 보여 모체의 노화가 태아의 염색체 이상 빈도에 영향을 미치는 것으로 나타났다. 개체의 텔로미어 함량은 연령이 증가함에 따라 점진적 감소 양상을 나타내는 반면, 모계 연령에 따른 생산 배아들의 텔로미어 함량은 연령 간에 차이가 없는 것으로 나타나 모체의 노화가 수정 배아의 텔로미어 함량에는 영향을 미치지 않는 것으로 보여진다. 이는 배란 후 수정이 된 배아는 초기 발생 과정 중 세포들의 reprograming이 일어나 텔로미어가 복구됨을 의미한다.
Pathological and virological investigations were conducted on suspected outbreaks of infectious bursal disease (IBD) in a broiler farm and five pullet-raising poultry farms of Mymensingh and Tangail districts of Bangladesh. About 80 to 100 percent chicks were affected at the age of 26 to 45 days and mortality varied from 20 to 30 percent in broilers and 40 to 80 percent in layer chicks. Signs, symptoms, gross and microscopic lesions were typical of acute IBD. Several isolates of virus could be obtained by embryo inoculation and the virus was diagnosed as infectious bursal disease virus (IBDV) by agar gel immunodiffusion test (AGID). The virus isolate belonged to the very virulent pathotype of IBDV causing 100 percent mortality in three weeks old chicks on experimental infection.
This experiment was conducted to obtain the basic information on new- and latent-bud formation, and stem vestige arrangement on the rhizome of Panax ginseng C.A. Meyer. Latent buds emerged from meristematic region between shoot and root of the embryo, and new buds for the next year were distributed both at the bottom portion of the stem and the rhizome. In the new buds, organs such as leaf, stem, and flower bud were already completely differentiated, while the latent bud had an undifferentiated meristematic tissue arranged linearly in a vertical line, indicating that each year new- and latent-buds are formed successively. This result suggests that the number of stem vestige may be used for the determination of ginseng age. Key words Rhizome, new-bud, latent-bud, histology, morphology, stem vestige, vestige arrangement.
KO mice provide an excellent tool to determine roles of specific genes in biomedical filed. Traditionally, knockout mice were generated by homologous recombination in embryonic stem cells. Recently, engineered nucleases, such as zinc finger nuclease, transcription activator-like effector nuclease and clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR), were used to produce knockout mice. This new technology is useful because of high efficiency and ability to generate biallelic mutation in founder mice. Until now, most of knockout mice produced using engineered nucleases were C57BL/6 strain. In the present study we used CRISPR-Cas9 system to generate knockout mice in FVB strain. We designed and synthesized single guide RNA (sgRNA) of CRISPR system for targeting gene, Abtb2. Mouse zygote were obtained from superovulated FVB female mice at 8-10 weeks of age. The sgRNA was injected into pronuclear of the mouse zygote with recombinant Cas9 protein. The microinjected zygotes were cultured for an additional day and only cleaved embryos were selected. The selected embryos were surgically transferred to oviduct of surrogate mother and offsprings were obtained. Genomic DNA were isolated from the offsprings and the target sequence was amplified using PCR. In T7E1 assay, 46.7% among the offsprings were founded as mutants. The PCR products were purified and sequences were analyzed. Most of the mutations were founded as deletion of few sequences at the target site, however, not identical among the each offspring. In conclusion, we found that CRISPR system is very efficient to generate knockout mice in FVB strain.
To improve nuclear transplantation(NT) efficiency and to produce a large scale genetically identical cloned calves, examined the in vitro development capacity after co-culture of bovine oviductal epithelial cells (BOEC) and granulosa cells in TCM-199 supplemented with 10% fetal calf serum (FCS) with early bovine embryos derived from in vitro matured fertilized(IVM-IVF) oocyte. In addition, the age dependence of IVM oocyte on electro-stimulation and the effective electric voltage on in ivtro development of bovine NT embryos were examined. The results obtained were summerized as follows; 1. The cleavage rates of IVM-IVF bovine embryos in co-culture with bovine oviductal epithelial cells and granulosa cells were not significantly different(P<0.05), but the developmental rate into morula and blastocyst stage were different showing 38.3 and 20.2%, respectively. 2. The activation (82.5%) and development in vitro(8.6%) into later embryo stages of the aging oocytes of 32 hours post-maturation (hpm) were significantly higher than those of 24 hpm at direct current (DC) voltage of 1.5kV/cm, 60$\mu$sec pulse duration and 1 pulse time. 3. The fusion rates of NT eggs of 32 hpm following to different DC voltages from range 0.75 to 1.5kV/cm were not differ, but the developmental rate into morula and blastocyst stages at DC voltages of 0.75 and 1.0kV/cm were higher(11.4 and 12.6%, respectively) than those of 1.5kV/cm(0%). From these results, it can be suggested the optimal culture system for in vitro culture of IVM-IVF bovine embryos is a co-culture system with BOEC in TCM-199 supplemented 10% FCS. The effective time and the DC voltage for activation, electrofusion and in vitro development of NT embryos derived from IVM-IVF bovine embryo are 32hpm and 0.75~1.0kV/cm. But to improve NT efficiency, the advanced research (cell cycle synchronization, micromanipulation, culture system, etc.) is needed.
The prenatal development of lateral motor columns in the lumbar spinal cord was studied by electron microscopy in human embryos and fetuses ranging from 9 mm to 260 mm crown-rump length ($5{\sim}30$ weeks of gestational age). At 9 mm embryo, the lateral motor column were developed from ventro-lateral projection into the marginal layer and composed of primitive neuroblasts. At 20 mm embryo the primitive motor neurons were packed closely together and could readly be distinguished from primitive glioblasts by a presence of large nuclei. The primitive multipolar neurons were observed in lateral motor column at 40 mm fetus. At 80 mm fetus multipolar neurons were characterized by their many dendrites and axons in the vicinity of motor neuron perikarya. At 260 mm fetus, the motor neurons were large and contained all intracytoplasmic structures in the cytoplasm which were also found in mature motor neuron in lateral motor column. The first axo-dendritic synapses found at 40 mm fetus and increased in number throughout fetal development. Axo-somatic synapses with spherical vesicles were first observed at 80 mm fetus. A few axo-somatic synapses were found at next prenatal stages. Axo-dendritic and axo-somatic synapses contained mixed populations of spherical and flattened vesicles by 120 mm fetus. These findings indicate that axo-dendritic synapses develop prior to axo-somatic synapses in the spinal cord during neurogenesis.
Keane, Kevin N;Ye, Yun;Hinchliffe, Peter M;Regan, Sheena LP;Dhaliwal, Satvinder S;Yovich, John L
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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제46권4호
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pp.178-188
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2019
Objective: To determine the clinical pregnancy (CP) and live birth (LB) rates arising from frozen embryo transfers (FETs) that had been generated under the influence of in vitro fertilization (IVF) adjuvants given to women categorized as poor-prognosis. Methods: A registered, single-center, retrospective study. A total of 1,119 patients with first FETs cycle include 310 patients with poor prognosis (109 treated with growth hormone [GH], (+)GH group vs. 201 treated with dehydroepiandrosterone, (-)GH group) and 809 patients with good prognosis (as control, (-)Adj (Good) group). Results: The poor-prognosis women were significantly older, with a lower ovarian reserve than the (-)Adj (Good) group, and demonstrated lower chances of CP (p< 0.005) and LB (p< 0.005). After adjusting for confounders, the chances of both CP and LB in the (+)GH group were not significantly different from those in the (-)Adj (Good) group, indicating that the poor-prognosis patients given GH had similar outcomes to those with a good prognosis. Furthermore, the likelihood of LB was significantly higher for poor-prognosis women given GH than for those who did not receive GH (p< 0.028). This was further confirmed in age-matched analyses. Conclusion: The embryos cryopreserved from fresh IVF cycles in which adjuvant GH had been administered to women classified as poor-prognosis showed a significant 2.7-fold higher LB rate in subsequent FET cycles than a matched poor-prognosis group. The women with a poor prognosis who were treated with GH had LB outcomes equivalent to those with a good prognosis. We therefore postulate that GH improves some aspect of oocyte quality that confers improved competency for implantation.
To identify an antioxidant system, Se and Vit. E were administered into Hanwoo young sire and the effects of administration on blood components(Se, Vit. E, chemical values, estradiol-17 $\beta$, testosterone) were examined. The 16 heads ranging from twenty to thirty two months of age were randomly assigned to control group, Se-administered group(Se-group), Vit. E-administered group(Vit. E-group) and Se and Vit. E administered group(Se and Vit. E-group). Each reagent (Se : 0.1 mg, Vit. E . 1,500IU, Se+vit. E : 0.1 mg+1,500IU per kg of body weight, respectively) administered 3 times every 30days by intramuscular injection. Se concentration in serum was higher in Se-group and Se and Vit. E-group than in control group and Se and Vit. E-group also was higher than Vit. E-group(p<0.05). Although all Se-, Vit. E-administered groups were a little higher than control group, the injection of Se and Vit. E were not significant effect on Vit. E concentration in serum(p>0.05). All groups showed significant variance by periods, but there were not significantly different among groups in blood chemical values. The estradiol-17 $\beta$ concentrations of all Se-, Vit. E-administered groups were a little higher than those of control group, but there were not significant(p>0.05). There have no significant difference among groups in testosterone concentration. These results indicate that the administration of Se, Se + Vit. E increase Se concentration in Hanwoo young bull.
The effects of an antiprogesterone (RU 486) and an antiestrogen (tamoxifen) on ovulatory response and oocyte morphology were examined in pregnant mare serum gonadotropin (PMSG)-primed immatare female rats (28 days of age): a comparison has been made on two different regirnens primed with a "control" dose (4 IU) and a "superovulatory" dose (40 IU) of PMSG. Females for control control regimen received three consecutive injections of lmg RU486, lmg tamoxifen, or vehicle at 24, 36 and 48hr, and were killed at 72l'r after PMSG. Animals for superovalatory regimen received lmg RU486, 2.5mg tamoxifen, or vehicle fouowlag the injection schedule comparable to control regimen, and were killed at 60 and 72hr after PMSG. Compared to vehicle group, there was a significant reduction in ovulatory response as judged by the proportion of rats ovulating andi or by the mean number of oocytes per rat for each treatment of RU486 and tamoxifen in both regimens. The activity of tamoxifen in inhibiting the ovulatory response was greater in control, but less in superovulatory regimen than that of RU486 based on the dose employed for each antisteroid. In both regimens, RU 486 did not have any effect 6n the changes in the proportion of degenerate oocytes as well as ovarian weight, well tamoxifen treatment resulted in a marked promotion of oocyte degeneration as well as a great reduction in ovarian weight, compared to each parameter of vehicle group. RU486 treatment in each regimen did not alter the serum levels of any steroid hormones observed. Howerver, tamoxifen treatment was associated with significant increases in serum 17$\beta$-estradiol and decreases in progesterone in both regimens; also significant increases in androgens in superovulatory regimen. The results illustrate the relative inhibitory activity of RU486 and tamoxifen indicating major steroid hormone involved in PMSG-induced ovulation: 17$\beta$-estradiol for control and progesterone for superovulatory regimen. It also appears that tamoxifen-associated elevation of circulating 17$\beta$-estradiol andi or androgens could be in part, a contributing factor to the promotion of oocyte degeneration presumably by producing a hostile oviductal environment after ovulation.ent after ovulation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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