대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.1
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pp.280.1-280.1
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2003
The high-performance liquid chromatography method was performed for test method development of related compounds in pharmaceuticals. Using reverse-phase column and gradient elution of 1 % acetonitrile-acetonitrile: H20:triethylamine (70:30:0.5), lansoprazole, 2-hydroxybenzimidazole, 2-mercaptobenzimidazole, lansoprazole sulfone, lansoprazole sulfide could be individually identified and quantitated. (omitted)
1. 5% 밀기울 기본배지에다 inducer로서 CMC 혹은 Avicel을 첨가하여 Myriococcum albomyces를 접종하여 진탕배양할 때의 cellulase 유도 생성을 검토하였다. 2. DEAE-Sephadex A-25 column chromatography 법으로 배양액에서 cellulase 활성이 다른 3개의 부분, fraction I, fraction II 와 fraction III를 분리하였다. 3. Inducer로서 CMC첨가의 경우는 CMCase가 강해지고 반대로 Avicel을 가한 경우는 Avicelase가 강하였다.
(1) 고온성사상균인 Myriococcum 속의 알칼리성 protense의 생성과 조효소의 성질을 검토하였다. (2) 조호소의 최적 pH는 9.0이고, 최적 온도는 $55^{\circ}C$였다. 그리고 안정 pH 범위는 6.0에서 11.0이었다. (3) 조효소용액을 DEAE-Cellulose column Chromatography로 2개의 다른 활성부분으로 나누어졌다.
In order to obtain monoclonal antibody from ascites fluid at sufficiently high purity using a single hydroxylapatite chromatography (HA) a further optimization on its operating variables was carried out. By adjusting the pH of the eluent, the sodium phosphate buffer, to 6.0 from 6.8 and adding CaCl$_2$to 1 mM at the column inlet, the elution molarities (M$_{elu}$) for the desired monoclonal antibody and contaminating proteins can be distinguished from each other with enough resolution. Previously these two groups of proteins co-eluted at the same time at pH 6.8 and without CaCl$_2$. This sin81e step hydroxylapatite chromatography yields the desired antibody pure enough for diagnostic use.
A new method for quantitative determination of icariin in Epimedii Herba by high performance liquid chromatography was established. A reversed-phase system with $a\;{\mu}Bondapak\;C_{18}$ column using methanol in water(15% to 70%, gradient elution) as a mobile phase was developed. Icariin and spinosin as an internal reference were detected at 350 nm and the analysis was successfully carried out within 30 min.
The simultaneous determination of As(III), As(V), and DMA has been performed by ion chromatography (IC) coupled with inductively coupled plasma-mass spectrometry (ICP-MS). The separation of the three arsenic species was achieved by an anionic separator column (AS 7) with an isocratic elution system. The separated species were directly detected by ICP-MS as an element-selective detection method. The IC-ICP-MS technique was applied for the determination of arsenic species in a NIST SRM 1643d water sample. An As(III) only was detected in the sample. The detection limits of As(III), As(V) and DMA were 0.31, 0.45, and 2.09 ng/mL, respectively. It was also applied for the determination of arsenic species in a human urine obtained by a volunteer, and three arsenic species were identified. The determination of total As in human urines that were obtained from 25 volunteers at the different age was also carried out by ICP-MS.
참죽나무(Cedrela sinensis A. Juss.) 잎의 ethyl acetate분획으로부터 분리한 5종의 flavonoid성분들은 HPLC에 의한 용매계 THF-dioxane-MeOH-HOAc-5% $H_3PO_4-H_2O$(145 : 125 : 50 : 20 : 2 : 658)에서 양호한 분리능을 나타내었다. 또한 주성분인 quercitrin의 함량은 MeOH엑스 및 EtOAc 분획에서 각각 9.48%(w/w) 및 37.06%(w/w) 함유되어 있음을 알 수 있었다.
Most organophosphorus pesticides may be metabolized to yield some common phosphates in human or in animals, and these metabolites may be used as the exposure biomarkers to pesticides. In this study, we developed the extraction method of four phosphate metabolites from the spiked human urine in high recovery by the solid phase extraction with a reverse-phase cartridge (cyclohexyl silica) followed by the elution with methanol. The extracted urinary metabolites were derivatized with hexamethyldisilazane/trimethyl-chlorosilane/pyridine (2 : 1 : 10, v/v/v) and identified by gas chromatography/mass spectrometry. Calibration curve obtained from each metabolite standard using by GC/MS/SIM has shown good linearity and detection limits of metabolites were the range of 0.05-0.1 ㎍/㎖ in urine. Phenthoate, one of the organophosphorus pesticides, was orally administrated to rats. Four metabolites were detected in the rat urine. The results of this study may be applied to development of exposure biomarkers for monitoring of environmental pollutants.
Resolution of enantiomers of DNS-amino acids has been achieved by a reversed phase liquid chromatography with an addition of a copper(Ⅱ) complex of N-benzyl-L-hydroxyproline to the mobile phase. N-Benzyl-L-hydroxyproline was prepared and used as a chiral ligand of copper(Ⅱ) chelate for the optical resolution. The pH and the concentration of copper(Ⅱ) chelate, organic solvent, and buffer agent in the mobile phase all affect the optical resolutions of dansyl amino acids. The elution orders between D and L-DNS-amino acids were different depending on the structure of the side chain of the amino acids. The retention mechanism for the chiral separation of the dansyl amino acids can be illustrated by the equilibrium of ligand exchange and by hydrophobic interaction with $C_{18}$ stationary phase. The chiral separation can be illustrated with cis and trans effect of the ligand exchange reaction.
Aiming at selective adsorption and separation of Y(III) from the Y(III)-Sr(II) group in acid solution, a silica-based TODGA impregnated adsorbent [(TODGA+1-dodecanol)/SiO2-P-F600] has been prepared. Batch adsorption experiments were conducted under the effect of contact time, acid concentration, solution temperature, and adsorption capacity etc. Chromatography recovery of more than 90% Y(III) was successfully achieved under elution with 0.01 M DTPA solution in nitric acid adsorption system, and 0.1 M HCl solution in hydrochloride adsorption system, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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