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세포 크기 차이를 이용한 유세포 분석을 통한 인간배아줄기세포 유래 기능성 혈관세포의 확립 (Establishment of Functional Cells for Vascular Defect Disease from Human Embryonic Stem Cell via Region Sorting Depending on Cell Volume)

  • 이지혜;김주미;정형민;채정일
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제39권4호
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    • pp.364-373
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    • 2011
  • 인간배아줄기세포는 인간배아줄기세포가 가지는 전 분화능 등의 특이적 특성으로 인해 재생의학 분야에서 세포 치료제의 근원으로 널리 각광받고 있다. 그러나, 미분화 상태의 인간배아줄기세포를 세포치료제로 이용하기 위해서는 인간배아줄기세포 주 유래 기능성 세포를 확립이 반드시 요구된다. 본 연구에서는, 미분화 상태의 인간배아줄기세포주로부터 기능성 세포의 확립을 위해, 혈관계통의 세포로 분화를 유도하였으며, 분화 유도 후 세포의 크기 차이를 이용하여 특정 세포군 만을 분리하여 그 기능성을 비교 분석하였다. 그 결과, VEGF를 이용하여 분화 시킨 세포군에서 약 10%의 PECAM 양성 세포군을 확인할 수 있었으며, 분리 및 세포 이식을 위해 세포를 단일 세포군으로 만들었다. 단일 세포군의 형성 후, 유세포 분석기를 이용한 세포 분리 기법을 이용하여 FCS를 기준으로 한 세포 크기의 차이를 이용하여 특정 세포군 만을 분리하여, 하지 허혈 동물 모델로의 이식을 통해, 비 분리 세포군과 치료 효능을 비교 분석을 실시하였다. 세포 이식 4주 후, 혈류량 복구율이 FSC 기준 분리 군의 경우 54%, 비 분리군의 경우 17%를 보이는 것을 확인하였다. 이 결과는, 초기 분화 유도 후 세포 크기차이를 이용한 세포 분리법이 기능성 세포 획득에 이용될 수 있음을 시사한다. 이와 같은 방법을 통해 다양한 종류의 기능성 세포 분리에 이용될 수 있을 것이라 생각된다.

유사학생발화의 유형과 분류 (Patterns and Usage of Pseudo Student Talk (PST))

  • 신윤주;최승언
    • 한국지구과학회지
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    • 제29권1호
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    • pp.78-90
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    • 2008
  • 수업 중 발화의 대부분을 차지하는 것은 교사의 발화이다. 그러나 교사는 항상 교사의 입장에서만 말하는 것이 아니라 학생 발화와 유사한 발화를 통해 학생들의 수업에 도움을 줄 수 있을 것으로 생각되나 이에 대한 연구는 아직 부족한 것이 현실이다. 따라서 본 논문에서는 이러한 발화 형태를 유사학생발화라 명명하고, 유사학생발화가 다수 관찰될 것으로 예상되는 방송 수업(EBS의 2005학년도 중 1 과학 수업 중 지구과학 부분)을 연구하여 유사학생발화를 '수업 중, 학생 발화와 같은 역할을 하나, 교사를 통해 이루어지는 모든 발화의 통칭'이라 정의하였으며, Lemke(1990)의 학생발화분류를 토대로 연구 대상인 수업 중 나타난 유사학생발화를 교사가 개입하는 형태의 유사학생발화와 교사가 개입하지 않는 유사학생발화로 크게 유사학생발화를 나누고 교사 개입 유사학생발화로 유사 교사-학생 간 협의(Pseudo Teacher-Student Conferences), 유사 삼단계 담화(Pseudo Triadic Dialogue), 유사 교재 활용 담화(Pseudo External Text Dialogue), 유사 학생 질문 담화(Pseudo Student-Questioning Dialogue), 유사 교사-학생 간 담화(Pseudo Teacher-Student Dialogue), 유사 교사-학생 간 토론(Pseudo Teacher-Student Debate), 유사 실 담화(Pseudo True Dialogue), 유사 학생 상호 담화(Pseudo Cross Dialogue), 유사 동료 학생 발화 (Pseudo classmate talk)를, 그리고 교사 미개입 유사학생발화로 유사 학생 독백/유사 수업 중 잡담(Pseudo student monologue/Pseudo side talk)을 분류하였다. 또한 이러한 분류와 함께 각 유사학생발화의 실례를 소개하고 그 특징을 기술하였다.

지능형 U-Car에서 IEEE 802.11b을 이용한 차량 내 데이터 무선 랜 전송 성능 분석 (Performance of IEEE 802.11b WLAN Standard at In-Vehicle Environment for Intelligent U-Car System)

  • 이승환;허수정;박용완;이상신;이동학;유재황
    • 대한전자공학회논문지TC
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    • 제43권9호
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    • pp.80-87
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    • 2006
  • 본 논문에서는 지능형 차량을 위한 차량네트워크를 IEEE 802.11b 무선 랜을 사용하여 구현하였을 때 간섭신호와 차량에서 발생하는 노이즈에 의한 영향을 확인하고 시스템의 안정성 여부를 판단한다. 무선 랜의 AP와 ME간의 통신을 지능형 차량의 차량 네트워크의 중앙 제어기와 센서, ECU, 구동계 장치 간의 통신이라고 가정하였을 때 다른 차량에서 사용하는 무선 차량 네트워크의 신호가 간섭으로 작용할 수 있다. 또한 차량 내부에서 발생하는 자동차 노이즈 또한 무선 차량 네트워크 시스템에 영향을 줄 수 있다. 본 연구에서는 외부 차량에서 송신된 신호가 다른 차량에게 간섭으로 작용하였을 패 간섭 수신신호의 세기에 따른 BER(Bit Error Rate)를 확인하였고 차량 내부에서 발생하는 차량 노이즈의 종류를 항상 영향을 주는 White type과 특정 시간에만 영향을 미치는 Spark type 노이즈로 구분하여 시스템에 주는 BER 영향을 확인하였다. 이를 통해 지능형 차량을 구성하기 위한 무선 차량 네트워크를 IEEE 802.11b 무선 랜으로 구현하였을 때 시스템의 안정성을 시뮬레이션을 통하여 확인하였다.

Peroxiredoxin 유전자 발현 산화스트레스 내성 형질전환 고구마의 선발 (Selection of transgenic sweetpotato plants expressing 2-Cys peroxiredoxin with enhanced tolerance to oxidative stress)

  • 김명덕;양경실;권석윤;이상열;곽상수;이행순
    • Journal of Plant Biotechnology
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    • 제36권1호
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    • pp.75-80
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    • 2009
  • 산화스트레스에 내성을 지닌 형질전철 고구마 식물체를 개발하기 위해서 산화스트레스에 의해 발현이 강하게 유도되는 SWPA2 프로모터 또는 CaMV 35S 프로모터에 2-Cys peroxiredoxin (Prx) 유전자가 발현되도록 연결한 형질전철 벡터 (pSP-K, pEP-K)를 제작한 후, 각각 Agrobacterium 매개로 형질전환 하였다. 카나마이신 저항성 배발생 캘러스로부터 체세포배발생 과정을 거쳐 100mg/L kanainycin이 포함된 MS 배지에서 소식물체로 발달하였다. Southern 분석으로 외래 유전자가 안정적으로 고구마 게놈 내로 삽입되었음을 확인하였다. 형질전환 고구마 잎 조직을 대상으로 $20{\mu}M$ methyl viologen에 대한 내성 검정을 조사하여 형질전환 고구마 식물체가 비형질전환 식물체 또는 벡터 대조구 식물체 보다 40% 정도 높은 신화스트레스에 대한 내성을 보여주었다. 선발된 형질전환 식물계는 저온, 건조 등의 여러 기지 환경스트레스 내성검정에 이용될 것이며 향후 복합재해 내성 고구마 계통육성에 이용될 수 있을 것으로 기대된다.

행동관찰 기반 치매 식이 평가 도구의 한국판 개발 (Development of Korean Version of the Dementia Eating Evaluation Tool based on Behavioral Observation)

  • 서상민;우희순
    • 재활치료과학
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    • 제9권1호
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    • pp.56-68
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    • 2020
  • 목적 : 본 연구는 치매로 인한 이상행동으로 인하여 음식물의 섭취에 영향을 보이는 환자들을 대상으로 행동관찰에 기반하여 식이 문제를 파악할 수 있는 국외의 체계화된 평가 도구들을 소개하고, 전문가 집단에 의한 내용타당도 검증을 통하여 한국화 하는 데 있다. 연구 방법 : 폭넓은 관련 문헌 검색에 기초한 수차례의 회의를 통하여 최종으로 한국판으로 개발할 평가도구 3종(Eating Behavior Scale; EBS, Edinburgh Feeding Evaluation in Dementia Scale; EdFED, Feeding Difficulty Index; FDI)을 선택하였다. 수정된 평가 도구 3종은 연구진들에 의하여 1차 번역되었으며, 9인으로 구성된 전문가팀을 대상으로 내용타당도지수(Content Validity Index; CVI)를 검증 하였다. 결과 : EBS 내용타당도 산출 결과 6개의 질문 항목 및 1개의 응답 항목 모두에서 CVI가 0.9 이상인 것으로 나타나 항목의 수정 없이 모든 항목을 한국판 EBS에 수록하였다. EdFED 내용타당도 산출 결과 11개의 질문 항목 모두에서 CVI값 0.9 이상인 것으로 나타나 항목의 수정 없이 모든 항목을 한국판 EdFED에 수록하였다. FDI의 내용타당도 산출 결과 19개의 질문 항목 모두에서 CVI값 0.8 이상인 것으로 나타나 항목의 수정 없이 모든 항목을 한국판 FDI에 수록하였다. 결론 : 국외에서 많이 활용되고 있는 치매 환자 대상의 행동 관찰기반 식이 평가도구 인 EBS, EdFED, FDI의 한국판을 개발하였다. 관찰기반의 한국판 평가 도구를 통하여 치매 환자들의 식이 관련 문제점들을 조기에 판단하고, 적절한 중재를 제공하는 것은 환자의 영양섭취 강화와 보호자의 부담 저하 측면에서 매우 중요하게 활용될 수 있을 것이다.

단위발생 유래 생쥐 배아줄기세포의 기능성 심근세포 형성 (Functional Cardiomyocytes Formation Derived from Parthenogenetic Mouse Embryonic Stem Cells)

  • 신현아;김은영;이영재;이금실;박은미;이훈택;정길생;박세필;임진호
    • Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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    • 제29권2호
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    • pp.139-147
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    • 2002
  • Objective : This study was to establish a reproducible differentiation system from the parthenogenetic mouse embryonic stem (P-mES02) cells into functional cardiomyocytes like as in vitro fertilization mouse embryonic stem (mES01) cells. Materials and Methods: To induce differentiation, P-mES02 cells were dissociated and aggregated in suspension culture environment for embryoid body (EB) formation. For differentiation into cardiomyocytes, day 4 EBs were treated with 0.75% dimethyl sulfoxide (DMSO) for another 4 days (4-/4+) and then were plated onto gelatin-coated dish. Cultured cells were observed daily using an inverted light microscope to determine the day of contraction onset and total duration of continuous contractile activity for each contracting focus. This frequency was compared with the results of DMSO not treated P-mES02 group (4-/4-) and mES01 groups (4-/4+ or 4-/4-). For confirm the generation of cardiomyocytes, beating cell masses were treated with trypsin-EDTA, dispersed cells were plated onto glass coverslips and incubated for 48 h. Attached cells were fixed using 4% paraformaldehyde and incubated with specific antibodies (Abs) to detect cardiomyocytes (anti-sarcomeric ? -actinin Ab, 1 : 100; anti-cardiac troponin I Ab, 1 : 2000) for 1 h. And the cells were finally treated with FITC or TRITC labelled 2nd Abs, respectively, then they were examined under fluorescence microscopy. Results: Rhythmically contracting areas in mES01 or P-mES02 cells were firstly appeared at 9 or 10 days after EBs plating, respectively. The highest cumulative frequency of beating EBs was not different in both treatment groups (mES01 and P-mES02, 4-/4+) with the results of 61.3 % at 13 days and 69.8% at 15 days, respectively. Also, the contracting duration of individual beating EBs was different from minimal 7 days to maximal 53 days. However, DMSO not treated groups (mES01 and P-mES02, 4-/4-) also had contracting characteristics although their frequency was a few compared to those of DMSO treated groups (6.0% and 4.0%). Cells recovered from the spontaneously contracting areas within EBs in both treated groups were stained positively with muscle specific anti-sarcomeric ? -actinin Ab and cardiac specific anti-cardiac troponin I Ab. Conclusion: This study demonstrated that the P-mES02 cell-derived cardiomyocytes displayed similarly structural properties to mES01 cell-derived cardiomyocytes and that the DMSO treatment enhanced the cardiomyocytes differentiation in vitro.

전자빔 조사에 따른 잿빛곰팡이병원균 방제효과와 절화 장미의 수확 후 품질 (Control of Botrytis cinerea and Postharvest Quality of Cut Roses by Electron Beam Irradiation)

  • 권송;최경자;김기선;권혜진
    • 원예과학기술지
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    • 제32권4호
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    • pp.507-516
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    • 2014
  • 본 연구는 전자빔 조사에 따른 잿빛곰팡이병 방제효과와 절화 장미의 수확 후 품질을 알아보고자 수행하였다. 10MeV 전자가속기를 이용하여 0.1, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1, 2, 10, 20kGy로 조사했을 때 전자빔 선량이 높아짐에 따라 Botrytis cinerea 포자 발아와 균사 생장은 억제되었다. 전자빔 조사가 B. cinerea 포자 발아와 균사 생장에 미치는 영향을 비교했을 때, 포자 발아를 50% 억제하는 선량은 2.02kGy, 균사 생장을 50% 억제하는 선량은 0.89kGy였으므로 포자가 균사에 비해 전자빔에 대한 저항성이 더 높았다. 전자빔 조사후 배양온도에 따른 B. cinerea 균사 생장을 비교한 결과 잿빛곰팡이병균에 대한 전자빔 효과는 배양온도가 낮아질수록 증가하였으며, 특히 $10^{\circ}C$에서 가장 높은 균사 생장 억제효과를 보였다. 토마토 유묘를 이용하여 전자빔의 in vivo 살균활성을 검정한 결과 전자빔 선량이 높아짐에 따라 방제효과도 증가하였다. 절화 장미는 전자빔 선량이 높아짐에 따라 절화수명 및 생체중의 감소, 개화 지연 등을 보였으며, 'Decoration', 'Il se Bronze', 'Queen Bee', 'Revue'는 0.4kGy이하에서 전반적인 절화품질이 유지되었지만 'Vivian'은 0.2kGy 이하에서만 절화품질이 유지되어 장미 품종에 따라 전자빔에 대한 감수성이 다르게 나타났다.

Clinico-Pathologic Subtypes of Breast Cancer Primary Tumors Are Related to Prognosis after Recurrence

  • Sanchez, Cesar;Camus, Mauricio;Medina, Lidia;Oddo, David;Artigas, Rocio;Sepulveda, Alejandra Perez;Domainguez, Francisco;Razmilic, Dravna;Navarro, Maria Elena;Galindo, Hector;Acevedo, Francisco
    • Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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    • 제17권12호
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    • pp.5081-5086
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    • 2016
  • Background: Pathological factors, based mainly on immunohistochemistry (IHC) and histological differentiation, are mostly used to differentiate breast cancer (BC) subtypes. Our present aim was to describe the characteristics and survival of a relapsing BC patient cohort based on clinico-pathologic subtypes determined for the primary tumors. Methods: We used a clinico- pathological definition of BC subtypes based on histological grade (HG), estrogen receptor (ER), progesterone receptor (PgR),and epidermal growth factor receptor type 2 (HER2) expression assessed by IHC. We determined variables associated with loco-regional recurrence (LRR), second primaries (SP), systemic recurrence (SR) and post-recurrence survival (PRS). Results: Out of 1,702 patients, 240 (14%) had an event defined as recurrence. Those with recurrent disease were significantly younger than those without,and were initially diagnosed at more advanced stages, with larger tumors, greater lymph nodal involvement and higher HG. With a median follow up of 61 months (1-250), 4.6% of patients without recurrence and 56.6% of patients with an event defined as recurrence had died. The median PRS for the LRR group was 77 months; 75 months for those who developed a SP and 22 months for patients with an SR (p <0.0001). In SR cases, the median PRS was shorter for ER- tumors than for ER+ tumors (15 vs. 26 months, respectively; p = 0.0019, HR 0.44; CI: 0.25-0.44). Conclusions: Subtype, defined through classic histopathologic parameters determined for primary tumors, was found to eb related to type of recurrence and also to prognosis after relapse.

Comparative analysis on genome-wide DNA methylation in longissimus dorsi muscle between Small Tailed Han and Dorper×Small Tailed Han crossbred sheep

  • Cao, Yang;Jin, Hai-Guo;Ma, Hui-Hai;Zhao, Zhi-Hui
    • Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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    • 제30권11호
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    • pp.1529-1539
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    • 2017
  • Objective: The objective of this study was to compare the DNA methylation profile in the longissimus dorsi muscle between Small Tailed Han and Dorper${\times}$Small Tailed Han crossbred sheep which were known to exhibit significant difference in meat-production. Methods: Six samples (three in each group) were subjected to the methylated DNA immunoprecipitation sequencing (MeDIP-seq) and subsequent bioinformatics analyses to detect differentially methylated regions (DMRs) between the two groups. Results: 23.08 Gb clean data from six samples were generated and 808 DMRs were identified in gene body or their neighboring up/downstream regions. Compared with Small Tailed Han sheep, we observed a tendency toward a global loss of DNA methylation in these DMRs in the crossbred group. Gene ontology enrichment analysis found several gene sets which were hypomethylated in gene-body region, including nucleoside binding, motor activity, phospholipid binding and cell junction. Numerous genes were found to be differentially methylated between the two groups with several genes significantly differentially methylated, including transforming growth factor beta 3 (TGFB3), acyl-CoA synthetase long chain family member 1 (ACSL1), ryanodine receptor 1 (RYR1), acyl-CoA oxidase 2 (ACOX2), peroxisome proliferator activated receptor-gamma2 (PPARG2), netrin 1 (NTN1), ras and rab interactor 2 (RIN2), microtubule associated protein RP/EB family member 1 (MAPRE1), ADAM metallopeptidase with thrombospondin type 1 motif 2 (ADAMTS2), myomesin 1 (MYOM1), zinc finger, DHHC type containing 13 (ZDHHC13), and SH3 and PX domains 2B (SH3PXD2B). The real-time quantitative polymerase chain reaction validation showed that the 12 genes are differentially expressed between the two groups. Conclusion: In the current study, a tendency to a global loss of DNA methylation in these DMRs in the crossbred group was found. Twelve genes, TGFB3, ACSL1, RYR1, ACOX2, PPARG2, NTN1, RIN2, MAPRE1, ADAMTS2, MYOM1, ZDHHC13, and SH3PXD2B, were found to be differentially methylated between the two groups by gene ontology enrichment analysis. There are differences in the expression of 12 genes, of which ACSL1, RIN2, and ADAMTS2 have a negative correlation with methylation levels and the data suggest that DNA methylation levels in DMRs of the 3 genes may have an influence on the expression. These results will serve as a valuable resource for DNA methylation investigations on screening candidate genes which might be related to meat production in sheep.

불화나트륨 이온도포와 Nd:YAG laser 조사가 치근면 내마모성에 미치는 영향 (Effect of NaF iontophoresis and Nd:YAG laser irradiation on the abrasion-resistance of root surface)

  • 김진덕;염창엽;김송욱;김병옥;한경윤
    • Journal of Periodontal and Implant Science
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    • 제27권4호
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    • pp.819-828
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    • 1997
  • The purpose of this study was to evaluate the abrasion-resistance of root surface after NaF iontophoresis, Nd:YAG laser irradiation and combined treatment 50 anterior teeth with flat interproximal root surface that had been extracted due to periodontal destruction were selected. All teeth were treated by the same procedure as conventional periodontal root treatment, such as scaling and root planing, root conditioning with tetracycline HCI(lOOmg/ml, 5min). The pre-treatment weight of each tooth was measured by a dial scale(SHIMADEU Co, LIBROR EB-220HU, capacity 220.000 g, Japan). All teeth were divided into 5 groups as follows: Nd:YAG laser irradiation(group 1, 1 W, 100 mJ, 10Hz, fiberoptic-root surface distance=5mm, $10\;sec.{\times}6times$, EL.EN.EN060, Italy): NaF iontophoresis(group 2, $150{\mu}A$, 4 min}: Nd:YAG laser irradiation following NaF iontophoresis(group 3): NaF iontophoresis following Nd:YAG laser irradiation(group 4): No treatment(control group). Electric toothbrushing (Oral-B, Brown Co, Germany) was conducted during 1 hour($lO\;min.{\times}6\;times$). Subsequently post-treatment weight was remeasured by the same method as pre-treatment weight measurement. The difference of abrasion rate among all groups was statistically analyzed by ANOVA(SAS program). Following results were obtained: 1. The abrasion rate was significantly lower in Nd:YAG laser irradiation group than NaF iontophoresis group(p < 0.001). 2. The abrasion rate was significantly lower in combined groups of Nd:YAG laser irradiation and NaF iontophoresis than either Nd:YAG laser irradiation group or NaF iontophoresis group(p < 0.001). 3. There was no significant difference in abrasion rate according to application order in the combined groups(p > 0.05). 4. The abrasion rate was significantly lower in all experimental groups than control group(p < 0.001). The results suggest that combined treatment of Nd:YAG laser irradiation and NaF iontophoresis on exposed root surface after periodontal therapy can enhance the abrasion-resistance of root surface and may inhibit the root caries development.

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