• 한국동물위생학회지
• /
• 제20권1호
• /
• pp.11-18
• /
• 1997

Characteristics, pathogenicity and control of the causative organisms isolated front diseased cultured flounder, Paralichthys olivaceus were studied. The causative organisms were identified as E tarda by biochemical and biophysical characteristics. Also, it strains were named as E tarda KBF-1 and E tarda KMF-1, and optimal pH of E tarda KBF-1 and E tarda KMF-1 were 8.0, and optimal concentration of NaCl. E tarda KBF-1 was 0% and E tarda KMF-1 was 1%. In the pathogenicity test, 0~10 of the flounders of artificially infected group(E tarda KBF-1) with $1.0{\times}10^7$ cfu/fish were died within 60 hrs, but 0~9 flounders infected group with 41.0{\times}10^6$ cfu/fish were died within 60 hrs. Also, 0~10 flounders infected group(E tarda KMF-1) with $1.0{\times}10^7$ cfu/fish were died within 36 hrs, while 0~7 flounders infected with $1.0{\times}10^6$ cfu/fish were died within 60 hrs. Drug sensitivity of E tarda KBF-1 strain was resistant to AM, CF and N, and intermediate to E, K and S, and sensitivity to C, G, SxT and FF. But E tarda KMF-1 strain was resistant to CF, E and V, and intermediate to AM, C, N and SxT, and sensitivity to GM and FF.

• 한국양식학회지
• /
• 제21권4호
• /
• pp.325-330
• /
• 2008

본 연구에서는 우리나라에서 분리된 E. tarda KFE와 일본에서 분리된 E. tarda Edk-2 두 균주의 항혈청을 만들어 생산된 항체의 특성과 방어효과를 분석하고자 하였다. 우리나라에서 많이 양식되어지고 있는 담수어인 미꾸라지를 사용하여 위의 두 가지 분리균주의 항원성에 있어서의 차이점을 조사하고자 하였다. 미꾸라지를 E. tarda 두 균주의 FKC로 각각 면역시킨 후의 혈청내 특이 항체량은 E. tarda KFE 균주로 면역시켰을 때에 비해 E. tarda Edk-2 균주로 면역시켰을 때 훨씬 높은 수치를 나타내었다. 그리고 교차반응 분석에서는 두 균주 간에 공통 항원이 미약하게 존재하는 것을 확인하였으며 미꾸라지 항혈청의 살균효과를 보았을 때에는 두 종류의 항혈청 모두에서 항체의 살균 능력이 있음을 확인하였다. 감염 예방 효과를 가지고 있는 polysaccharide-bound protein (PS-K)을 미꾸라지에 주사한 후 1주째에 E. tarda KFE 분리균주로 공격 실험을 실시하여 본 결과 누적 폐사율이 감소하였으므로, PS-K의 투여는 E. tarda를 포함한 세균성 감염에 대한 효과적인 감염 대책 방안의 하나가 될 수 있음을 확인하였다.

• 한국어병학회지
• /
• 제34권1호
• /
• pp.31-38
• /
• 2021

본 연구는 1996년부터 2010년 사이에 우리나라 양식넙치와 뱀장어에서 분리하여 Edwardsiella tarda로 동정하였던 18 균주에 대하여 생화학적 특성과 RAPD profile을 비교해봄으로써 이전 양식생물의 질병에 관여되었던 Edwardsiella속 세균의 다양성을 알아보고자 하였다. 생화학적 특성으로 볼 때 이들은 citrate 분해, H₂S 그리고 indole 생산 결과에 차이를 보여 4가지 패턴으로 구분되었으나 모두 E. tarda로 동정되었고 숙주에 따른 분리균의 특성으로 구분되지는 않았다. E. tarda 특이 primer인 EDtT로 PCR을 실시한 결과 18 분리균에서는 모두 약 270 bp의 동일한 band가 검출되었으나 비교 균주로 사용된 E. tarda와 E. ictaluri의 type strain에서는 특이 밴드가 검출되지 않았다. 또한 Ready-To-Go-RAPD kit의 primer 5번과 6번으로 실시한 RAPD PCR 결과, 넙치 분리균, 뱀장어 분리균, 그리고 E. tarda와 E. ictaluri type strain에서 band profile이 뚜렷한 차이를 보여 origin에 따른 특징으로 정리될 수 있었으며 병원체 모니터링을 위한 tool의 하나로 개발될 가능성을 보였다.

• 한국어류학회지
• /
• 제19권2호
• /
• pp.83-87
• /
• 2007

어류 에드워드감염증에 대한 예방 재조합 ghost 백신을 개발하기 위한 연구의 일환으로 어류 병원성 세균인 Edwardsiella trada를 대상으로 플라스미드 형질전환을 실시하고 형질전환 안정성을 평가하였으며, 형질 도입된 재조합 ghost 세균의 E-lysis 유전자 발현을 분석하였다. E. tarda를 대상으로 한 ghost 유도는 대장균에 비해 상대적으로 장시간의 반응 시간이 요구되며 lysis의 개시가 지연된 점을 고려 시 발현된 E protein의 용해 능력 또는 E-gene의 전사발현 양이 E. tarda에서 다소 약화되는 것으로 나타났다. 그러나 대장균에 비해 ghost 유도 속도가 다소 낮음에도 불구하고 반응이 완성되었을 시점에서의 E. tarda의 ghost 효율은 대장균과 전혀 차이가 없이 99.99% 이상의 유도효율을 나타내었다.

• 한국어병학회지
• /
• 제24권2호
• /
• pp.85-93
• /
• 2011

Edwardsiella tarda (E. tarda)는 담수 및 해수어에 광범위하게 감염을 일으키는 그람 음성 박테리아이다. 본 연구에서는 서해안 넙치 양식장에서 분리한 E. tarda에 대해 특이 용균을 보이는 파아지를 분리하여 파아지의 활성에 미치는 환경적 요인인 pH와 배양 온도의 영향 등을 조사하였다. 또한 어류모델로서는 담수어종인 Nile tilapia (Oreochromis niloticus)를 이용하였으며 E. tarda와 파아지와의 상호작용을 알아보았다. pH 안정성 실험에서는 담수보다 해수에서 높은 활성을 보였으며 온도 안정성 실험 결과 $50^{\circ}C$까지 일정한 활성을 보였다. Tilapia 감염 실험에서는 파아지와 E. tarda를 접종하였다. 그 결과 실험군은 대조군에 비해 24시간째까지 E. tarda수가 일정하게 감소하는 것을 확인하였으며 파아지는 처음 접종 양보다 약간 증폭됨을 알 수 있었다. 본 연구의 결과는 E. tarda에 의해 발생되는 질병을 특이 파아지를 이용하여 제어할 수 있음을 암시해준다.

• 미생물학회지
• /
• 제52권3호
• /
• pp.313-318
• /
• 2016

Viable but nonculturable (VBNC) 상태에 들어간 세균은 일반적인 증균 배지에서는 집락을 형성하지 않지만, 죽은 것이 아니라 낮은 대사활성상태로 유지되고 있다. 본 연구에서는 $10^{\circ}C$의 저온 빈영양 해수에서 Edwardsiella tarda를 VBNC 상태로 유도한 후, 해수 온도를 10에서 $25^{\circ}C$로 상승시킬 때 첨가된 유기물의 종류에 따라 VBNC 상태인 균의 소생 가능성을 알아보고자 하였다. E. tarda가 접종된 빈영양 해수 microcosm을 $10^{\circ}C$에 유지하였을 때 VBNC 유도 기간은 42-84일까지 다양하였다. 유도 기간 동안 acridine orange direct counting법으로 계수한 총 균수는 초기 접종 농도인 약 $10^8cells/ml$로 일정하였으며, direct viable counting법으로 계수한 생존 균수는 약 $10^4cells/ml$로 감소되었다. VBNC E. tarda에 효모추출물, 넙치근육추출물 그리고 혈청을 첨가하여 $25^{\circ}C$에서 소생을 유도한 결과 전체 시료 개수의 37%, 23%, 37%에서 각각 소생이 확인되었으며 소생된 E. tarda의 특성은 VBNC 유도 전 원래의 세균과 일치하였다. 소생된 E. tarda를 넙치(Paralichthys olivaceus)에 복강 주사 하였을 때 접종 후 5일 이내에 시험어가 모두 사망함으로써 VBNC 상태의 E. tarda가 독력을 유지하고 있었음을 시사하였다. 그러므로 E. tarda는 우리나라 남해 연안 겨울의 저온 빈영양 해수에서 VBNC 상태로 유도되었다가 여름과 가을 시기에 수온 상승과 더불어 소생되어 양식 넙치에 지속적인 발병 요인이 되고 있는 것으로 생각된다.

• 한국어병학회지
• /
• 제17권1호
• /
• pp.11-20
• /
• 2004

Edwardsiella tarda로 면역한 닭의 난황항체 (IgY) 정제 방법을 비교하였다. Anti-E. tarda IgY의 정제는 PEG법, chloroform-PEG법, ammonium sulfate법과 정제 kit를 사용한 4가지 다른 방법으로 실시하였다. 정제된 IgY는 64 kDa의 heavy chain과 27 kDa의 light chain을 나타내었다. E. tarda로 면역된 IgY는 면역되지 않은 대조 IgY 보다 높은 ELISA가와 응집항체가를 나타내었으며, 정제된 IgY는 western blotting에서 anti-E. tarda 토끼혈청과 유사한 E.tarda 단백질을 인식하였다. PEG법과 ammonium sulfate법에 의해 정제된 IgY는 응집항체가가 1:512, chloroform-PEG법과 정제 kit에 의해 정제된 IgY는 1:128을 나타내었으며, PEG법이 IgY를 정제하기 위한 가장 빠른 방법이었다. 이 연구의 결과로 PEG법이 IgY의 생물학적 활성을 유지함과 더불어 신속하고 효과적인 정제방법임을 알 수 있었다.

• 한국어병학회지
• /
• 제26권3호
• /
• pp.185-191
• /
• 2013

본 연구는 E. tarda에 대한 특이박테리오phage와 생균제의 일종인 B. subtilis KM-1의 혼합제가 E. tarda에 대한 항균활성에 미치는 효과를 알아보고자 수행되었다. 가장 효과적인 혼합제의 항균활성을 보인 phage의 적정 수는 B. subtilis 가 $2{\times}10^5$ CFU/ml의 농도로 존재할 때 배양 36시간째 $2{\times}10^5$ PFU/ml로 나타났다. B. subtilis의 경우 $2{\times}10^5$ PFU/ml의 phage가 존재할 때 첨가량에 비례하는 항균활성을 보여주었다. phage와 B. subtilis의 혼합투여는 phage나 B. subtilis 각각을 투여한 그룹보다 훨씬 높은 항균활성을 나타냈다. 본 연구의 결과는 수산양식에서 대두되고 있는 양식어류의 E. tarda 감염성 질병 치료를 위한 항생제 대체제로서의 사료첨가제 개발 가능성을 제시하고 있다.

• 한국어병학회지
• /
• 제21권3호
• /
• pp.201-208
• /
• 2008

We compared the pathogenicity and antigenicity of two different Edwardsiella tarda (E. tarda) strains KFE and Edk-2 isolated in Korea and Japan respectively. In the pathogenicity analysis with challenge test against loach, E. tarda KFE isolate showed stronger pathogenicity compared to that of E. tarda Edk-2 isolate. The differences were also confirmed by the comparison of OMP (outer membrane protein) in SDSPAGE which showed three major bands, 41kDa, 37kDa and 30kDa, for E. tarda KFE isolates and two major bands, 41kDa and 30kDa, for E. tarda Edk-2 isolates. On the base of these results, we tried to determine the differences of antigenicities of these two isolates in loach which is one of the important species in freshwater aquaculture in Korea. Numbers of specific antibody secreting cells (SASC), appeared to be higher in loach immunized with FKC of E. tarda Edk-2 than loach immunized with FKC of E. tarda KFE. ELISPOT-assay for the comparison of antigenicity showed relatively high percentage of cross-reaction and implied the presence of some common epitopes in the antigens of these two E. tarda isolates.

• 생명과학회지
• /
• 제20권12호
• /
• pp.1743-1749
• /
• 2010

Edwardsiella tarda는 그람 음성의 장내세균과의 주요 어병세균으로 어류에 edwardsiellosis를 유발하는 전신감염성 병원체이다. 최근 병원성 세균의 외막 단백질들은 세균성 감염에 있어서 숙주와 반응하여 면역반응을 유도하는 것으로 여겨져 연구가 되고 있다. 일본의 연구팀은 어류에서 에드워드병의 원인체인 E. tarda의 37 kDa 단백질이 넙치에서 높은 항원성을 제시하는 것을 보고하였다. 또한 그 연구자들은 37 kDa 단백질의 N-말단 아미노산 서열이 GAPDH와 대응하는 것을 밝혔다. 본 연구에서는 다른 세균에서 알려진 N-말단 서열을 기반으로 primer를 제작하여 이에 상응하는 E. tarda DNA를 증폭하고 클로닝하였다. 이 DNA단편의 염기서열은 예상한 바와 같이 세균의 GAPDH유전자인 gapA와 높은 상동성이 있고, E. tarda GAPDH (etGAPDH)의 아미노산 서열은 다른 장내세균의 GAPDH와 70% 이상의 상동성을 보이는 것을 확인하였다. E. tarda의 외막단백질에 특이적으로 반응하는 항체를 이용하여 E. tarda의 GAPDH가 외막에 존재한다는 것을 증명하였고, gapA의 염기서열을 바탕으로하여 재조합 GAPDH를 과발현 시켰다. 과발현된 재조합단백질 GAPDH는 GAPDH 특이적인 항체를 제조하는데 사용되었고, 또한 넙치에 면역시켜 단일 단백질 백신으로서의 활용도를 모색하였다. 비록 재조합 GAPDH가 면역된 넙치에서 GAPDH에 특이적인 항체가 증가하였음에도 불구하고, E. tarda로 공격실험을 하였을 때 면역된 넙치의 생존율이 12.5%로 측정되어 면역된 그룹과 면역되지 않은 그룹간에 큰 차이가 없는 것이 확인되었다.