Lactobacillus sporogenes was treated with N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (NTG) to obtain resistant mutants to rifampicin. Fifty-eight strains of the NTG-induced mutants showed distinct resistance to rifampicin and nine mutants were selected for further studies. They also exhibited identical characteristics with the parent Lactobacillus sporogenes when they were tested for spore formation, acid formation and growth inhibition of E. coli. From in vitro test it was identified that rifampicin is not inactivated by certain factors of the rifampicin resistant mutants. It is suggested that they can be utilized as efficient normalizing agents for human intestinal flora when they are simultaneously taken with rifampicin
In a previous study, the antimicrobial peptides extracted from Lactobacillus plantarum UTNGt2 of wild-type fruits of Theobroma grandiflorum (Amazon) were characterized. This study aimed to investigate the antimicrobial mechanisms of peptides in vitro and its protective effect on fresh tomatoes. The addition of partially purified Gt2 peptides to the E. coli suspension cells at the exponential ($OD_{605}=0.7$) growth phase resulted in a decrease with 1.67 (log10) order of magnitude compared to the control without peptide. A marginal event (< 1 log10 difference) was recorded against Salmonella, while no effect was observed when combined with EDTA, suggesting that the presence of a chelating agent interfered with the antimicrobial activity. The Gt2 peptides disrupted the membrane of E. coli, causing the release of ${\beta}$-galactosidase and leakage of DNA/RNA molecules followed by cell death, revealing a bacteriolytic mode of action. The tomatoes fruits coated with Gt2 peptides showed growth inhibition of the artificially inoculated Salmonella cocktail, demonstrating their preservative potential.
Kasmiati, Kasmiati;Nurunnisa, Andi Tenri;Amran, Amran;Resya, Muhammad Ikhwan;Rahmi, Mufti Hatur
Fisheries and Aquatic Sciences
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v.25
no.8
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pp.417-428
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2022
This study aimed to determine the antibacterial activity and toxicity of methanol and hexane extracts of Halymenia durvillei red seaweed which were found abundantly in Kayangan island, South Sulawesi. The antibacterial activity of the crude extract was tested against five gram-negative bacteria, namely Escherichia coli, Salmonella typhi, Pseudomonas aeruginosa, Aeromonas hydrophila, and Vibrio harveyi at a dose of 200 g/disk. Extract toxicity was tested on Artemia salina larvae at concentrations of 1,000, 500, 250, 125, 62.5, and 31.25 ㎍/mL. The results showed that the methanol and hexane extracts of H. durvillei had the highest activity against S. thypi and A. hydrophila, respectively, with inhibition zones of 26.2 mm and 21.0 mm. On the other hand, the two extracts did not show activity against E. coli and P. aeruginosa, respectively. The toxicity of the methanol extract of H. durvillei was twice as high as that of the hexane extract with half-maximal inhibitory concentration of 98.24 and 184.21 ㎍/mL, respectively. Thus, the methanol and hexane extracts of red seaweed H. durvillei have the potential as new antibacterial agents respectively against the pathogenic bacteria S. typhi and A. hydrophila, but also have the opportunity to be developed into antitumor herbal compounds.
Flavonoids have diverse biological functions in human health. All flavonoids contain a common 2-phenyl chromone structure (C6-C3-C6) as a scaffold. Hence, in using such a scaffold, plenty of high-value-added flavonoids can be synthesized by chemical or biological catalyzation approaches. (2S)-Naringenin is one of the most commonly used flavonoid scaffolds. However, biosynthesizing (2S)-naringenin has been restricted not only by low production but also by the expensive precursors and inducers that are used. Herein, we established an induction-free system to de novo biosynthesize (2S)-naringenin in Escherichia coli. The tyrosine synthesis pathway was enhanced by overexpressing feedback inhibition-resistant genes (aroGfbr and tyrAfbr) and knocking out a repressor gene (tyrR). After optimizing the fermentation medium and conditions, we found that glycerol, glucose, fatty acids, potassium acetate, temperature, and initial pH are important for producing (2S)-naringenin. Using the optimum fermentation medium and conditions, our best strain, Nar-17LM1, could produce 588 mg/l (2S)-naringenin from glucose in a 5-L bioreactor, the highest titer reported to date in E. coli.
Amongst the various antimicrobial peptides, lysozyme plays a central role in initiating and maintaining the antibacterial defense response of insect. Here we propose the biosynthesis and refolding of recombinant lysozyme in Escherichia coli expressed in inclusion body form. The Agrius lysozyme gene was amplified using gene specific primers and then ligated into the pGEX-4T-1 vector, which contained the glutathione S-transferase (GST) gene as a fusion partner. A recombinant lysozyme was expressed in E. coli Rosetta cells using a pGEX-4T-1 expression vector, and the fusion protein was induced by ioporpyl-${\beta}$-D-thiogalactopyranoside (IPTG). The recombinant protein produced as an inclusion body was resolubilized in solubilization buffer, and the resultant solution was dialyzed in refolding buffer. After thrombin cleavage, the recombinant lysozyme was purified by ion exchange chromatography and reverse phase chromatography. The recombinant lysozyme was subjected to sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) analysis and immunoreactivity against the anti-Agrius lysozyme was observed by western blot analysis of this protein. The recombinant lysozyme displayed antibacterial activity against Bacillus megaterium and Micrococcus luteus, which was confirmed by the inhibition zone assay.
The desmutagenic activity of the water extract of Areca catechu L. on the mutagenicity induced by aflatoxin $B_1$ ($AFB_1$), N-methyl-N-nitro-N'-nitrosoguani-dine (MNNG), mitomycin C (MMC) and 4-nitroquinoline 1-oxide (4-NQO) was studied by using the SOS Chromotest with Escherichia coli PQ37. The inhibition rates of water extract of Areca catechu L. at concentration of $100{\mu}g/assay$ were 41.0%, 47%, 46%, and 32% against $AFB_1$, MNNG, MMC and 4-NQO, respectively. The water extract of Areca catechu L. was separated into methanol soluble and methanol insoluble parts. The methanol insoluble part exhibited higher inhibition effect than the methanol soluble part against the mutagenic activities of MNNG. Step-wise fractionation of methanol insoluble part was done to obtain methanol, ethyl acetate and water fractions. Among these fractions, water fraction had the strongest inhibitory effect of 45.0% against mutagenicities of MNNG. The inhibition rates of aqueous fraction of methanol-insoluble from water extracted Areca catechu L. at concentrations of 1.61, 16.13, 161.29 and $322.58{\mu}g/mL$ were 12.0%, 24.0%, 47.5% and 62.0%, respectively. The water fraction showed the inhibitory effects with dose response against the mutagenic activity induced by MNNG.
Kim, Mi-Seon;Kim, Kyoung-Hee;Jo, Ji-Eun;Choi, Jong-Jin;Kim, Young-Jin;Kim, Jong-Hwan;Jang, Soon-Ae;Yook, Hong-Sun
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.40
no.1
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pp.47-55
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2011
The solvent extracts of Aruncus dioicus var. kamtschaticus Hara, which were extracted by using several solvents with different polarities, were performed to investigate the antioxidant activities, whitening effect and antimicrobial activity. The content of total polyphenol of fractions from Aruncus dioicus var. kamtschaticus Hara extract showed the highest value ($335.88{\pm}2.26$ mg/g GAE) on ethyl acetate fraction. The ethyl acetate and n-butanol fractions were 0.06 mg/mL and 0.25 mg/mL as $IC_{50}$ values on DPPH radical scavenging, and $99.16{\pm}0.09%$ and $89.29{\pm}0.64%$ on ABTS radical scavenging activity, respectively. Also, reducing power and FRAP value were significantly higher on ethyl acetate fraction. The SOD like activity showed $80.76{\pm}0.61%$ on ethyl acetate and $72.34{\pm}0.79%$ on n-butanol. Tyrosinase inhibition activities (at 5 mg/mL) were $59.08{\pm}0.98%$ on ethyl acetate fraction. The chloroform fraction showed the strongest antimicrobial activities against B. cereus (14 mm), B. subtilis (12.5 mm), S. aureus (10.8 mm), E. coli (20.7 mm) at 0.1 mg/disc and the inhibition zone diameter of ethyl acetate fraction was 17.2 mm against E. coli at 0.5 mg/disc. The minimum inhibitory concentrations (MIC) of chloroform fraction against B. cereus and E. coli were 50 and $25{\mu}g$/mL, respectively. From these results, it is suggested that ethyl acetate and n-butanol fractions of Aruncus dioicus var. kamtschaticus Hara could be used as functional material for food additive ingredient and chloroform fraction could be suitable for the development of a food preservative.
This study was carried out to investigate the effect of new foot-bath facility and detergent solution (sodium molylbdenate, citrate, potassium nitrate, tataric acid, sodium hypo-cholorite, and zinc sulfate) on claw health in lactating dairy cows. Minimal inhibition concentration (MIC) and minimal bactericidal concentration (MBC) of copper sulphate were 0.31% for E. coli and Bacillus isolated from cows claw. The MIC and MBC of new detergent for E. coli were 1.25% and 5%, respectively, however their respectively values for Bacillus were noticed 0.63% and 2.5%. Both 5E. coli and Bacillus populations in petri-dishes were significantly reduced (more than 95%) with the application of new detergent solution (5% or 16%). Locomotion score (LS 1-5; very good to severely bad) of lactating cows were significantly improved with in 30 days with the use of new detergent solution in foot bath. The LS2 (n=16), LS3 (n=16), and LS4 (n=7) were shown 100%, 43.8%, and 14.3% recovery rate within 30 days with the use of new detergent solution. However, LS5 (n=2) were not recovered to normal claw health and locomotion score within 30 days of new detergent application. Usage of new detergent solution for 60 days in a foot bath have shown 81.3%, 71.4% and 50.0% recovery rate in cows with LS3, LS4 and LS5, respectively. Abnormal claw incidence was reduced from 18.8% to 1.5% in overall herd (n=80) with the use of new detergent solution (16%) in a foot bath for 90 days. In conclusion, usage of 16% of our detergent solution for 60 days in a foot bath can significantly improve the cow claw health and thus mitigate the negative effects of abnormal claw on productivity of cows and dairy farm income.
In this study, antibacterial activity against pathogenic strains and antioxidant activity were measured using the red pine leaf distilled concentrate. The results of the antibacterial activity measured using an emulsion of the red pine leaf distilled concentrate by the paper disc method showed the antibacterial activities against three Gram negative pathogenic strains, E. coli, S. typhi and Vibrio parahaemolyticus and exhibited growth inhibitions of 12 mm, 10 mm and 9 mm at a 5.0% (v/v) concentration, respectively. In addition, all three strains also showed growth inhibitions even at 0.5% (v/v) concentration. However, no antibacterial activity was exhibited against gram positive bacteria. The results of the antibacterial activity using the red pine leaf distilled concentrate measured by the turbidity method, the same antibacterial activities against three gram negative pathogenic strains, E. coli, S. typhi and V. parahaemolyticus as results of the paper disc method. V. parahaemolyticus showed more than 50% growth inhibition compared to the negative control at a concentration of 5% (v/v), E. coli exhibited 33.5% growth inhibition at 4 hr incubation, and S. typhi showed 65.1% and 44.6% growth inhibitions at 4 and 5 hr incubations, respectively. Antioxidant activities of an emulsion of the red pine leaf distilled concentrate were measured by DPPH and ABTS methods. DPPH method showed the highest activity of 55.81% at a 1.0% (v/v) concentration. ABTS method exhibited the highest activity of 18.44% at a 1.0% (v/v) concentration. Through this study, it is expected that the developments of the food and the cosmetics with enhanced functionality by utilizing the antioxidant and antibacterial activities of the red pine leaf distilled concentrate.
This study was carried out to determine the inhibitory effect of methanol extract from kimchi ingredients against Salmonella typhimurium, Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus, and Esherichia coli which are pathogenic microorganisms and Aspergillus sp. Penicillium sp. Antimicrobial activity of methanol extracts was tested against bacteria by paper disc method. Antifungal activity of methanol extracts was shown by hyphal growth inhibition ratio. The methanol extracts from all materials were effective against E. coli among them. And the antimicrobial activity of the methanol extracts from ginger and onion were lower than the others. The antifungal activity of the methanol extracts from radish, ginger, and garlic were effective against Aspergillus sp. and Penicillium sp. In the result of identifying antimicrobial effect rate, the methanol extracts from red pepper and radish had more than $40\%$ against S. typhimurium and more than $30\%$ against E. coli. Also the methanol extracts from onion had an high inhibitory effect rate of more than $50\%$ against S. typhimurium and that from garlic had more than $60\%$ against S. aureus. The minimum inhibitory concentration(MIC) of red pepper was examined 500 $\mu$g/mL against L. monocytogenes. This value was the lowest among the others.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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