A comprehensive study of 132 Escherichia coli isolates from 150 piglets with colibacillosis included detection of heat-labile enterotoxin, heat-stable enterotoxin, and identification of K88 (F4), K99 (F5), 987P (F6), and F41. Four pili were examined by haemagglutination and slide agglutination test. Heat-labile(LT) and heat-stable(ST) enterotoxin was determined by reverse passive latex agglutination and precipitation test, respectively. Among 132 E coli isolates, 26 had K88 (19.7%), 16 had K99 (12.1%), 3 had 987P (2.3%), and 2 had F41 (1.5%). Three had K88 and K99 (2.3%), 3 had K88 and 987P (2.3%), 2 had K99 and 987P (1.5%), 5 had K99 and F41 (3.8%), and 8 E coli strains had K88, K99 and F41 (6.1%) simultaneously. Among 132 E coli isolates, 5 produced LT only (3.8%), 55 produced heat-stable toxin ST only (41.7%), and 4 produced both LT and ST (3.0%). Three major pathotypes accounted for 27.9% of E coli isolates: $K99^+$ (8.3%), $K88^+ST^+$ (9%) and $K88^+$ (10.6%). Results of this study indicated that piliated enterotoxin-producing E coli was prevalent and was associated with diarrhea in preweaning piglets.
The prevalence of E. coli(K99), Clostridium perfringens and Cryptosporidium parvum on acute diarrhea in suckling Korean native calves was evaluated in the field by a veterinary practice. In diagnosis, fecal samples were directly collected from calves that had diarrhea between 2 and 98 days of age. 40 samples were analyzed in October, 2006 and December, 2006. Clostridium perfringens and Cryptosporidium parvum were detected in 15(37.5%) and 4(10.0%) of the samples from diarrhetic calves, respectively. However, E. coli(K99) was not detected in the samples from diarrhetic calves. There was no significant difference(p>0.05) between October(5, 25.0%) and December(10, 50.0%) in incidence of detected Clostridium perfringens from diarrhetic calves. On the other hand, significant differences (p<0.05) in the detection rate of Clostridium perfringens were found between the within 1 month age and all other age groups. In the detection of Cryptosporidium parvum, there was no significant difference(p<0.05) between October (2, 10.0%) and December(2, 10.0%) in the incidence of detected Cryptosporidium parvum from diarrhetic calves. These results suggest that causative agents of calf diarrhea occurred frequently with Clostridium perfringens infection than E. coli(K99) and Cryptosporidium parvum.
This paper deals with the 0 groups of citrate utilizing variants of Escherichia coli ($Cit^+$ E. coli) isolated from cattle, the production of colicin, hemolysin, K99 antigen, heat stable enterotoxin, and the isolation of plasmid DNA. Among 42 $Cit^+$ E. coli, 12 strains were 020, 9 strains 08, 5 strains 045, 3 strains 0115, 1 strain 064, 1 strain 0139 and remaining strains(11) were untypable. Thirty-nine(81.3%) out of 48 $Cit^+$ E. coli were produced colicin and 13(27.0%) were produced hemolysin. Of 12 $Cit^+$ E. coli bearing K99 antigen, 6(50.0%) were produced heat stable enterotoxin. In gel electrophoresis for the isolation of plasmid DNA, the number of plasmids varied from 1 to 7 in 10 $Cit^+$ E. coli. It's molecular weight ranged from 2 to 50 Mdalton, and 50 Mdalton plasmid was commonly existed in all strains.
Aspergillus niger LK의 epoxide hydrolase (EH)를 codon usage를 고려한 Escherichia coli 균주에서 고효율로 발현할 수 있었다. E. coli에서 잘 사용되지 않는 rare codon에 대한 tRNA 유전자 정보가 들어있는 plasmid를 함유한 E. coli 균주인 Rosetta (DE3)PLysS를 숙주세포로 사용하였다. A. niger EH를 발현시킨 재조합 E. coli를 생촉매로 사용하여 라세믹 styrene oxide 혼합물과 반응시켰을 때, (R)-styrene oxide에 대한 입체선택적 가수분해활성이 향상됨을 확인할 수 있었다. 또한 라세믹 기질로부터 입체적으로 고순도인 99% ee 값을 갖는 광학적으로 순수한 (S)-styrene oxide를 얻을 수 있었다.
Water disinfection using UV-LED(Light emitting diode) has many advantages, such as smaller footprint and power consumption as well as relatively longer lifespan than those of conventional mercury-UV lamps. Moreover, UV-LED disinfection is considered an environmentally benign process due to its mercury-free nature. In this study, disinfection using an LED module emitting 275nm UV was carried out. 384 UV-LEDs were put into a cylinder tube with a capacity of 1.7 liters. The UV intensity of the UV-LED module was controlled from 1.7 to 8.4 mW/cm2. The disinfection efficiency for the model microorganism solutions(E. coli ) was monitored. As the UV intensity(I) and contact time(t) varied, inactivation of the microorganisms from 2 to 4-log-removals(i.e., 99 to 99.99% of disinfection efficiency) was achieved. Disinfection using UV-LED was followed to 1st order reaction and the reaction rate constant, k was determined. In addition, the relationship between UV intensity(I) and contact time(t) in order to obtain 99.99% of disinfection efficiency was modeled: I1.2·t= 460, which indicates that the product of UV intensity and contact time requiring 4-log-removals is always constant.
In this study, 185 cefotaxime-resistant Escherichia coli were isolated from different stages of a wastewater treatment plant (WWTP) in Daegu in Korea. Among them, 99.5% (184 isolates) originated from raw sewage and 0.5% (1 isolates) from the final effluent. Cefotaxime-resistant E. coli were high resistant to ampicillin, piperacillin, cefazolin, cephalothin, cefachlor and cefamandole (99.5~100%). About 93% of the cefotaxime-resistant E. coli were extended-spectrum ${\beta}$-lactamases (ESBL)-producing E. coli. The $bla_{TEM+CTX}$ gene was the most predominant of the ESBL genes (72.5%), followed by $bla_{CTX-M}$ (16.2%), $bla_{TEM}$ (8.7%), $bla_{TEM+CTX+SHV}$ (1.1%), $bla_{TEM+SHV}$, $bla_{TEM+OXA}$, and $bla_{TEM+CTX+SHV}$ (respectvely 0.5%). Class 1 and 2 integron were found in 49.7% and class 3 integron was not found. All of integron positive isolates were multiresistant (i.e. resistant to four or more antibiotics). Our findings showed WWTP is contaminated with antibiotic resistant bacteria with resistance genes.
본 연구에서는 상압 저온 코로나 방전 플라즈마를 화산암재(스코리아) 분말의 살균에 적용하였다. 스코리아 분말에 Escherichia coli (E. coli) 배양액을 살포하여 균일하게 혼합한 후, 코로나 방전 플라즈마 특성 인자인 방전전력, 방전시간, 주입기체, 전극간격 등의 조건을 변화시키며 E. coli 살균효율을 조사하였다. 실험 결과 상압 저온 코로나 방전 플라즈마는 분말상의 스코리아 살균에 아주 효과적인 것으로 나타났으며, 방전전력 15 W에서 5 min 동안 살균한 결과 E. coli가 99.9% 이상 사멸하였다. 방전전력, 방전시간, 인가전압이 증가할수록 사멸율이 향상되었다. 반응기에 주입되는 기체의 종류에 따른 살균력 실험 결과, 산소 > 모사공기(산소 20%) > 질소 순으로 나타났다. 코로나 방전 플라즈마에 의한 E. coli 살균은 자외선과 활성산화종(산소라디칼, OH라디칼, 오존 등)에 의한 세포막 침식 및 에칭, 그리고 플라즈마 방전 스트리머에 의한 대장균 세포막 파괴로 설명할 수 있다.
방향족 에폭사이드 기질에 대한 입체선택적 가수분해능이 우수한 Rhodotorula glutinis의 epoxide hydrolase (EH)를 codon usage를 고려한 Escherichia coli 균주에서 고효율로 발현할 수 있었다. 효모인 R. glutinis와 박테리아인 E. coli에서의 codon usage 선호도를 분석하고 그 차이를 고려하여 E. coli 에서 잘 사용되지 않는 rare codon에 대한 tRNA유전자정보가 들어 있는 pRARE plasmid를 함유한 E. coli 균주인 Rosetta(DE3)pLysS를 숙주세포로 사용하였다. R. glutinis EH를 발현시킨 재조합 E. coli를 생촉매로 사용하여 라세믹 styrene oxide 혼합물과 반응시켰을 때, (R)-styrene oxide에 대한 입체선택적 가수분해활성이 wild type R. glutinis 대비 매우 향상됨을 관찰할 수 있었다. 또한 라세믹 기질로부터 입체적으로 고순도인 99% ee 값을 갖는 광학적으로 순수한 (S)-styrene oxide를 얻을 수 있었다.
구름버섯(Coriolus versicolor), 상황버섯(Phellinus linteus) 노루궁뎅이버섯(Hericium erinaceus)의 균사체 배양액의 ethyl acetate 추출물이 돼지와 가금류의 설사 유발 세균류인 E. coli K88, E. coli K99, E. coli 987P와 Salmonella typhimurium 14058 균주에 대하여 항균활성을 보였으며, 특히 구름버섯 추출물은 가장 높은 항균활성을 보였다. 한편, kanamycin과 ampicillin에 대해 내성을 보이는 Staphylococus aureus CARM3230과 E. coli CARM1381 균주에 대해서도 세 가지 버섯 배양 추출물 모두 항균활성을 보였으며, 특히, 구름버섯 추출물은 가장 높은 항균 활성을 보였다. 이는, 이들 버섯 균사체 배양 추출물이 기존 항생제 대체용으로 가축 사료에 첨가제로 사용될 수 있다는 가능성을 보였다. 또한 이들 버섯류로부터 항생제 내성균을 억제할 수 있는 신규 항균성 물질의 탐색을 위한 기초자료로서 활용될 수 있을 것이다.
본 연구는 5-L 발효기를 이용하여 재조합 고스트 박테리아(E.coli $DH5{\alpha}$/ pHCE-InaN-(enolase, GAPDH, sagA or piaA)-ghost 37 SDM) 백신의 산업화를 위해 탄소원 공급조건, 교반속도, 산소공급 조건등의 최적 배양조건과 고스트 박테리아 발현 유도를 위한 온도조절 시점과 그에 따른 발현효율 최적화를 조사하기 위해 수행하였다. 각각 다른 4종의 항원 유전자를 보유한 고스트 박테리아를 LB 배지를 이용하여 배양한 결과 모두 1 g / 1 glucose, 300 rpm, 1vvm에서 최대 균주 성장을 나타내었다. 고스트 박테리아 생성 효율의 경우 초기 대수증식기(OD$_{600}$=1.0)에서 고스트 발현을 유도했을 때 각각 최대효율인 99.99%를 나타내었으나 증기 대수증식기(OD$_{600}$=2.0)와 말기 대수증식기 (OD$_{600}$=3.0)에서는 고스트 박테리아 생성이 낮은 효율을 나타내었다. 또한 SDS-PAGE 와 western blot를 이용하여 각각 다른 4종의 항원 단백질 발현 여주를 확인한 결과 enolase (78kda), GAPDH (67kda),sagA(26kDa), piaA(26kDa)에서 항원 단백질 band를 확인할 수 있었다. 따라서 본 연구결과 확립된 배양 조건과 발현효율 최적화 조건은 연쇄구균증 질병에 대해 E.coli를 이용한 고스트 박테리아 백신이 양식 산업에 있어 상업적으로 유용한 백신의 최적생산을 위해 사용 될 수 있을 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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