이 연구는 비타민 A 강화벼(GM 벼)와 모품종인 낙동 및 일반품종을 대조로 농업적인 생육특성과 잡초를 대상으로 유전자 전이 정도를 조사하였다. GM 벼의 농업적인 특성에서 모품종인 낙동과 차이를 보이지 않았으며, 우점 잡초군과 건물중에서 유의성이 보이지 않았다. GM 벼와 모품종인 낙동 재배구의 우점 잡초는 물달개비, 올방개, 좀개구리밥, 물피 등의 10여 종이었다. 잡초의 유전자 전이 정도를 PCR 분석 결과, GM 벼와 낙동 그리고 우점잡초 8종에서 유전자 전이가 나타나지 않았다. 그러므로 비타민 A 강화벼의 화분이 비래하여 비표적 다른 품종의 벼 또는 주변 잡초에 유전자 이동이 일어나 외래유전자가 함유된 잡초가 출현하는 경우는 거의 없을 것으로 사료된다.
Direct EPR evidence of the photo-generation of superoxide radicals ( $O_2$$^{-.}$) was obtained by using spin trapping techniques in spinach photosystem II (PSII) membranes. $O_2$$^{-.}$ was detected by following the formation of 5-diethoxyphosphoryl-5-methyl-1 -pyrroline-N-oxide (DEPMPO) superoxide adducts, DEPMPO-OOH. The significant increase of the EPR signal amplitude of DEPMPO-OOH in N$H_2O$H-, CaC $l_2$- and NaCl-treated PSII membranes showed that the oxygen-evolving system has a close relation to the $O_2$$^{-.}$ production. PSII membranes with inactivated donor side could not prevent the $O_2$$^{-.}$ production efficiently. Treatments on PSII donor side also influence the maximum level and the kinetics of Chlorophyll (Chi) a fluorescence. Results suggested that manganese cluster and extrinsic proteins might affect Chi a fluorescence in ways different from that happens at the acceptor side of PSII.SII.SII.
In this study effects of isolation distance, transplanting time of maternal plants, and bagging of flower head with the gauze-cloth bag on the outcrossing of burley tobacco (Nicotiana tabacum L.) were investigated. Also the effect of fertilizer level and control of the number of capsules per plant on seed production and quality were examined. A male sterile line. produced 0.3 to 3.8 capsules Per plant when it was Planted with normally flowering tobacco with the average outcrossing of 7.2 plants, ranging from 2 to 18 out of 20 plants. With the farther the isolation distance between maternal plants and pollen donor plant, the lower the outcrossing occurred. Outcrossing occurred even at the isolation distance of 312 m. When the maternal plants were transplanted 35 days after transplanting the pollen donor ones, the outcrossed plants were not decreased significantly. The bagging of the flower head with the gauze-cloth bas (#0.9∼ 1.0 mm) decreased the outcrossed plants significantly, but couldn't prevent the outcrossing completely. The seed amount per plant was higher in the highly fertilized cultivation. The number of seed capsules per plant affected significantly on seed yield and quality. When the seed capsules was controlled by 30 or 50 capsules per plant, the weight of 1,000 seeds and germination rate were higher than those with 70 or 90 capsules per plant. Key words : Nicotiana tabacum, outcrossing, bagging.
The present experiments were conducted to investigate some of the factors affecting the number of haploids derived from anther culture of Nicotiana tabacum. Anther - donor plants grown under controlled environment room at 3$0^{\circ}C$ yielded more haploid than room at 18, 25 and 26-22-18$^{\circ}C$ in anther culture. Donor plants starved of fertilizer yielded more haploids as compared to those of the well fed with fertilizer in anther culture. Pretreatment of exercised flower bud at 5$^{\circ}C$ was shown to be more effective in anther culture than pretreatment at 7 and 1$0^{\circ}C$, and the optimum temperature and period of pretreatment were 4 or 6 days at 5$^{\circ}C$.
환경변화 중요성과 유전적 안전성은 최근에 증가추세의 형질전환 작물에 인식되고 있다. 본 실험은 건조저항성 형질전환체 작물의 유전적인 안전성과 환경변이에 따른 농업적인 특성을 분석하였다. 내건성 형질전환체인 CaMsrB2-8, 23과 모품종인 '일미' 및 일반품종을 대조구로 GM필드에서 작물학적 생육특성을 조사하였다. 농업적인 생육 특성에서 CaMsrB2-8, 23 계통은 모품종인 '일미'와 년차간, 지역별 평균으로 표현형은 유사하였다. 수량에서 년도별, 지역별 차이는 있지만 통계적인 유의성은 없었다. 현미의 미립특성에서 CaMsrB2-8, 23은 모품종인 '일미'와 차이를 보이지 않았다. 현미의 화학적 성분 분석에서 CaMsrB2-2 계통의 전분과 단백질함량은 모품종인 '일미'보다 일반품종인 '일품' 화학적 성분함량이 유사하였다. 본 실험결과에서 내건성 형질전환체인 CaMsrB2-8, 23는 GM 작물의 후대에서도 유전적인 안전성과 함께 수행될 수 있을 것으로 사료된다.
Hang Gyeong;Mi Sook Choe;Sung-Ho Lee;Sung Han Park;Hyuk Kim;Ja Choon Koo;No Youl Kim;Su Hyun Park;Jeung Joo Lee
한국식물학회:학술대회논문집
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한국식물학회 1999년도 제13회 식물생명공학심포지움 New Approaches to Understand Gene Function in Plants and Application to Plant Biotechnology
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pp.17-20
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1999
In rice, limited efforts have been made to identify genes by the use of insertional mutagens, especially heterologous transposons such as the maize Ac/Ds. We constructed Ac and gene trap Ds vectors and introduced them into the rice genome by Agrobacterium-mediated transformation. In this report, rice plants that contained single and simple insertions of T-DNA were analyzed in order to evaluate the gene-tagging efficiency. The 3'end of Ds was examined for putative splicing donor sites. As observed in maize, three splice donor sites were identified at the 3'end of the Ds in rice. Nearly 80% of Ds elements wered excised from the original T-DNA sites, when Ac cDNA was expressed under a CaMV 35S promoter. Repetitive ratoon culturing was performed to induce new transpositions of Ds in new plants derived from cuttings. About 30% of the plants carried at least one Ds that underwent secondary transposition in the later cultures. 8% of transposed Ds elements expressed GUS in various tissues of rice panicles. With cloned DNA adjacent to Ds, the genomic complexities of the insertion sites were examined by Southern hybridization. Half of the Ds insertion sites showed simple hybriodization patterns which could be easily utilized to locate the Ds. Our data demonstrate that the Ac/Ds mediated gene trap system could prove an excellent tool for the analysis of functions of genes in rice. We discuss genetic strategies that could be employed in a largee scale mutagenesis using a heterologous Ac/Ds family in rice.
Nitric oxide (NO) affects the growth and development of plants and also affects plant responses to various stresses. Because NO induces root differentiation, we examined whether or not it is involved in increased ROS generation. Treatments with sodium nitroprusside (SNP), an NO donor, 2-phenyl-4,4,5,5-tetramethylimidazoline-1-oxyl-3-oxide (PTIO), a specific NO scavenger, and $N{\omega}-nitro-{\text\tiny{L}}-arginine$ methyl ester hydrochloride (${\text\tiny{L}}-NAME$), an NO synthase (NOS) inhibitor, revealed that NO is involved in the adventitious root growth of mountain ginseng. Supply of an NO donor, SNP, activates NADPH oxidase activity, resulting in increased generation of $O_2{^{{\cdot}-}}$, which subsequently induces growth of adventitious roots. Moreover, treatment with diphenyliodonium chloride (DPI), an NADPH oxidase inhibitor, individually or with SNP, inhibited root growth, NADPH oxidase activity, and $O_2{^{{\cdot}-}}$ anion generation. Supply of the NO donor, SNP, did not induce any notable isoforms of enzymes; it did, however, increase the activity of pre-existing bands of NADPH oxidase, superoxide dismutase, catalase, peroxidase, ascorbate peroxidase, and glutathione reductase. Enhanced activity of antioxidant enzymes induced by SNP supply seems to be responsible for a low level of $H_2O_2$ in the adventitious roots of mountain ginseng. It was therefore concluded that NO-induced generation of $O_2{^{{\cdot}-}}$ by NADPH oxidase seems to have a role in adventitious root growth of mountain ginseng. The possible mechanism of NO involvement in $O_2{^{{\cdot}-}}$ generation through NADPH oxidase and subsequent root growth is discussed.
The synthesis of chimeras is a breeding approach for horticultural crops. In our breeding program, a new diploid citrus chimera, named 'Hongrou Taoye' (Citrus sinensis [L.] Osbeck + Citrus unshiu Marc.), was found arising at the junction where a 'Taoye' sweet orange (C. sinensis) scion was grafted onto Satsuma mandarin (C. unshiu). As an artificial chimera, its fruit traits derived from the L1 cell layer, with juice color and carotenoid complement, in which ${\beta}$-cryptoxanthin accumulated predominantly, similar to those of Satsuma mandarin. By contrast, traits originating from the L2/L3 cell layer, including pollen, seed, and rind aroma characteristics, were the same as those of 'Taoye' sweet orange (the scion). SSR and cpSSR analyses showed that both nuclear and chloroplast genomes of the chimera were a combination of both donor parents. 'Hongrou Taoye' thus combined the valuable traits of both donor plants, and therefore has good potential in citrus fresh market.
To study the effect of genotype of donor plants on anther culture, anthers of nine hybrid cultivars (Derby, Special, Bossanova, Minipaprika, Fiesta, Boogie, Phenlene, Kufrah, and Clarity) of sweet pepper (Capsicum annuum L.) were cultured in a petridish containing C medium (Sibi, Dumas De Vaulx medium) supplemented with 0.1 mg/L 2,4-D and 0.1 mg/L kinetin, 3% sucrose and 0.32% Phytagel. The cultures were incubated in the dark at $35^{\circ}C$ for seven days, and then cultured at $25^{\circ}C$ with a photoperiod of 16 hr. daylength for 40 days. Frequency of callus formation and plant regeneration was varied among cultivars. Callus formation was ranged from 6% in Phenlene to 69.8% in Kufrah. The highest percentage of regenerated plantlets was obtained in cv. Phenlene (2.67%) followed by Bossanova (2.41%). Result of ploidy analysis; chromosome number observation and flowcytometry analysis, showed that haploid plants could be developed from all of these hybrid cultivars except cv. Fiesta, where highest percentage of haploid plants were obtained in Minipaprika (40%) followed by cv. Bossanova (36.1%). Haploid plants derived from these hybrid cultivars contained single set of chromosome (12 in numbers), higher stomata density (numbers), and smaller sized stomata as compare to diploid plants. The mean length of stomata was 26.9 ${\mu}m$ in haploid plants and 35.7 ${\mu}m$ in diploids.
Arabidopsis thaliana $Ca^{2+}/H^+$ 수송체 유전자인 CAX 1(cation exchanger 1)이 도입된 벼 형질전환체에 대한 연구결과를 요약하면 다음과 같다. Agrobacterium 이용 형질전환 CAX 1 벼 $T_5$ 세대를 대상으로 CAX 1밴드가 도입되었음을 확인하였다. 농업적인 특징인 수장, 수수 및 간장은 모품종(일품)과 유사하였으며, 종자의 칼슘 함량도 높았다. 미립의 크기와 천립중은 모품종보다 약간 크나 거의 일치하고, 저온저항성과 도열병에 대한 내병성이 나타났다. $T_5$ 세대에서 형질이 안정적으로 발현되면서 모품종과 유사하고 농업적 형질이 우수한 3 계통을 선발하였다. 앞으로 $T_6$ 세대에 대한 특성조사를 거쳐 $Ca^{2+}$ 함량이 안정적으로 높게 유지되는 계통을 선발하여 세대육성하면 칼슘과 관련된 유전자의 내재해성 작물의 기초자료 이용되어 질 수 있을 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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