Kim, Tae-Hoon;Lee, Na-Kyoung;Chang, Kyung-Hoon;Park, Eun-Ju;Choi, Shin-Yang;Paik, Hyun-Dong
Food Science and Biotechnology
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v.15
no.3
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pp.482-484
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2006
The antioxidant activity of Bacillus polyfermenticus SCD was studied by partially purified culture extracts using various methods: ammonium sulfate precipitation, adsorption to Diaion HP-20 columns using polar solvents, and extraction using non-polar solvents. The 1,1-diphenyl-2-picyrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity of these partially purified fractions was then investigated. The precipitate isolated using 75%-saturated ammonium sulfate was shown to contain about 77.2% DPPH radical scavenging activity. Using the Diaion HP-20 resin adsorption method, the fraction obtained using 60% ethanol and 60% methanol possessed 76.7 and 89.5% DPPH radical scavenging activity, respectively. Fractions obtained by extracting with the non-polar solvents 80 mg/mL chloroform, 80 mg/mL n-hexane, 80 mg/mL ethyl acetate, and 80 mg/mL butanol contained 68.4, 75.0, 70.7, and 87.5% DPPH radical scavenging activity, respectively. Further study is needed to characterize the antioxidant substance(s) released by B. polyfermenticus SCD cultures.
Isoflavone was extracted with various concentration of aqueous methanol using whole hypocotyls as the starting material. Whole hypocotyls were preferred as the raw material because the residue could be easily removed from the solvent after the extraction process. Extraction yield was almost constant at the methanol concentration of $20-80\%$. Most of the isoflavone was extracted within 1 hr, and the extraction yield remained almost constant thereafter. When the concentration of methanol was $80\%$, the content of total solid was reduced due to the reduced extraction of contaminating protein as the result of protein insolubilization. Among resins tested, Diaion HP-20, Amberlite XAD-16, and Amberlite IRC-50 showed the highest capacity to absorb the compound. Open column chromatography with Diaion HP-20 showed that $80\%$ aqueous ethanol was most efficient as the eluting solvent with final recovery of the phytochemical being more than $95\%$. Maximum adsorption of the phytochemical occurred at the acidic pH 2-4. When the spatial velocity was increased to 15 and more, the degree of adsorption was decreased, whereas below spatial velocity of 15, the adsorption capacity of isoflavone to the resin was almost constant. The purity of the isoflavone purified by column chromatography was $78\%$.
Choi, Moon Sil;Han, Bok Kyung;Choi, Hyuk Joon;Park, Young-Seo
Food Engineering Progress
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v.15
no.3
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pp.276-281
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2011
The optimum condition for the extraction and purification processes of phytic acid from defatted rice bran was examined. The phytic acid was efficiently extracted when the defatted rice bran was treated with 10 volumes of 0.5% HCl for 1 hr. For the neutralization of acid-treated extract, 0.5% NaOH was the most acceptable. To purify phytic acid, Diaion HP20 resin was used to remove impurities from the extract. The flow-through was then loaded onto ion exchange columns packed with various resins and among them, Amberlite IRA-416 resin showed highest recovery yield. When the phytic acid was absorbed onto Amberlite IRA-416 resin and then eluted with 0.5% NaOH, 89% of applied phytic acid was eluted. Most proteins were removed from the purified phytic acid and total protein content of the phytic acid was 0.14%(w/w).
In order to increase ginsenoside content, to reduce chemical change, to shorten extracting procedure, new methods of extraction and fractionation of crude ginseng saponin were established and compared for their chemical composition. Those are hot MeOH extraction/n-BuOH fractionation (BuOH method) and hot MeOH extraction/Diaion HP-20 adsorption/MeOH elution (HP-20 method), which are already known methods, and additional three new methods: hot MeOH extraction/cation AG 50W $adsorption/H_2O$ elution/n-BuOH extraction (AG 50W method), cool MeOH extraction/Diaion HP-20 adsorption/MeOH elution (cool extraction method) and direct extraction with EtOAc/n-BuOH (direct extraction method). AG 50W method provided a crude saponin showing the highest content of ginsenosides of 61.5% and the lowest contents of protein and free amino acids of 0.93% and 0.19%, respectively. The protein content was the highest as 14.18% in the crude saponin by HP-20 method, while free sugar content was the highest as 13.5% by BuOH method, indicating that these are factors that lower the rate of ginsenoside in crude saponins by those methods. On the other hand, it was revealed that AG 50W method produced large amount of prosapogenins during the pass through the cation exchange resin (AG 50W) column being strongly acidic. Crude saponin from direct extraction method showed relatively higher composition of ginsenoside $Rg_1$ and Re. The results suggest that contents and composition of ginsenosides and other chemical components in crude ginseng saponin greatly depend on the condition of the extraction and fractionation.
Pravastatin sodium, competitive inhibitors of HMG-CoA(3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A) reductase, is produced from the culture broth of Streptomyces carbophilus KCCM 10370, The production of Pravastatin sodium was increased about 45 fold compared to wild type by UV mutation. Production of Pravastatin was also improved by continuous feeding of Compactin sodium to 24% and bioconversion ratio was also increased to 4.3% by intermittent addition. In main culture, concentration of Compactin sodium was kept less than 0.1%(w/v) under continuous feeding of Compactin sodium then product was 0.49% and bioconversion was 70%. After finishing the fermentation, Pravastatin was purified by various chromatographies such as Diaion HP20 resin column, Partition, and ODS(Octa-Decylsilyl Silicagel) resin column with a final yield of 70~72% and over 99.7% purity. The IR, UV, and NMR study of the purified Pravastatin sodium showed the same pattern as that of EP(European Pharmacopoeia).
The aim of this study is to evaluate the antioxidant, antimicrobial, and antitumor activities of various concentrations of partially purified substance(s) from green tea seed (Camellia sinensis L.). The total polyphenol contents of each fraction (non-adsorption fraction: F-1, fraction eluted with 40% methanol: F-2, and fraction eluted with 100% methanol: F-3) purified by Diaion HP-20 column chromatography were, in the increasing order: F-1 (3.7 mg tannic acid equivalents, TAB/g) < F-3 (23.2 mg TAB/g) < seed extracts (26.2 mg TAB/g) < F-2 (42.7 mg TAB/g). The scavenging activities toward the 1,1-diphenyl-2-picyrylhydrazyl (DPPH) radical were, in decreasing order: F-2 (93.3%) > butylated hydroxytoluene (BHT; 89.8%) > ascorbic acid (89.3%) > leaf extracts (70.3%) > F-3 (15.9%) > seed extracts (15.8%) > F-1 (14.8%) at a 0.1% concentration. In studies on antimicrobial activities, the results indicate that the growth of yeast (Candida albicans KCCM 11282 and Cryptococcus neoformans KCCM 50544) was inhibited more so than that of other fungi (Alternaria alternate KCTC 6005 and Rhizoctonia solani). In addition, it appears that the antitumor activities of the F-1, F-2, and F-3 fractions at a concentration of $50\;{\mu}g/mL$ showed 6, 7, and 23% growth inhibition of the HEC-1B cell line, 14, 11, 82% inhibition of the HEP-2 cell line, and 8, 16, and 81% inhibition of the SK-OV-3 cell line, respectively. Overall these results indicate that the antioxidant activity is greatest in the F-2 fraction, and the antimicrobial and antitumor activities are greatest in the F-3 fraction.
The culture filtrate of Lentinula edodes shows potent antimicrobial activity against the plant pathogenic bacteria Ralstonia solanacearum. Bioassay-guided fractionation was conducted using Diaion HP-20 column chromatography, and the insoluble active compound was not adsorbed on the resin. Further fractionation by high-performance liquid chromatography (HPLC) suggested that the active compounds were organic acids. Nine organic acids were detected in the culture filtrate of L. edodes; oxalic acid was the major component and exhibited antibacterial activity against nine different phytopathogenic bacteria. Quantitative analysis by HPLC revealed that the content of oxalic acid was higher in the water extract from spent mushroom substrate than in liquid culture. This suggests that the water extract of spent L. edodes substrate is an eco-friendly control agent for plant diseases.
Macrophages are initiators for regulating a host's defenses to eliminate pathogens and trigger tissue repair. Macrophages are classified into two types: classically (M1) activated macrophages and alternatively (M2) activated macrophages. M1-phenotype macrophages directly or indirectly kill infectious organisms and tumor cells via pro-inflammatory responses, whereas M2-phenotype macrophages remodel wounded tissue through anti-inflammatory responses. In this paper, we investigated how Phellinus linteus hot water extract passed from Diaion HP-20 resin (PLEP) regulates polarization of M1-like or M2-like macrophages in human THP-1 cells. PLEP did not have cytotoxicity at a high concentration of 300 ㎍/ml. We observed morphological alteration of the THP-1 cells, which are stimulated by PLEP, LPS/INF-γ (M1 stimulators) or IL-4/IL13 (M2 stimulators). PLEP exposure induced morphology contiguous with LPS/INF-γ. qPCR was also performed to determine whether PLEP influences M1 or M2 polarization-related genes. M1-phenotype macrophage-specific genes, such as TNF-α, IL-1β, IL-6, IL-8, CXCL10 and CCR7, were enhanced by PLEP in a dose-dependent manner similar to LPS/INF-γ. Conversely, M2-phenotype-specific genes, such as MRC-1, DC-SIGN, CCL17 and CCL22, were suppressed by PLEP. PLEP also significantly up-regulated secretory inflammation cytokines related to M1 polarization of macrophages, including TNFα, IL-1β and IL-6, which was similar to the gene expression. Further, MAPK and NF-κB signaling were increased by treatment with PLEP, resulting in enhancement of cytokine secretion. PLEP might therefore be used as a promising booster of pro-inflammatory responses through M1 polarization of human THP-1 cells.
Collagen synthesis is decreased and matrix metalloproteinase-1 (MMP-1) levels are increased in naturally aged human skin, and these alterations cause changes such as skin wrinkling and decreased elasticity. As a part of our ongoing search for bioactive ingredients, MMP-1 inhibitory and type-1 procollagen synthesis inducing activities of aqueous methanolic extract of manufactured gambir product from Uncaria gambir were investigated in in vitro bioassay systems. In addition, total phenolic contents were quantified using a spectrophotometric method. Among tested samples, 40% MeOH eluate from 80% methanolic extract of manufactured U. gambir using open column chromatography packed with Diaion HP-20 resin showed significant MMP-1 inhibitory activities with an $IC_{50}$ value of $15.6{\pm}1.3{\mu}g/mL$. Furthermore, type-1 procollagen synthesis promoting property of 40% MeOH eluate ($IC_{50}$ value; $6.9{\pm}0.7{\mu}g/mL$) from 80% methanolic extract of manufactured gambir was higher than other eluates. Additionally, the present investigation revealed that 40% MeOH eluate of manufactured gambir product contained a high level of total phenolic compounds. The result suggests a distinct relationship between anti-wrinkle activity and total phenolic contents, and manufactured gambir product could be considered a new effective source of natural bioactive ingredients. Systematic investigation of manufactured gambir product will be performed for further development of its biological properties.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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