The objective of this study was to evaluate the effects of alpha-linolenic acid (ALA) during in vitro maturation (IVM) on cumulus expansion, nuclear maturation, fertilization capacity and subsequent development in porcine oocytes. The oocytes were incubated with 0, 25, 50, and $100{\mu}M$ ALA. Cumulus expansion was measured at 22 h, and gene expresison and nuclear maturation were analyzed at 44 h after maturation. Then, mature oocytes with ALA were inseminated, and fertilization parameters and embryo development were evaluated. In results, both of cumulus expansion and nuclear maturation were increased in $50{\mu}M$ ALA groups compared to control groups (p<0.05). However, expression of gap junction protein alpha 1 (GJA1, cumulus expansion-related gene), delta-6 desaturase (FADS1, fatty acid metabolism-related gene), and delta-5 desaturase (FADS2) mRNA in cumulus cells were reduced by $50{\mu}M$ ALA treatment (p<0.05). Cleavage rate was enhanced in 25 and $50{\mu}M$ ALA groups (p<0.05), especially, treatment of $50{\mu}M$ ALA promoted early embryo develop to 4 and 8 cell stages (p<0.05). However, blastocyst formation and number of cells in blastocyst were not differ in 25 and $50{\mu}M$ ALA groups. Our findings show that ALA treatment during maturation could improve nuclear maturation, fertilization, and early embryo development through enhancing of cumulus expansion, however, fatty acid metabolism- and cumulus expansion-related genes were down-regulated. Therefore, addition of ALA during IVM of oocytes could improve fertilization and developmental competence, and further studies regarding with the mechanism of ALA metabolism are needed.
우리 시대에 직면한 다양한 문제를 해결하는 데 온고지신의 정신을 살려 전통을 재해석하고 재구성하되, 학교급별 학생의 발달 수준에 맞게 프로그램을 기획하고 현장에 적용하려는 노력이 요구된다. 본 연구는 회복탄력성 함양 및 유덕한 시민으로서 공동체 역량 제고를 위한 온고지신 프로그램을 개발하고, 현장에 적용함으로써 그 효과성을 검토하는 데 목적이 있다. 논의순서는 다음과 같다. 오늘날 인성교육의 유의미한 주제로 정신건강, 특히 회복탄력성 증진이 중요한 교육목표가 될 수 있다는 점을 먼저 논구하고, 회복탄력성 증진을 위한 온고지신 프로그램 개발방향을 제시하며, 동 프로그램의 구성과 실행계획 및 현장적용(중학교)을 통한 그 효과성을 검토하였다. 그 결과 학생들의 자기조절능력과 대인관계능력 향상에 유의미한 영향을 미쳤다는 것을 알게 되었다. 또한 교육 프로그램개발 과정을 계획(plan)-실행(do)-평가(see)로 볼 때, 본 연구는 온고지신 프로그램의 개발과 실행과 현장적용과 평가 과정의 환류를 통해 개선된 프로그램이 유덕한 시민으로서 공동체 역량을 제고할 뿐만 아니라 회복탄력성 증진에 일정 부분 기여할 수 있다는 점을 확인할 수 있었다. 물론 이 연구가 더 큰 의미를 갖기 위해서는 프로그램 시연 대상과 설문 대상의 폭이 넓어져야 할 것이다. 비록 제한적인 상황 하에서 진행된 프로그램시연이었지만 전통 교육 내용과 방법, 덕목이 현대 교육에도 여전히 의미가 있고 유용하다는 것을 알 수 있었다.
The purposes of this study which was conducted by studying the literature on Emergency Medical Dispatch System are to provide some developmental policies of quality management, pre-arrival instructions, priority dispatch protocols, training program for the dispatchers(Emergency Medical Dispatchers or EMDs) in Korea and to promote understanding emergency medical dispatching. The conclusions from this summarized as follows; (1) It is confirmed that there has been little study on the Emergency Medical Dispatch System in Korea, because for the first time, the real Emergency Medical Services were introduced into Korea in 1994, and the importance of the Emergency Medical Dispatch System has not been realized. (2) Only some squads are using a set of dispatch protocols, others aren't. (3) In spite of trying to introduce a new set of dispatch protocols, it isn't the priority dispatch system using a complete set of dispatch protocols which has key questions, pre-arrival instructions, mode & configuration based on patient assessment. (4) The EMS is unable to promote the service capacity by using quality management, because there is no medical control on the emergency medical dispatching and the EMDs. (5) There are no medical directors in the communications center who are in charge of the medical control to detect problems derived from the EMS and to solve them. (6) There are no systematic training program for the EMDs who are taking charge of dispatching. (7) Having a deep relation to the elements of the EMS, the emergency medical dispatching is subject to restriction of those elements.
Lin, Tao;Lee, Jae Eun;Shin, Hyun Young;Oqani, Reza K.;Jin, Dong Il
Reproductive and Developmental Biology
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제39권2호
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pp.29-36
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2015
Pigs are considered an ideal source of human disease model due to their physiological similarities to humans. However, the low efficiency of in vitro embryo production (IVP) is still a major barrier in the production of pig offspring with gene manipulation. Despite ongoing advances in the associated technologies, the developmental capacity of IVP pig embryos is still lower than that of their in vivo counterparts, as well as IVP embryos of other species (e.g., cattle and mice). The efficiency of IVP can be influenced by many factors that affect various critical steps in the process. The previous relevant reviews have focused on the in vitro maturation system, in vitro culture conditions, in vitro fertilization medium, issues with polyspermy, the utilized technologies, etc. In this review, we concentrate on factors that have not been fully detailed in prior reviews, such as the oocyte morphology, oocyte recovery methods, denuding procedures, first polar body morphology and embryo quality.
The herpes virus entry mediator (HVEM) is a member of the tumor necrosis factor receptor superfamily (TNFRSF), and therefore it is also known as TNFRSF14 or CD270 (1,2). In recent years, we have focused on understanding HVEM function in the mucosa of the intestine, particularly on the role of HVEM in colitis pathogenesis, host defense and regulation of the microbiota (2-4). HVEM is an unusual TNF receptor because of its high expression levels in the gut epithelium, its capacity to bind ligands that are not members of the TNF super family, including immunoglobulin (Ig) superfamily members BTLA and CD160, and its bi-directional functionality, acting as a signaling receptor or as a ligand for the receptor BTLA. Clinically, Hvem recently was reported as an inflammatory bowel disease (IBD) risk gene as a result of genome wide association studies (5,6). This suggests HVEM could have a regulatory role influencing the regulation of epithelial barrier, host defense and the microbiota. Consistent with this, using mouse models, we have revealed how HVEM is involved in colitis pathogenesis, mucosal host defense and epithelial immunity (3,7). Although further studies are needed, our results provide the fundamental basis for understanding why Hvem is an IBD risk gene, and they confirm that HVEM is a mucosal gatekeeper with multiple regulatory functions in the mucosa.
The purpose of this study was to investigate developmental trends in organization strategy for taxonomic and slot-fiber lists and category typicality, use of organization strategy in relation to developmental changes in category knowledge structure, emergent organization capacity and effects in category typicality on children's recall. Moreover, the influences of children's age, use of organization strategy, list types and category typicality on children's recap were figured out. The major results were as follows. 1. Children's recall use of organization strategy increased with age. That is, the older children performed better recap and used organization strategy on both list types than the younger children. 2. AU children performed recall and used organization strategy better for the slot-filler than taxonomic list. The 4-year-olds, however, demonstrated better recap and use of organization strategy for the slot-filler than taxonomic list. While the 6-year-olds and 8-year-olds showed no such differences. These findings were supported the view that script-based slot-filler categories have a strong influence on young children's memory performance. 3. At each age level, children showed higher level of recall and use of organization strategy for category typical than category atypical list. AU children received higher scores for the typical than atypical items on recap and use of organization strategy. 4. Children's age, use of organization strategy, list types, and category typicality of lists significantly predicted children's recap.58% of the variance of children's recap was explained by four variables.
This study was conducted to improve efficiency of a follicle culture system without reducing developmental competence of intrafollicular oocytes. Preantral follicles (100 to $125{\mu}m$ in diameter) of F1 hybrid (B6CBAF1) mice were cultured singly for 216 h in modified ${\alpha}$-MEM-glutamax medium, to which 2.5 IU/ml hCG and epidermal growth factor was added 16 h prior to the end of culture. Medium change was either performed three times (54 h interval), twice (72 h interval), once (108 h interval), or not at all (216 h interval). Maturation (progression to the metaphase II stage) of intrafollicular oocytes was detected from 4 days after culture in the three-times change treatment, while all treatments yielded mature oocytes from day 5 of culture. Compared with the three-times change, decreasing the change frequency to once did not reduce the capacity to begin maturation (germinal vesicle breakdown of 82 to 86%), to mature (78 to 79%) and to develop into blastocysts after parthenogenetic activation (29 to 32%). Morphological parameters were similar among these treatments. Except for the no medium change treatment, similar colony-forming activity of inner cell mass cells after culturing of blastocysts in leukemia inhibitory factor-containing medium was detected, while the morphology of the colony-forming cells deteriorated in the change-once treatment compared with the change twice or three-times. In conclusion, the efficiency of the preantral follicle culture system could be improved by reducing frequency of medium change up to a 72 h interval (three times in total 216 h culture) without decreasing developmental competence of oocytes.
In the present study, effects of concentration of cryoprotectant solutions on the nuclear maturation of vitrifiedthawed bovine oocytes were examined. Also, the developmental capacity of vitrified-thawed immature oocytes following ICSI was investigated. Oocytes were cultured in TCM-199 medium supplemented with 5% FBS at $38^{\circ}$C in 5% $CO_2$ and air. The in vitro maturation rate of vitrified oocytes was 24.5 ${\pm}$ 4.2%. The in vitro maturation rate of vitrified oocytes was lower than that of the control (72.0 ${\pm}$ 3.5%, p<0.05). The in vitro maturation rate of vitrified${\sim}$thawed oocytes incubated in TCM-199 medium supplemented with 1.0${\sim}$5.0 ug CB were 26.7 ${\pm}$ 3.2%, 35.7 ${\pm}$ 3.2%, 54.0 ${\pm}$ 3.0%, 42.5 ${\pm}$ 3.6%, respectively. The in vitro maturation rate (57.0 ${\pm}$ 3.0%) of the vitrified-thawed oocytes treated with 3.0 ${\mu}$g CB for 20 min was the highest of all vitrification groups, although the maturation rate were significantly (p<0.05) lower than those of fresh oocytes. The in vitro maturation rates of the vitrified-thawed (with EDS and EDT) oocytes were 53.8 ${\pm}$ 3.4%, 51.1 ${\pm}$ 3.5%, respectively. This results were lower than the control group (72.0 ${\pm}$ 3.0%). The in vitro developmental rates of the vitrified-thawed oocytes following ICSI were 28.6 ${\pm}$ 4.5%, 25.6 ${\pm}$ 4.3%, respectively. This results were lower than the control group (40.0 ${\pm}$ 4.0%).
Kim, Jin-Woo;Park, Hyo-Jin;Yang, Seul-Gi;Koo, Deog-Bon
한국동물생명공학회지
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제35권4호
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pp.347-356
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2020
Gangliosides are glycolipids in which oligosaccharide is combined with sialic acids. Our previous studies have suggested an interplay between ganglioside GD1a/GT1b and meiotic maturation capacity in porcine oocyte maturation. Furthermore, ganglioside GD1a and GT1b are known for its antioxidant activity, but it is still unclear whether possible antioxidant role of GD1a and GT1b is involved in porcine embryos development competence during in vitro culture (IVC). Here, the effects of ganglioside GD1a and GT1b on the embryonic developmental competence during in vitro culture of porcine were investigated. The effects of ganglioside GD1a and GT1b on the expression of ST3GAL2 were confirmed during embryos development (2-cell, 4-cell, 8-cell and blastocyst) using immunofluorescent staining (IF). As a result, the fluorescent expression of ST3GAl2 was higher in embryos at 4-8 cells stage than blastocysts. Blastocyst development rate significantly increased in only 0.1 μM GD1a and GT1b treated groups compared with control group. To investigate the cellular apoptosis, we analyzed TUNEL assay. In case of only 0.1 μM GD1a and GT1b treated groups, the total number of cells in blastocyst compared with control group, but there was no significant difference in the rate of apoptotic cells. We identified the intracellular ROS levels using DCF-DA staining. According to the result, ROS production significantly decreased in blastocysts derived from the 0.1 μM GD1a and GT1b treated groups. These results suggest that ganglioside GD1a and GT1b improve the developmental competence of porcine embryos via reduction of intracellular ROS during preimplantation stage.
Son, Young-Bum;Jeong, Yeon Ik;Jeong, Yeon Woo;Hossein, Mohammad Shamim;Hwang, Woo Suk
Animal Bioscience
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제35권9호
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pp.1360-1366
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2022
Objective: The present study analyzed the influence of co-transferring embryos with high and low cloning efficiencies produced via somatic cell nuclear transfer (SCNT) on pregnancy outcomes in dogs. Methods: Cloned dogs were produced by SCNT using donor cells derived from a Tibetan Mastiff (TM) and Toy Poodle (TP). The in vivo developmental capacity of cloned embryos was evaluated. The pregnancy and parturition rates were determined following single transfer of 284 fused oocytes into 21 surrogates and co-transfer of 47 fused oocytes into four surrogates. Results: When cloned embryos produced using a single type of donor cell were transferred into surrogates, the pregnancy and live birth rates were significantly higher following transfer of embryos produced using TP donor cells than following transfer of embryos produced using TM donor cells. Next, pregnancy and live birth rates were compared following single and co-transfer of these cloned embryos. The pregnancy and live birth rates were similar upon co-transfer of embryos and single transfer of embryos produced using TP donor cells but were significantly lower upon single transfer of embryos produced using TM donor cells. Furthermore, the parturition rate for TM dogs and the percentage of these dogs that remained alive until weaning was significantly higher upon co-transfer than upon single transfer of embryos. However, there was no difference between the two embryo transfer methods for TP dogs. The mean birth weight of cloned TM dogs was significantly higher upon single transfer than upon co-transfer of embryos. However, the body weight of TM dogs did not significantly differ between the two embryo transfer methods after day 5. Conclusion: For cloned embryos with a lower developmental competence, the parturition rate and percentage of dogs that remain alive until weaning are increased when they are co-transferred with cloned embryos with a greater developmental competence.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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