Oval cell is considered as facultative precursor cells for both hepatocytes and biliary cells, as well as origin of hepatocellar and cholangiocellular carcinoma (CCC) during carcinogenesis or toxic liver injury. To clarify the cellular origin or differentiation of cholagiocarcinogensis, the fate of carcinogen-induced oval cells was pathologically and phenotypically chased in Syrian golden hamster liver after Clonorchis sinensis (CS) infection which would give rise to a promoting effect. Two week treatment of hamsters with 0.005% diethylnitrosamine (DEN) followed by 2 week treatment of 1% 2-acetylaminofluorene (AAF) under choline deficient diet resulted in massive proliferation of BrdU labeleed and PCNA positive oval cells showing various distinct morphology, histochemical and immunohistochemical phenotypes for GGT, cytokeratin 19 and OV-6. Oval cells also frequently form ductular-like structures or phenotypically show hepatocyte-like characteristics. After CS infection, the oval cells showed sequential morphological changes to atypicl proliferating bile ductules and all hamsters thereafter developed well differentiated and anaplastic CCC at 16 week after CS infection. In electron microscopy, some bile ductules were constructed by intermediate oval cells and bile ductular cells surrounded by basement membrane. The results of this study strongly suggest that CCC developed in the present study were originated from hepatic stem-like oval cells, supporting the theory of stem cell origin of cancers. In addition, this hamster model would be valuable for the molecular mechanistic study during chemical-triggered cholangiocarcinogenesis.
This study was carried out to examine the role of small cells and oval cells in cholangiocarcinogenesis in the hamsters infected with Clonorchis(C) sinensis. Forty two female Syrian golden hamsters were divided into two groups. Group I was for the induction of the cholangiocarcinoma, which was infected orally with C sinensis and given dimethylnitrosamine(15ppm) in drinking water for 4 weeks. Group II was served as control. More than 5 heads of hamsters in each group were sacrificed at 4, 7, 11 and 15 weeks after the beginning of the experiment. The livers were examined histopathologically, electron microscopically and immunohistochemically. The results obtained were as follows; 1. Cholangiocarcinomas were occurred in 1 of 6 animals at 11 weeks and in 4 of 6 animals at 15weeks after the beginning of the experiment. 2. Small cells and oval cells were proliferated around the portal triads from 4 weeks and peaked at 11 weeks, and slightly decreased after then. 3. The strong positive reaction to the $\alpha$-fetoprotein was shown in many of small cells and oval cells. But ductlike oval cells, which were arranged rosette form, showed week positive reaction to the $\alpha$-fetoprotein. 4. Most of small cells and oval cells showed negative reaction to the cytokeratin. But weak positive reaction in ductlike oval cells, and moderate positive reaction in cholangiocarcinoma cells were observed. These results suggested that cholangiocarcinoma induced by infection of C sinensis was believed to originate from the proliferated small cells around the portal triads which would be able to differentiate to the oval cells, ductlike oval cells, and cholangiocarcinoma cells gradually.
This study purposed to evaluate a $CellPrep^{(R)}$ (CP) of liquid-based cytology (LBC) to search for a less expensive and automated alternative cytologic preparation technique applicable to usually encountered cytologic specimens. Cervicovaginal direct-to-vial split samples from 457 gynecologic patients, 40 body fluid samples, and 34 urine samples were processed with the CP technique and the results were compared with those of currently used $ThinPrep^{(R)}$ (TP) method. Both CP and TP methods provide evenly distributed thin layers of cells with little cellular overlaps or significant obscuring elements in most of cases. Staining quality of both preparations showed a little difference due to the difference of fixative solutions without significant distractions in cytologic interpretation. On the supposition that TP was a gold standard, sensitivity, specificity, positive predictive value, and negative predictive value of CP cytology were 89%, 98%, 86%, and 99% in the cervicovaginal smear, 89%, 82%, 80%, and 90% in body fluid, and all of these values were 100% in urine samples. To testify the availability of immunohistochemistry on CP preparations, cytokeratin, vimentin, and Ki-67 were applied on body fluid specimens, and all of these antibodies were specifically stained on targeted cells. Conclusively, the CP method gave comparable results to those of TP in terms of smear quality and cytologic diagnostic evaluation, and was available on immunohistochemistry. The CP method could offer a cost-effective and automated alternative to the current expensive techniques of liquid-based cytology on popular cytologic materials including cervicovaginal, body fluid, and urine specimens.
The trans-differentiation potential of mesenchymal stem cells (MSCs) is employed, but there is little understanding of the cell source-dependent trans-differentiation potential of MSCs into corneal epithelial cells. In the present study, we induced trans-differentiation of MSCs derived from umbilical cord matrix (UCM-MSCs) and from dental tissue (D-MSCs), and we comparatively evaluated the in vitro trans-differentiation properties of both MSCs into corneal epithelial-like cells. Specific cell surface markers of MSC (CD44, CD73, CD90, and CD105) were detected in both UCM-MSCs and D-MSCs, but MHCII and CD119 were significantly lower (P < 0.05) in UCM-MSCs than in D-MSCs. In UCM-MSCs, not only expression levels of Oct3/4 and Nanog but also proliferation ability were significantly higher (P < 0.05) than in D-MSCs. In vitro differentiation abilities into adipocytes and osteocytes were confirmed for both MSCs. UCM-MSCs and D-MSCs were successfully trans-differentiated into corneal epithelial cells, and expression of lineage-specific markers (Cytokeratin-3, -8, and -12) were confirmed in both MSCs using immunofluorescence staining and qRT-PCR analysis. In particular, the differentiation capacity of UCM-MSCs into corneal epithelial cells was significantly higher (P < 0.05) than that of D-MSCs. In conclusion, UCM-MSCs have higher differentiation potential into corneal epithelial-like cells and have lower expression of CD119 and MHC class II than D-MSCs, which makes them a better source for the treatment of corneal opacity.
11세령, 체중 2.67 kg, 암컷 Maltese의 기관 인근 경부에서 3주 전부터 종괴가 촉진되어 동물병원에 내원하였으며, 방사선 및 초음파 검사 결과 기관 및 미주신경 주위에 불투과성의 종괴가 확인되었다. 외과적으로 절제된 단일한 종괴의 크기는 $3.5{\times}2{\times}0.8cm$였다. 병리조직학적으로 큰 종양 병소가 정상 갑상선 조직과 혼재되어 있었다. 종양 병소는 형질세포와 같은 형태를 보이는 종양세포들이 모여 있는 다양한 크기의 소포로 구성되어 있고, 이 소포들은 미세한 섬유혈관중격에 의해 구획되어 있었다. 종양세포들은 인근 결합조직과 피막으로 침습하는 경향을 나타내었다. 면역조직화학염색을 실시한 결과 종양세포들은 사이토케라틴(AE1/AE3), 크로모그래닌 A, 신경원 특이 에놀라제(NSE)에 대하여 강한 양성 반응을, vimentin에는 음성 반응을 보이고 있었다. 육안병변, 병리조직학적 및 면역조직화학 염색의 특징을 토대로 본 증례는 갑상선수질암으로 진단되었다.
Hertwig's epithelial root sheath (HERS) consists of bi-layered cells derived from the inner and outer dental epithelia and plays important roles in tooth root formation as well as in the maintenance and regeneration of periodontal tissues. With regards to the fate of HERS, and although previous reports have suggested that this entails the formation of epithelial rests of Malassez, apoptosis or an epithelial-mesenchymal transformation (EMT), it is unclear what changes occur in the epithelial cells in this structure. This study examined whether HERS cells undergo EMT using a keratin-14 (K14) cre:ROSA 26 transgenic reporter mouse. The K14 transgene is expressed by many epithelial tissues, including the oral epithelium and the enamel organ. A distinct K14 expression pattern was found in the continuous HERS bi-layer and the epithelial diaphragm were visualized by detecting the ${\beta}$-galactosidase (lacZ) activity in 1 week postnatal mice. The 2 and 4 week old mice showed a fragmented HERS with cell aggregation along the root surface. However, some of the lacZ-positive dissociated cells along the root surface were not positive for pan-cytokeratin. These results suggest that the K14 transgene is a valuable marker of HERS. In addition, the current data suggest that some of the HERS cells may lose their epithelial properties after fragmentation and subsequently undergo EMT.
Background: This study was designed to investigate the role of the hepatocyte growth factor (HGF) with regards to differentiation of somatic stem cells originating from the human umbilical cord blood (UCB) into hepatic lineage cells in vitro culture system. Methods: Mononuclear cells from UCB were cultured with and without HGF based on the fibroblast growth factor (FGF)-1, FGF-2, and stem cell factor. The cultured cells were confirmed by immunofluorescent staining analysis with albumin (ALB), cytokeratin-19 (CK-19), and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) MoAb. ALB and CK-18 mRNA were also evaluated by reverse transcription-polymerase chain reaction. In order to observe changes in proliferating capacity with respect to the cultured period, CFSE with affinity to proliferating cells were tagged and later underwent flow cytometry. Results: In the HGF-treated group, cultured cells had a large oval shaped appearance with adherent, but easily detachable characteristics. In the HGF-non treated group, these cells were spindle-shaped with strong adherent characteristics. Expressions of ALB and CK-19 were evident in HGF-treated group compared to non-expression of those in to HGF-non treated group. Dual immunostaining analysis of the ALB producing cells showed presence of PCNA in their nuclei, and ALB and CK-18 mRNA were detected on the 21st day of cultured cells in the HGF-treated group. Conclusion: Our findings suggest that HGF has a pivotal role in differentiating somatic stem cells of human UCB into hepatic lineage cells in vitro.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제36권3호
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pp.172-176
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2010
Postirradiation extraosseous osteogenic sarcomas are uncommon in the head and neck, despite the extensive use of high-dose radiation. It has been described as de novo radiation-induced neoplasm. We present a 73-year-old male who had been treated by radiotherapy for gingival cancer 7 years earlier and later developed extraosseous osteogenic sarcomas (EOSs) of the neck. Microscopically, the neck mass was composed with mesenchymal malignant cells with cartilaginous and osteogenic differentiation. Immunohistochemical stain demonstrated strong positivity of tumor cells for Snail, the one of major epithelial-mesenchymal transition (EMT) inducer. The E-cadherin expression was scarce, showing inverse relationship to Snail expression. Compared with previous squamous cell carcinoma (SCC) of the gingiva, the present EOS sample revealed the remained epithelial cells on cytokeratin immunohistochemistry, suggesting the tumor arise from the cells of epithelial origin. We have also reviewed the previous 6 cases of head and neck EOSs carefully. The clinicopathologic features of the unusual lesion suggest that it is an incomplete EMT of precedent epithelial malignancy rather than de novo pathology.
Although subacute granulomatous thyroiditis(SGT) is usually diagnosed clinically, papillary carcinoma or other thyroid conditions must be considered in the differential diagnosis. We retrospectively reviewed the clinical and fine-needle aspiration(FNA) cytologic findings seen in 10 SGT cases to decide what are the most reliable cytologic findings and the most helpful molecular tools for reaching a confident cytologic diagnosis. The most representative smear slides were retrieved to perform immunocytochemistry for cytokeratin 19(CK19) and Ret protein. Five papillary carcinomas(PTCs) were included as controls. The constant and typical cytologic findings of SGT were multinucleated giant cells(MGCs) (100%), epithelioid granulomas(90%), an inflammatory dirty background(90%) and plump transformed follicular cells(80%) without fire-flare cells, oncocytic cells or transformed lymphocytes. The immunoreactivities for CK19(37.5%) and Ret(10%) of the follicular cells of SGT were less than those(CK19 and Ret:100%) of PTC. CK19 immunoreactivity of the MGCs was seen in only one case of PTC. There was no significant difference between CK19 and Ret immunocytochemical staining for the MGCs of both SGT and PTC. The results of this study demonstrate that the cytological diagnosis of SGT can be improved by employing a combination of the typical and constant diagnostic cytological features and immunocytochemical results.
The trophectoderm is one of the earliest cell types to differentiate in the forming placenta. It is an important for the initial implantation and placentation during pregnancy. Trophoblast stem cells (TBSCs) develop from the blastocyst and are maintained by signals emanating from the inner cell mass. However, several limitations including rarity and difficulty in isolation of trophoblast stem cells derived from blastocyst still exist. To establish a model for trophoblast differentiation, we isolated TBSCs from human term placenta ($\geq$38 weeks) and characterized. Cell cycle was analyzed by measuring DNA content by FACS analysis and phenotype of TBSCs was characterized by RT-PCR and FACS analysis. TBSCs have expressed various markers such as self-renewal markers (Nanog, Sox2), three germ layer markers (hNF68, alpha-cardiac actin, hAFP), trophoblast specific markers (CDX-2, CK7, HLA-G), and TERT gene. In FACS analysis, TBSCs isolated from term placenta showed that the majority of cells expressed CD13, CD44, CD90, CD95, CD105, HLA-ABC, cytokeratin 7, and HLA-G. Testing for CD31, CD34, CD45, CD71, vimentin and HLA-DR were negative. TBSCs were shown to decrease the growth rate when cultured in conditioned medium without FGF4/heparin as well as the morphology was changed to a characteristic giant cell with a large cytoplasm and nucleus. In invasion assay, TBSCs isolated from term placenta showed invasion activities in in vivo using nude mice and in vitro Matrigel system. Taken together, these results support that an isolation potential of TBSCs from term placenta as well as a good source for understanding of the infertility mechanism.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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