Objectives The present study was designed to investigate the effects of bee venom extract pharmacopunctureon (BVP) at 肩井 (GB21) on the changes in regional cerebral blood flow (rCBF) and mean arterial blood pressure (MABP) in normal rats, and further to determine the mechanisms. Methods We purchased rats about 300g and prepared diluted BVP with normal saline. And we injected diluted BVP to rats gradually progressed from 0.001 mg/kg to 0.1 mg/kg at corresponding region to GB21. After injection, we measured the changes in rCBF and MABP of rats. In addition, to determine the mechanisms of this changes, we did the same experiments twice more after pretreatment with indomethacin and metylene blue separately. Results BVP significantly increased rCBF but decreased MABP, suggesting that BVP potently may increase rCBF by dilating pial arterial diameter. Furthermore, the increase of BVP-induced rCBF and the decrease of BVP-induced MABP were significantly blocked by pretreatment with cyclooxygenase inhibitor, indomethacin (1 mg/kg, i.p.). But the increase of BVP-induced rCBF and the decrease of BVP-induced MABP were not blocked by pretreatment with guanylate cyclase inhibitor, methylene blue (0.01 mg/kg, i.p.). Conclusions These findings indicate that the action of BVP is mediated by cyclooxygenase. Furthermore these results suggest that BVP can increase rCBF in normal state, as well as improve the stability of rCBF in ischemic state.
Jeong, Hyun Woo;Kim, Jin Woo;Han, Yang Shin;Jeong, Jong Gil;Choi, Chan Hun
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.28
no.6
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pp.601-606
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2014
The purpose of this study is to research the effects of acupuncturing BL40 and ST36 and to determine the mechanism of action of acupuncturing BL40 and ST36 by measuring the changes of regional cerebral blood flow (rCBF) and mean arterial blood pressure (MABP) in normal rats. To determine the mechanism of action of acupuncturing BL40 and ST36, pretreatment with indomethacine and methylene blue was performed. Acupuncturing BL40 and ST36 significantly increased rCBF, and the increased rCBF by acupuncturing BL40 and ST36 was significantly inhibited by pretreatment with indomethacin (1 mg/kg, i.p.), an inhibitor of cyclooxygenase, and methylene blue($10{\mu}g/kg$, i.p.), an inhibitor of guanylate cyclase. Acupuncturing BL40 and ST36 decreased MABP, and decreased MABP by acupuncturing BL40 and ST36 was not changed by pretreatment with indomethacin and methylene blue. This result suggested that acupuncturing BL40 and ST36 might significantly increase rCBF by dilating arterial diameter and mechanism of acupuncturing BL40 and ST36 might be mediated by cyclooxygenase and guanylate cyclase.
The Journal of Korean Medicine Ophthalmology and Otolaryngology and Dermatology
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v.28
no.4
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pp.92-110
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2015
Objectives : The water extract of Bowon-tang composited with thePanax, AstragalusandGlycyrrhiza Radixhas been traditionally used for treatment of a sickly child and smallpox in oriental medicine. However, little is known about the regulatory effects of Bowon-tang on the production, expression and activity of immune mediators [nitric oxide, prostaglandin E2, inducible nitric oxide synthetase, cyclooxygenase-2], the macrophage activation factor production, the proliferation, subset expression, the killing activity, and the capping in immune cells.Methods : In this study, we investigated the effects of water extracts from Bowon-tang,Panax, AstragalusorGRin mouse immune cells or human Jurkat T cells. Each extract (25-200 ㎍/㎖)perse had no cytotoxic effect in unstimulated macrophages, but concentration-dependently regulated NO and PGE2production, iNOS expression, and COX-2 activity in mouse peritoneal macrophages with MAF stimulation. These regulatory effects were synergistically increased by their combination (Bowon-tang).Results : The extract of Bowon-tang concentration-dependently regulated T cell proliferation, CD4+and CD8+expression, and NK killing activity in mouse splenocytes and capping in Jurkat T cells.Conclusions : These results suggest that the water extract of Bowon-tang composited with thePanax, AstragalusandGRmay be useful for therapeutic drugs against a sickly constitution and immune diseases, probably by regulating the production of immune mediators.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.20
no.6
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pp.1612-1619
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2006
This Study was designed to investigate the mechanism of Mixture of Bambusae Caulis in Liquamen and Bamboo Extract on the change of regional cerebral blood flow (rCBF) and blood pressure (BP) in normal rats, and further to investigate cytokines production in serum of cerebral ischemic rats. Mixture were as follows ; Bamboo Extract extracted with distilled water at 98 $^{\circ}C$ for 3 hrs, Mixture of Bambusae Caulis in Liquamen and bamboo Extracts (MLE) mixed at the ratio 1 to 100 (MLE100), 1 to 50 (MLE50), 1 to 20 (MLE20), 1 to 10 (MLE10), 1 to 5 (MLE5). The results were as follows ; The MLE-induced increase in rCBF was significantly inhibited by pretreatment with indomethacin (1 mg/kg, I.p.), an inhibitor of cyclooxygenase as well as methylene blue (10 $^{\mu}g/kg$, I.p.), an inhibitor of guanylate cyclase. The MLE-induced increase in BP was significantly inhibited by pretreatment with methylene blue. In cytokines production in the serum drawn from femoral arterial 1 hr after middle cerebral artery occlusion, MLE5 significantly increased production of TGF-${\beta}$ and increased production of IL-10, but significantly decreased production of TGF-${\alpha}$ compared with control group. In cytokines production in the serum drawn from femoral arterial 1 hr after reperfusion, MLE5 significantly increased production of TGF-${\beta}$ and IL-10, but significantly decreased production of TGF-${\alpha}$ compared with control group. AS results above. And MLE5 had anti-ischemic effect by inhibiting TGF-${\alpha}$ production, and by accelerating IL-10 and TGF-${\beta}$ production.
Lee Soo-Jin;Choi Yung-Hyun;Lee Yong-Tae;Chung Kyung-Tae;Jeong Young-Kee;Choi Byung-Tae
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.20
no.1
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pp.65-68
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2006
It was examined the effect of fermented rice wine using mycelium of Phellinus linteus (FWPL) on the gastric mucosa of rat. The gastric mucosal lesions were not seen macroscopically in normal, but ethanol-administrated rats produced congestion and edema with a few local lesions. The administration of FWPL showed a similar pattern as like normal except trace histopathological changes. The results of Western blot analyses showed that the higher expression of inducible nitric oxygenase (iNOS), cyclooxygenase (COX)-1, COX-2, tumor necrosis factor-$\alpha$ and c-fos, especially COX-2, in the ethanol-administrated rat compared with normal rat. But FWPL-administrated rat showed a trace increase of these expression compared to normal rat. About immunohistochemical observations, weaker iNOS reactions were detected in mucous cells of epithelim of ethanol administrated rat compared with normal and FWPL-administrated rat. These results suggested that FWPL-administrated rat showed a trace changes on the mucus barrier-related protein expression compared with ethanol-administrated rat and thus FWPL may be use to develop a functional alcoholic beverage.
The Journal of Korean Medicine Ophthalmology and Otolaryngology and Dermatology
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v.28
no.3
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pp.14-29
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2015
Objectives : The extract of Sagunja-tang has been traditionally used for restorative treatment of constitutional weakness, vascular and immune disorder, and nervous disease in Oriental country. This study investigated the regulatory effects of Sagunja-tang on the expression, production, and activity of immune mediators.Methods : In this study, the extract of Sagunja-tang was prepared by extracting with distilled water at 100$^{\circ}C$ for 2.5h. The extract was freeze-dried following filtration through 0.45${{\mu}m}$ filter. The extract was dissolved in Hank's balanced salt solution (HBSS) and filtered again through 0.45${{\mu}m}$ filter before use. The level of nitrite, an oxidative product of nitric oxide(NO) was measured in the culture medium by the Griess reaction. The levels of prostaglandin E2(PGE2), Th1 cytokines (IFN-${\gamma}$, IL-2) and Th2 cytokines(IL-4, IL-5, IL-13) were measured by enzyme-linked immunosorbent assay and the protein levels of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2) expression were determined by Western blot analysis. Also examined the effects of the extract on T-cell proliferation and cytotoxic activity of natural killer cells.Results : In this investigation, Production levels of Th2 cytokines (IL-4, IL-5, IL-13) was inhibited in a dose dependent manner by treatment with the extract. I also found that the extract increased T-cell proliferation and cytotoxic activity of natural killer cells in a dose-dependent manner.Conculsions : These results suggest that the water extract of Sagunja-tang may be useful for a therapeutic drug against a sickly constitution and immune diseases, probably by regulating the production of immune mediators.
Objectives : Degenerative arthritis arises from several physiological factors. The purpose of this study is to investigate the beneficial effects of Phyto-extract Complex (CME) on degenerative arthritis. Methods : CME is composed of extracts of mulberry (Morus alba L.) fruit, mulberry leaves and black beans (Glycine max (L.) Merr.). To measure the toxicity of CME, we performed the single-dose toxicity study. For the evaluation of its effects on degenerative arthritis, we examined the inhibition of cyclooxygenase-2 (COX-2) activity, using in vitro enzyme activity assay, the reduction of protein expression of COX-2, 5-lipoxygenase (5-LO), and inducible nitric oxide synthase (iNOS) in RAW264.7 cells which were stimulated by lipopolysaccharide (LPS). We also examined the serum level of prostaglandins (PGs) and injury of the knee joint cartilage, using animal model of degenerative arthritis induced by mono-sodium iodoacetate (MIA). Results : CME did not have any toxicity in single-dose toxicity study. The CME inhibited the activity of COX-2 and could reduce the protein expression of COX-2, 5-LO and iNOS in RAW264.7 cells. The CME also reduced the serum level of PGs and prevented from the cartilage injury of knee joint in animal model of degenerative arthritis induced by MIA. Conclusions : Taken altogether, the CME could be useful for the improvement of degenerative arthritis through its various anti-inflammatory activities and prevention from the cartilage injury of knee joint.
Background: Celecoxib, a COX-2 specific inhibitor, has recently been used for the treatment of rheumatoid arthritis. However, the molecular and cellular mechanisms of celecoxib against RA inflammation remain to be defined. To elucidate the action mechanism of celecoxib on inflammatory cells, we investigated the effect of celecoxib on the production of two important mediators of inflammation, nitric oxide and PGE2 Methods: RAW 264.7 cells stimulated with LPS were preincubated with various concentrations of celecoxib (from $10^{-8}$ to $10^{-5}$ M) and $10{\mu}M$ hydrocortisone, respectively. The production of NO and PGE2, the end products of iNOS and COX-2 genes, were estimated in culture supernatants by Greiss method and EIA, respectively. The expression of iNOS gene, COX-2 gene, $NF-{\kappa}B$, and $I-{\kappa}B$ were determined by RT-PCR and western blot analysis. Results: Celecoxib and hydrocortisone inhibited the production of NO and PGE2 in dose dependent manner, when RAW 264.7 cells were stimulated with LPS. The expression of iNOS was also down-regulated by celecoxib and hydrocortisone. Interestingly, COX-2 gene differentially expressed according to the dose of celecoxib, a decrease with lower dose ($10^{-8}$ M) but an increase with higher dose ($10^{-5}$ M). $NF-{\kappa}B$ binding activity was decreased by lower dose of celecoxib, whereas was not affected by higher dose of it. The expression of $I-{\kappa}B$ was suppressed by higher dose of celecoxib. Conclusion: The celecoxib strongly suppressed the production of NO and PGE2 in LPS-stimulated RAW264.7 cells. The decrease of NO seems to be linked to the inhibition of iNOS by celecoxib. The lower and higher dose of celecoxib differentially regulated the COX-2 expression and $NF-{\kappa}B$ activity.
Kim, Ji-Young;Kim, Kyun-Ha;Suh, Hong-Suk;Choi, Won-Chul
Journal of Life Science
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v.16
no.7
s.80
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pp.1181-1187
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2006
HS-1580 series (HS-1580, HS-1581, HS-1582) can produce anti-imflammatory effects were synthesized from the marine algae extraction in 2,3,6-tribromo-4,5-dihydroxy benzyl methyl ether (TDB). Raw 264.7 cells were pre-treated with $1{\mu}g/{\mu}l$ lipopolysaccharide (LPS) and later treated with HS-1580 series. These cells of inflammatory mediators were tested as well. Nitric oxide (NO) is related to autoimmune disease and is produced by inducible NOS (iNOS). When treated with HS-1580 series, the product of NO will reduce in a dose-dependent manner. HS-1580 series significantly inhibit the iNOS protein expression. Cyclooxygenase (COX) involves with the various physiologic events and catalyzes in prostaglandin. HS-1580 series also inhibit the COX-2 protein expression as well as pro-inflammatory cytokines production such as tumor necrosis $factor-{\alpha}\;(TNF-{\alpha})\;and\;interluekin-1{\alpha]\;(IL-1{\beta})$. These upcoming results suggest that HS-1580 series have anti-inflammatory efforts in Raw 264.7 cells by inhibiting such as iNOS, COX-2, $TNF-{\alpha}\;and\;IL-1{\beta}$ as inflammatory mediators.
Glasswort has attracted an attention because of its interesting physiological actions. In this study, the effects of glasswort on inflammatory events including nitric oxide (NO) synthesis and arachidonic acid metabolism in cultured RAW264.7 macrophages were investigated. A series of solvent fractions, including fractions of hexane (Fr.H), ethyl ether (Fr.E), ethyl acetate, butanol, and water, were prepared from a 70% methanol extract of glasswort. Among the fractions, Fr.E showed the strongest inhibition of NO synthesis and inducible NO synthase (iNOS) expression in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated macrophages. At a concentration of $80{\mu}g/mL$, Fr.E decreased the NO and iNOS levels by 73 and 77%, respectively, after 24 h. Fr.E showed the most potent inhibitory effects on the expressions of cytosolic phospholipase $A_2$ and cyclooxygenase-2 with $IC_{50}$ values of 33.4 and $27.9{\mu}g/mL$, respectively. Fr.H and Fr.E also significantly inhibited 5-lipoxygenase expression in LPS-stimulated macrophages. These results suggest that the hydrophobic fractions of glasswort possess anti-inflammatory activities through modulating the arachidonic acid metabolism and NO synthesis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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