Actin cytoskeletal architecture is believed to be a crucially important modulator of chondrocyte phenotype. 2DG(2-Dexoy-D-glucose) induces reorganization of actin cytoskeletal architecture in chondrocytes. In this study, we have investigated the effects of 2DG on dedifferentiation and inflammation via reorganization of cytoskeletal architecture in rabbit articular chondrocytes, with a focus on p38 kinase pathway. Treatment of 2DG alone reduced type II collagen and COX-2 expression in chondrocytes. But, 2DG reduced type II collagen was recovered by CD, disruptor of actin cytoskeletal architecture, whereas did not affect on COX-2 expression and production of $PGE_2$ compared with 2DG alone treated cells. Treatment of 2DG with JAS, inducer of cytoskeletal architecture polymerization, accelerated reduction of type II collagen expression and synthesis of proteoglycan but did not affect on COX-2 expression and production of $PGE_2$. Also, 2DG stimulated activation of p38 kinase. This result showed that 2DG regulates type II collagen but not cyclooxygenase-2 expression through reorganization of cytoskeletal architecture via p38 kinase pathway in rabbit articular chondrocytes.
Collagen can be used in building artificial skin replacements for treatment of burns and towards the reconstruction of bone as well as researching cell behavior and cellular interaction. The strength of collagen in connective tissue rests on the characteristics of collagen fibers. 3D confocal imaging of collagen fibers enables the characterization of their spatial distribution as related to their function. However, the image stacks acquired with confocal laser-scanning microscope does not clearly show the collagen architecture in 3D. Therefore, we developed a new method to reconstruct, visualize and characterize collagen fibers from fluorescence confocal images. First, we exploit the tensor voting framework to extract sparse reliable information about collagen structure in a 3D image and therefore denoise and filter the acquired image stack. We then propose to segment the collagen fibers by defining an energy term based on the Hessian matrix. This energy term is minimized by a min cut-max flow algorithm that allows adaptive regularization. We demonstrate the efficacy of our methods by visualizing reconstructed collagen from specific 3D image stack.
Hepatic cirrhosis is an important feature of chronic liver disease. Liver cirrhosis is characterized by hyperaccumulation of fibrous tissue components and is commonly observed in latter or terminal states of chronic hepatic disease. The antifibrotic effects on liver cirrhosis by oriental herbs extraction material were examined in bile duct ligated rats. Oriental herbs extraction (0.99 mg/kg rat weight/day) was administrated to cirrohotic rats for 4 weeks. Liver collagen content of bile duct ligated rats was significantly increased. And liver histology showed collagen fiber deposition was increased as well as the normal architecture was lost with large zone of necrosis being observed. Herbs extraction administrated rats showed significantly decreased liver collagen content, accumulation of collagen fiber in histological analysis, and biochemical markers of hepatic diseases. Those results demonstrate the usefulness of herbs extraction materials as an antifibrotic agent for liver cirrhosis.
Liver cirrhosis is characterized by hyperaccumulation of fibrous tissue components and is commonly observed in latter or terminal states of chronic hepatic diseases. In this study, the antifibrotic effects of GLM001 on liver cirrhosis were examined in bile duct ligated rats and patients with hepatic diseases. GLM001 (250 mg/kg rat weight/ day) was administrated to cirrhotic rats for 4 weeks and to humans for 14 weeks. Bile duct ligated rats significantly increased liver collagen content and biochemical markers of hepatic injury. Liver histology showed collagen fiber deposition was increased and the normal architecture was lost with large zones of necrosis being observed frequently. GLM001 administrated rats showed significantly decreased liver collagen content, and accumulation of collagen fiber in histological analysis. Patients, who were treated with GLM001, showed decreases in biochemical markers of hepatic diseases. These results demonstrate the usefulness of GLM001 as an antifibrotic agent for liver cirrhosis.
본 연구는 상아질의 비교원성 단백질을 chondroitinase ABC (C-ABC)를 이용하여 제거함으로써 비교원성 단백질의 제거가 상아질 접착제의 미세인장결합강도와 교원질망의 형태에 미치는 영향을 상아질의 다양한 습윤상태에 따라 평가하고자 시행하였다. 비교원성 단백질의 상아질접착제의 미세인장강도에 대한 영향을 평가하기 위해 제 3대구치의 상아질을 노출시키고, 두 군으로 나누고 한 군은 C-ABC, 다른 군은 증류수를 $37^{\circ}C$에서 48시간 동안 적용한 후, 상아질의 습윤상태(wet, dry 및 re-wet)와 상아질 접착제(Single Bond 2, One Step Plus)를 다르게 이용하여 복합레진을 수복하였다. 24시간 후 가로 1 mm, 세로 1mm의 시편을 제작하고 미세인장강도를 측정하였다. 상아질 교원질의 형태변화를 관찰하기 위하여 상아질 시편에 산부식을 시행하고 C-ABC 적용 후, 시편을 제작하였고 미세인장강도 측정후 파괴된 접착면의 파괴양상과 각 접착제의 접착계면 관찰을 위하여 FE-SEM 관찰하였다. C-ABC 처리여부와 관계없이 습윤한 상아질면에 접착한 군은 모든 접착제에서 통계학적으로 유의성있는 미세인장결합강도의 차이를 나타나지 않았다(p > 0.05). C-ABC를 적용하였을 경우, Single Bond 2에서는 재수화한 상아질면에 접착한 군이 습윤한 상아질면에 접착한 군에 비해 미세인장결합강도가 감소하였다(p < 0.05). FE-SEM 관찰결과, C-ABC를 적용후에는 접착성 파괴가 주로 일어났으며, 교원질 섬유간 거리가 증가하였으며 부분적으로 교원질 섬유들간에 응집된 양상이 관찰되었다.
대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2-2
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pp.229.2-230
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2003
Extracellular matrix(ECM) is composed of the ground materials(proteoglycan) and nano size diameter fibrous proteins(ex. collagens) that together form a composite-like structure. In this study, fibrous scaffold with biomimetic architecture based on collagen nanofibers interpenetrated in PLGA/chitosan microfibrous matrix. Chitosan was selected for its structure similarity to glycosaminoglycan and neutralizing capacity for PLGA acidic metabolite. Collagen nanofiber were prepared by electrospinning. (omitted)
We attempted to reconstruct basement membrane (BM) in between the epidermal compartment and dermal compartment in the artificial skin preparation and examine its effect on the skin architecture as well as on the epidermal differentiation. Laminin, one of the component of BM, stimulate the migration of the basal cells but type IV collagen which is a major component of the mechanical network of BM did not stimulate epidermal migration. However laminin in the presence of type IV collagen at a 1:1 molar ratio did not stimulate epidermal migration but provide nice demarcation between epidermis and dermis. This mixture of laminin and type IV collagen enhanced epidermal differentiation in the artificial skin based on the morphological observation as well as biochemical criteria. The epidermal acquirement of migratory ability on the laminin-rich substrate suggest that this type of unbalance in the expression of the components of BM may prevail in the area of healing tissue and the invasive transition of the tumor. The result in this study provide the technical improvement in the artificial skin preparation and further application of this technique for the reconstruction of other bio-artificial organ.
Song, Joohyun;Lee, Eunjee A.;Cha, Seungwoo;Kim, Insun;Choi, Yonghoon;Hwang, Nathaniel S.
Biomaterials and Biomechanics in Bioengineering
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제2권1호
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pp.33-45
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2015
To engineer tissue-like structures, cells are required to organize themselves into three-dimensional networks that mimic the native tissue micro-architecture. Here, we present agarose-based multi-well platform incorporated with electrical stimulation to build skeletal muscle-like tissues in a facile and highly reproducible fashion. Electrical stimulation of C2C12 cells encapsulated in collagen/matrigel hydrogels facilitated the formation 3D muscle tissues. Consequently, we confirmed the transcriptional upregulations of myogenic related genes in the electrical stimulation group compared to non-stimulated control group in our multi-well 3D culture platform. Given the robust fabrication, engineered muscle tissues in multi-well platform may find their use in high-throughput biological studies drug screenings.
The achievement of tissue engineering can be highly depending on the capability to generate complicated, cell seeded three dimensional (3D) micro/nano-structures. So, various fabrication techniques that can be used to precisely design the architecture and topography of scaffolding materials will signify a key aspect of multi-functional tissue engineering. Previous methods for obtaining scaffolds based on top-down are often not satisfactory to produce complex micro/nano-structures due to the lack of control on scaffold architecture, porosity, and cellular interactions. However, a bioprinting method can be used to design sophisticated 3D tissue scaffolds that can be engineered to mimic the tissue architecture using computer aided approach. Also, in recent, the method has been modified and optimized to fabricate scaffolds using various natural biopolymers (collagen, alginate, and chitosan etc.). Variation of the topological structure and polymer concentration allowed tailoring the physical and biological properties of the scaffolds. In this presentation, the 3D bioprinting supplemented with a newly designed plasma treatment for attaining highly bioactive and functional scaffolds for tissue engineering applications will be introduced. Moreover, various in vivo and in vitro results will show that the fabricated scaffolds can carry out their structural and biological functionality.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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