Brain ischemia brings about hypoxic insults. Hypoxia is one of the major pathological factors inducing neuronal injury and central nervous system infection. We studied the involvement of mitogen-activated protein (MAP) kinase in hypoxia-induced apoptosis using cobalt chloride in C6 glioma cells. In vitro cytotoxicity of cobalt chloride was tested by MTT assay. Its $IC_{50}$ value was $400\;{\mu}M$. The DNA fragment became evident after incubation of the cells with $300\;{\mu}M$ cobalt chloride for 24 h. We also evidenced nuclear cleavage with morphological changes of the cells undergoing apoptosis with electron microscopy. Next, we examined the signal pathway of cobalt chloride-induced apoptosis in C6 cells. The activation of extracellular signal-regulated protein kinase 1/2 (ERK 1/2) started to increase at 1 h and was activated further at 6 h after treatment of 400 M cobalt chloride. In addition, pretreatment of PD98059 inhibited cobalt chloride-induced apoptotic cell morphology in Electron Microscopy. These results suggest that cobalt chloride is able to induce the apoptotic activity in C6 glioma cells, and its apoptotic mechanism may be associated with signal transduction via MAP kinase (ERK 1/2).
염분이 함유된 콘크리트 모사 세공용액 중에서의 철근 부식반응을 Tafel 분극법과 교류 임피던스법에 의해 비교 고찰하였으며, 철근 표면의 거칠기와 산화피막층에 의한 부식거동을 연구하였다. 전기화학적 교류 임피던스법에 의한 철근부식의 진단은 매우 유용하며, 제안된 모델과 실험결과가 잘 일치하였다. 염분농도가 증가할수록 부식전위는 cathodic-방향으로 이동하여 부식확률이 증가하였으며, 부식전류도 동일한 양상을 보였다. 철근 표면의 산화피막은 주사전자현미경과 AES (Auger electron spectroscopy)로 분석하였다. Torch로 15초간 열처리하여 형성된 철근표면의 산화피막은 오히려 철근부식을 촉진하였으며, 철근 표면의 거칠기가 증가할수록 부식속도는 증가하였다. 또한, 초기 콘크리트 모사세공 용액의 온도 증가는 철근 부식속도의 증가를 가져왔다.
We investigated the effects of a highly saline solution (HS) containing hypochlorous acid, calcium chloride ($CaCl_2$), and phosphoric acid ($H_3PO_4$) on cell death and growth rate of laver Porphyra yezoensis and green laver Ulva intestinalis. Cell death rates of laver treated with HS and HS plus hypochlorous acid (HS + HOCl) in the harvesting stage were less than 0.5%, and there were no significant differences between the HS and HS + HOCl treatments. However, cell death of green laver treated with HS + HOCl in the harvesting stage was greater than 81.2%. These results indicate that the addition of HOCl is highly effective to eradicate noxious green laver without causing damage to laver. The addition of HOCl and $H_3PO_4$ to HS did not increase the area or weight of laver blades. A combination treatment of $CaCl_2$ and HS, however, significantly increased the area and weight of laver lades compared to controls (P<0.05).
Cellulose(cell)/dimethylacetamide(DMAc)/lithium chloride(LiCl) solutions were prepared and spun to fibers in coagulants. Then, obtained fibers were annealed in appropriate chemicals. The fibers from cell/DMAc/LiCl showed cell III morophology prior to annealing without differenciating the kind of coagulants. Morphology of crystallite, however, was affected by annealing. Annealed fibers at 17$0^{\circ}C$ showed cell IV morphology and had better mechanical properties than others.
Heat shock protein 27 (Hsp27) is a molecular chaperone protein which regulates cell apoptosis by interacting directly with the caspase activation components in the apoptotic pathways. With the assistance of the Tat protein transduction domain we directly delivered the Hsp27 into the myocardial cell line, H9c2 and demonstrate that this protein can reverse hypoxia-induced apoptosis of cells. In order to characterize the contribution of Hsp27 in blocking the two major apoptotic pathways operational within cells, we exposed H9c2 cells to staurosporine and cobalt chloride, agents that induce mitochondria-dependent (intrinsic) and -independent (extrinsic) pathways of apoptosis in cells respectively. The Tat-Hsp27 fusion protein showed a greater propensity to inhibit the effect induced by the cobalt chloride treatment. These data suggest that the Hsp27 predominantly exerts its protective effect by interfering with the components of the extrinsic pathway of apoptosis.
서식수 염분농도의 변화에 따른 guppy(Poecilia reticulotus) 아가미 상피내 염소세포(chloride cell)의 미세구조적 변화를 전자현미경으로 관찰하고, 특히 증가하는 염분농도에 따라 주요변화를 보여주는 염소세포내 미토콘드리아와 tubular system의 면적을 영상 분석기로 측정하여 다음의 결과를 얻었다. 염소세포는 주로 guppy 아가미궁의 일차 총판상피에 위치하는데 담수에서는 하나씩 독립적으로 존재하며 자유면이 apical pit를 형성하여 외부환경에 노출되는 반면. 서식수의 염분농도가 증가하면 여러개의 염소세포들이 다세포복합체를 형성하고 이 세포들의 자유면이 함께 하나의 apical pit를 구성하게 된다. 서식수의 염분농도가 증가함에 따라 염소세포내의 미토콘드리아와 tubular system은 점점 더 조밀하게 분포하는 것으로 관찰되었다 염소세포의 단위면적당 미토콘드리아가 차지하는 면적은 서식수가 담수(0%의 염분농도)인 경우는 24$\pm$5%였고, 1%에서는 26$\pm$5%, 2%에서는 33$\pm$7% 그리고 해수(3.2% 염분농도)에 적응된 경우는 42$\pm$7%로 담수환경의 것과 비교하여 약 18%까지 증가하였다 또한 염소세포의 측면과 기저측 세포막 함입의 결과로 형성되는 tubular system은 세포의 단위면적당 차지하는 면적이 담수에 적응된 개체들에서 38$\pm$9%였고 서식환경의 염분농도에 따라 점차 증가하다가 해수에서는 61$\pm$9%로 약 16%까지 높아졌다.
Cyanidin 3 - rutinoside chloride (CRC) is major anthocyanin, found in Schisandra chinensis, is known to have antioxidant, anticancer, anti-inflammatory, tonic, and anti-aging effects in Korea, China and Japan. In the present study, the human mast cell line (HMC-1) was used to investigate the effects on the production of pro-inflammatory mediators. In this study, CRC showed no cytotoxicity in HMC-1. CRC significantly inhibited the secretion of inflammatory cytokines such as tumor necrosis factor $(TNF)-{\alpha}$ and interleukin (IL)-6 in PMA plus A23187 cacium ionophore (PMACI)-stimulated HMC-1 cells. In addition, CRC suppressed the serum levels of IgE. Furthermore, CRC decreased the PMACI- stimulated phosphorylation of mitogen activated protein kinases (MAPKs) such as p-ERK, p- JNK and p-P38. These results indicate that the pharmacological actions of CRC suggest their potential activity for treatment of allergic inflammation through the down-regulation of mast cell activation.
Tributyltin chloride (TBTC) at concentrations of $0.5-1.0\;{\mu}M$ inhibits dopamine biosynthesis in PC12 cells. In this study, the effects of TBTC on L-3,4-dihydroxyphenylalanine (L-DOPA)-induced cytotoxicity in PC12 cells were investigated. TBTC at concentrations up to $1.0\;{\mu}M$ neither affected cell viability, nor induced apoptosis after 24 or 48 h in PC12 cells. However, TBTC at concentrations higher than $2.0\;{\mu}M$ caused cytotoxicity through an apoptotic process. In addition, exposure of PC12 cells to non-cytotoxic (0.5 and $1.0\;{\mu}M$) or cytotoxic $(2.0\;{\mu}M)$ concentrations of TBTC in combination with L-DOPA (20, 50 and $100\;{\mu}M$) resulted in a significant increase in cell loss and the percentage of apoptotic cells after 24 or 48 h compared with TBTC or L-DOPA alone. The enhancing effects of TBTC on L-DOPA-induced cytotoxicity were concentration- and treatment time-dependent. These data demonstrate that TBTC enhances L-DOPA-induced cytotoxicity in PC 12 cells.
본 연구는 인간 폐암세포의 저산소 상태를 재현하기 위한 $CoCl_2$의 처리 조건을 최적화 하였고, 최적화 된 저산소 상태에서 인간 폐암세포의 암화 과정 및 기전을 규명하였다. 인간 폐암세포, A549와 H460에 500 ${\mu}M$$CoCl_2$를 24시간 처리하였을 때 저산소 상태의 대표적인 전사인자, HIF-$1{\alpha}$의 발현이 증가함을 확인하였고 인간 폐암세포들의 성장에는 전혀 영향을 미치지 않음을 확인하였다. 또한 $CoCl_2$를 처리한 인간 폐암 세포에서 상피-중간엽 이행(epithelial-to-mesenchymal-like transition)의 대표적인 마커인 E-cadherin 발현의 감소와 ${\alpha}$-SMA의 증가를 확인하였고, 세포-세포 간 junction 부위가 깨어짐을 E-cadherin 형광염색 실험을 통하여 확인하였다. 더 나아가 $CoCl_2$를 처리한 인간 폐암 세포에서 상피-중간엽 이행의 분자적 기전을 밝히기 위해 세포벽에 존재하는 인테그린(integrin)의 발현을 웨스턴 블랏팅과 FACS분석을 통하여 알아본 결과, $CoCl_2$를 처리한 인간 폐암세포에서 인테그린 ${\beta}3$발현의 증가를 확인하였다. 뿐만 아니라, $CoCl_2$를 처리한 인간 폐암세포에서 인테그린 ${\beta}3$의 하부 신호전달 물질인 국소부착 카이네이즈(FAK)의 인산화가 증가함을 확인하였다. 상기의 결과로서, 국소부착 카이네이즈의 인산화를 저해함으로써 인간 폐암세포가 악성세포로 전이되는 것을 저해할 수 있을 것으로 기대 되어진다.
To clerify the protective effect of omega-3 of polyunsaturated fatty acid docosahexaenoic acid (DHA) on the cytotoxicity induced by organic mercury in cultured NIH3T3 fibroblasts. The measurement of cell viability on ogranic mercury wad done by XTT assay after NIH3T3 fibroblasts were cultured with various concentrations of methyl mercuric chloride (MMC). And also, the effect of DHA on the MMC-mediated cytotoxicity was examined by cell viability, and antioxidant effect of DHA was also assessed by superoxide dismutase (SOD)-like activity and the lipid peroxidation activity in cultured NIH3T3 fibroblasts. In this study, MMC decreased cell viability and $XTT_{50}$ value was determined at $50{\mu}M$ of MMC in these culture. In the effect of DHA against the cytotoxicity induced by MMC, DHA significantly increased the cell viability damaged by MMC in cultured NIH3T3 fibroblasts. And also, DHA showed the antioxidant effect by showing the increase of SOD-like activity and the decrease of lipid peroxidation activity. From these results, it is suggested that organic mercury such as MMC has highly toxic effect on cultured NIH3T3 fibroblasts, and also, omega-3 of polyunsaturated fatty acid, DHA showed the protection on MMC-induced cytotoxicity and antioxidant effect.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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